Lutzomyia Barcode Initiative 65 Tipificación molecular de especies potencialmente vectores de leishmaniosis en Colombia mediante el gen Citocromo Oxidasa I (COI) María Angélica Contreras G.1, Rafael José Vivero G. 1, Richard Onalby Hoyos L2., Juan David Suaza 2, Andrés López.2, Carolina Torres G. 1, Sandra Uribe Soto2, , Iván Darío Velez B.1 1 Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales, PECET. Universidad de Antioquia, 2 Grupo de investigación en Sistemática Molecular . Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín INTRODUCCIÓN A C G T C A T G A C T Lutzomyia Barcode Initiative Las especies del género Lutzomyia (Diptera: Psychodidae) son de interés médico, por el rol que cumplen como vector de Leishmania, agente causal de la leishmaniosis en América. Allí radica la importancia del estudio de este grupo de dípteros, cuya determinación taxonómica se basa en caracteres morfológicos, sin embargo, en la actualidad los caracteres moleculares surgen como herramientas útiles para la taxonomía y sistemática de este grupo, así mismo, el proyecto “Lutzomyia Barcoding Initiative” (LBI) se ha implementado como descriptor en taxonomía molecular al asignar haplotipos del gen Citocromo Oxidasa I (COI). El objetivo de este trabajo es tipificar mediante el fragmento 5’ del gen mitocondrial COI especies del género Lutzomyia, al asignar haplotipos y correlacionar la separación de especies con los dos esquemas de clasificación de flebotomíneos americanos basados en morfología. METODOLOGÍA RESULTADOS MPM ( - ) AM72 AM24 AB11 AB5 AB4 EXPERIMENTO 007-002 Marzo 18 2009 682 pb Número de individuos Especies del género Lutzomyia Número de Haplotipos 4 L. spinicrassa 3 L. evansi 2 L. bifoliata 1 L. trapidoi L. longipalpis L. panamensis L. longiflocosa L. trinidadensis L. cayennensis L. cruciata L. gomezi L. eduntula L. yuilli L. antunesi L. runoides 24 15 22 Cabeza, Alas, Abdomen Tórax Aclaración en lactofenol Extracción de ADN Protocolo Collins et al 1987 PCR- 5´COI 648 pb LCO/HCO (Herbert 2003) Secuenciamiento Determinación Molecular Determinación Morfológica Fotografía. María Angélica Contreras http://www.ca.uky.edu/entomology/faculty/brown/index_files/Page629.htm Comparación distancias genéticas Mínima Máxima Intraespecífico 0,002 0,019 L. spinicrassa L. evansi Interespecífico 0.077 0,249 L. Longiflocosa – L. spinicrassa L. evansi – L. runoides CONCLUSIONES L. bifoliata_1 L. bifoliata_2 L. spinicrassa_1 L. spinicrassa_2 L. spinicrassa_3 L. spinicrassa_4 L. evansi_1 L. evansi_2 L. evansi_3 L. edentula L. cruciata L. gomezi L. trinidadensis L. cayennensis c L. yuilli L. runoides L. antunesi L. longiflocosa L. trapidoi L.trapidoi_2 L.longipalpis L.longipalpis_2 L. panamensis L. panamensis_2 Se confirma la consistencia del fragmento gen Citicromo oxidasa I como marcador molecular a nivel intra e interespecífico. La variabilidad haplotípica encontrada entre las especies del género Lutzomyia analizadas, corresponde con la separación basada en morfología, sugerida por Galati, en su esquema de clasificación. La determinación molecular se constituye en una alternativa para apoyar y argumentar la taxonomía basada en caracteres morfológicos.