DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y DE LA AGRICULTURA CARRERA DE INGENIERIA AGROPECURIA TRABAJO DE TITULACIÓN, PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE INGENIERO AGROPECUARIO AUTORES: ORDÓÑEZ GAMBOA, CARLOS ANDRÉS RECALDE VILLALBA, VANESSA CAROLINA DIRECTOR: Dr. NARANJO , IVÁN SANTO DOMINGO 2017

“ESTUDIO DE LA REVERSIÓN SEXUAL EN TILAPIAS OREOCHROMIS SSP POR EL MÉTODO DE INMERSIÓN CON 17 ALFA METIL TESTOSTERONA”

INTRODUCCION FAO (2003) Alvarado (2015) 100% de masculinización Explotación acuícola en el Ecuador experimenta un comportamiento de crecimiento Obteniéndose como resultado una gran demanda de alevines con porcentajes elevados sobre el número de machos Pesos finales de: machos 429,3 gramos hembras 339,7 gramos Cultivó la especie Oreochromis niloticus Alvarado (2015) Técnica por inmersión Técnica por vía oral Demanda de la hormona es mínima Amigable con el ambiente Económicamente rentable Resultados de reversión sexual bajos 100% de masculinización Costos muy elevados de producción REVERSIÓN SEXUAL

MARCO TEÓRICO Origen Distribución Aspectos básicos de la tilapia roja África y el Cercano Oriente Mutación albina de Oreochromis mossambicus (Castillo, 2011). Ecuador la especie se cultiva en el Oriente y la región Litoral o Costa (Marcillo y Landívar, 2008) Aspectos básicos de la tilapia roja Hábitos reproductivos Completo programa de selección genética Exigencia en rendimientos Altas densidades de siembra Adapta fácilmente a altas salinidades y bajas temperaturas Susceptible a perdidas por mortalidad Madurez temprana: 30-40 g. en un intervalo de 2-4 meses Normalmente, una hembra realiza 8-12 puestas en un año en condiciones favorables de temperatura. Cada puesta puede contener entre 200 y 2000 huevos.

Testosterona Mecanismo de acción hormona 17 α metil testosterona inmediata disolución de sus cristales en alcohol. Técnica vía oral residualidad del 1% no conlleva a un riesgo para el consumo humano Técnica por inmersión residualidad menores a 0.1 μg/l. Mecanismo de acción Desarrollo de los caracteres sexuales secundarios, comportamiento reproductor, maduración de los gametos masculinos, contribuye al crecimiento general y a la síntesis de proteína. La testosterona inhibe y suprime la maduración de los folículos ováricos en el sexo femenino, lo que se conoce como fenómeno de virilización (Hurtado 2005)

Materiales y Metodos Ubicación política Ubicación geográfica Provincia: Santo Domingo de los Tsáchilas Cantón: Santo Domingo Parroquia: Chiguilpe Sector: Barrio “La Merced” Coop. Unificados Ubicación geográfica Norte: 9971303 Este: 0705593 Elevación: 603 m.s.n.m

Métodos Diseño experimental Factores a probar El factor a probar son las diferentes dosis de 17 alfa metil testosterona. Tratamientos a comparar Tabla 3. Tratamientos y dosis de 17 alfa metil testosterona   TRATAMIENTO 1 2 3 4 5 6 DOSIS 0 mg/l 0.5 mg/l 1 mg/l 1.5 mg/l 2 mg/l 2.5mg/l 60 mg/Kg alimento

Tipo de Diseño Se utilizó el Diseño Completamente al Azar (DCA). Características de las Unidades Experimentales (UE) No. total de tinas: 28 No. alevines por tina: 100 No. total de alevines: 2 800 Diámetro de la tina (m): 0,48 Profundidad de la tina (m): 0,18 Área total de la tina (m²): 0,18 Capacidad (m³): 0,020 Separación entre tina (m): 0,5 Área útil del ensayo (m²): 4,68 Área total del ensayo (m²): 20

Figura 1. Disposición de los tratamientos en el laboratorio de reversión sexual Croquis del ensayo Cada tratamiento tiene cuatro tinas de 0,48 m de diámetro con una capacidad de 20 l

Variables a medir Parámetros productivos Mortalidad- Biomasa inicial y final- Conversión alimenticia Porcentaje de reversión sexual

Métodos específicos de manejo del experimento Fase de campo

Metodología para la reversión sexual por inmersión Tabla 6. Cantidad de solución masculinizante requerida por tratamiento Tabla 5. Tasas y frecuencia de alimentación Etapa Rango de peso (g) Cantidad de alimento (% biomasa) Frecuencia de alimentación Levante 1.0 – 10 8 6 veces al día. 3 en la mañana y 3 en la tarde. 10.1 – 15 5 15.1 – 20 4.5 20.1 – 30 4 Pre engorde 20 – 50 Tratamient o Dosis (mg/l) Tina de reversió n (l) Concentració n Etanol 0.1% (ml) Dosis total (mg) # inmersione s # repeticione s Total hormon a (g) 8.33 6 4 1 0.5 4.1 7 0.09 2 8.3 3 0.20 3 1.5 12. 49 0.30 16. 66 0.40 5 2.5 20. 83 0.50 60* - 216 0.85 Total   2.34

RESULTADOS Parámetros físicos Tabla 7. Parámetros fisicoquímicos del agua durante la investigación.   Tratamientos Parámetros 1 2 3 4 5 6 Oxígeno disuelto (mg/l) 6,29 6,67 6,31 6,89 6,25 6,32 6,73 Temperatura (ºC) 22,06 22,75 22,38 22,42 22,58 22,1 22,39 pH 7,5 7,1 7,3 7,4

Conversión alimenticia ADEVA del estudio de la reversión sexual en tilapias por inmersión utilizando 17 alfa metil testosterona Tabla 8. Análisis de varianza para mortalidad, reversión, biomasa final y conversión alimenticia. Fuentes de variación Grados de libertad Cuadrados medios Mortalidad (%) Reversión (%) biomasa final (g) Conversión alimenticia Tratamientos 6 9,85 ns 284,75 * 1127,32 ns 20,45 ns Error experimental 21 5,11 76,99 1107,08 46,62 Total 27 Coeficiente de variación 63,27 13,99 47,95 39,96 p-valor   0,1232 0,0115 0,4405 0,8447 * Significativo ns No significativo

Mortalidad Gráfico 1. Análisis de la mortalidad en alevines con las diferentes dosificaciones de la hormona 17 alfa metil testosterona por inmersión y a través del alimento.

Reversión sexual Gráfico 2. Comportamiento de la reversión sexual por inmersión y a través del alimento en alevines de tilapia sometido a diferentes dosificaciones de la hormona 17 alfa metil testosterona.

Biomasa final Gráfico 3. Análisis de la biomasa final de los alevines de tilapia obtenida en 100 días de edad en los diferentes tratamientos de inclusión de la hormona masculinizante por inmersión y por vía oral.

Conversión alimenticia Gráfico 4. Comportamiento de la conversión alimenticia de alevines de tilapia como resultado de la aplicación de diferentes dosis de la hormona 17 alfa metil testosterona por inmersión y a través del alimento.

Análisis de correlación de las diferentes dosis de 17 alfa metil testosterona para la mortalidad y reversión sexual Gráfico 5. Contraste lineal del porcentaje de la mortalidad en alevines de tilapia.

Gráfico 6. Contraste lineal del porcentaje de la reversión sexual en alevines de tilapia.

Análisis económico Tabla 9. Estimación y comparación de costos entre los tratamientos y el porcentaje de reversión sexual alcanzado.   Tratamientos Descripción 1 2 3 4 5 6 Recursos humanos 74,28 Recursos físicos 183,21 184,29 185,61 186,81 188,01 189,21 203,73 Servicios básicos 7,21 Imprevistos 2,14 Total 266,84 267,92 269,24 270,44 271,64 272,84 287,36 % Reversión sexual 59 47 64 66 67 75 61

CONCLUSIONES La masculinización obtenida con la metodología de reversión sexual por inmersión resulto ser más eficiente, ya que la inducción del alevín no depende de la cantidad de alimento consumido, contrario a lo que sucede en una reversión por vía oral a través del alimento, sino solo a la concentración de la hormona en el agua, implicando una mejor asimilación del andrógeno por parte de los alevines tratados. La técnica de evaluación histológica es muy exacta para determinar el sexo del alevín a temprana edad, por lo que el tamaño de la muestra debe ser altamente representativa con el menor número de ejemplares posible, a fin de no causar pérdidas económicas considerables por el sacrificio de los alevines. La técnica de reversión por inmersión resultaría ser más amigable con el ambiente, ya que 2,5 mg/l de hormona masculinizante en el agua es mucho más bajo que 60 mg/kg utilizados en la técnica tradicional, por lo que se generan menores cantidades de residuos en el agua. Con la utilización de la técnica de inmersión en el proceso de reversión sexual se obtiene una mejor rentabilidad, porque su costo de producción es menor, justificando así su reemplazo de ésta técnica por la de reversión sexual por alimento.

RECOMENDACIONES Para el proceso de reversión sexual por inmersión se requiere tener una adecuada instalación de aireación, para asegurar la correcta mezcla de la hormona en el agua y así evitar que el porcentaje de masculinización se vea comprometida. Constar de un plan riguroso para el manejo de densidades y así lograr un adecuado crecimiento y desarrollo del alevín al momento de la cosecha. Equiparse de un sistema de filtrado de agua para evitar el ingreso de microorganismos y zoosporas causantes de enfermedades que aumenten los valores de mortalidad. Realizar cuidadosamente la limpieza de fondo y el recambio de agua para no causar estrés en los alevines.