DUPLICACIÓ DE L’ADN I TRANSCRIPCIÓ Unitat 10
ADN
1- Duplicació de l’ADN Hipòtesi semiconservativa: Watson&Crick
Experiment de Meselson i Stahl Escherichia coli
2. Com creixen els nous filaments DNA- Polimerassa: Pot sintetitzar DNA in vitro (PCR) Que necessita: Desoxiribonucleòtids: A, T, G i C Ions Mag2+ Un patró de DNA (“template”) Un encebador (“Primer”)
2.2- Problemes de la direcció de duplicació in vivo Experiment de Cairns (1963): Bidireccional Un sol origen de replicació Dilemes: La polimerassa no pot sintetizar ADN sense encebador Si els dos filament de la forquilla creixen en paral.lel, un ho ha de fer en direcció 3´----5
1968- Okazaki: solució al dilema Fragments d’Okazaki: sintetitzats per l’ARN polimerassa que no necessita encebador i després per l’ADN polimerassa Animació Fragments Okazaki
3- Mecanisme de duplicació: Procariotes
1- Una Senyal d’inici 2- Helicasa: Trenca les ponts d’hidrogen entre filaments Tropoisomerasa: Elimina les tensions de la resta de l´ADN enroscat 3- Proteïnes estabilitzadores (SSB): Mantenen la separació dels dos filaments. FORQUETA DE REPLICACIÓ Tot aquest procés és bidireccional
4- RNA Polimerasa (Primasa): Sintetiza un fragment d’ADN sobre el motlle (encebador) 5- ADN Polimerassa III: Sintetitza ADN en direcció 5´-----3´. Aquest filament es de creixement continu i conductor Sobre l´altre motlle (ADN), es forma un filament d’ARN d’uns 40 nucleòtids sobre els que la polimerassa sintetiza l’ADN d’uns mil nucleòtids (Fragments d’Okazaki) 6- La DNA polimerassa I retira l’ARN i omple els buits amb ADN La DNA Ligassa empalma els diferents fragments entre si (filament de creixement discontinu i retardat). 7- Cada filament es sintetizat en part de forma continua i en part de forma discontínua
Vídeo Replicació ADN Video Replicació ADN II
3.2- Duplicació en eucariotes Diferències respecte procariotes: ADN lligat a Histones: El filament motlle del filament conductor es queda les histones i tots dos s’enrotllen sobre els octàmers antics. El filament motlle del retardat s’enrotlla sobre nous octàmers d’histones ADN eucariotes més llarg: Hi ha vàries bombolles de replicació (Replicons) i és un procés molt més lent que en procariotes.
Expressió del missatge genètic
4. La teoria un gen-un enzim 4.1- Investigació de Garrod Alcaptonuria: Artritis i ennegriment dels catílags Conceptes: Gen: Tros d’àcid nucleic que du informació per a un caràcter Locus: Lloc que ocupa un gen al cromosoma Diploide/haploide Gen dominant/gen recessiu Al.lel: Cadascun dels gens que ocupen un mateix locus Alcaptonuria : Malaltia hereditària Recessiva
4.2- Formulació de la teoria 1948. Beadle&Tatum
Expressió del missatge genètic: Procariotes Promotor: No es trascriu. Seqüències de consens RNA Polimerasa Iniciació, elongació, finalització i maduració ( tan sols RNAt i RNAr)
EUCARIOTES Varis RNA polimerases Gens: Introns i exons RNAm madura
Resum transcripció Eucariotes 1- Iniciació: Regió Promotor: Té unes seqüències consens (CAAT i TATA). Fixació de l´ARN polimerasa i factors de transcripció (proteïnes)
ElongacióMetilguanosinatrifosfat invertida (
Finalitzatció
Maduració: Nucli
http://www.youtube.com/watch?v=qOA25GbUkdA http://www.youtube.com/watch?v=CWLgALHiIvI&feature=related Video transcripcio
Expressió del missatge genètic. Traducció
http://www.youtube.com/watch?v=FNqmh4PoMPQ http://www.youtube.com/watch?v=D5vH4Q_tAkY&feature=player_embedded