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Resultados de laboratorio de efectos de drogas sobre músculo liso aislado. Paula Benavides Zamora A80906 Daniel Guevara Bertsch A82860 Sindy Mora Gutiérrez.

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1 Resultados de laboratorio de efectos de drogas sobre músculo liso aislado. Paula Benavides Zamora A80906 Daniel Guevara Bertsch A82860 Sindy Mora Gutiérrez A84193 Karina Román Méndez A75697

2 Objetivos 1.Determinar y comparar el efecto sobre el tono, la amplitud y la frecuencia de contracción de la acetilcolina, adrenalina y pilocarpina sobre el músculo liso aislado de conejo en solución Tyrode con respecto a un control. 2.Observar y analizar la modificación sobre el tono, la amplitud y la frecuencia de contracción que produce la atropina con respecto a un control, y el efecto sobre la atropina al añadir acetilcolina en el músculo liso de intestino de conejo aislado en solución Tyrode. 3.Determinar y analizar la respuesta en torno a la excitabilidad y la contractibilidad del músculo liso aislado de conejo en solución Tyrode, al agregar sustancias que cambian las concentraciones de iones en el LEC, tales como EDTA y KCL, comparadas con un control.

3 Generalidades del musculo liso. Contracción depende de la concentración intracelular de calcio. El calcio aumenta intracelularmente por diferentes medios lo cual le permite una variedad grande de maneras de contraerse y una variedad de estímulos que realizan esto. Su regulación radica en la cadena liviana de miocina(MLC)

4 Figura 1.0 : Los 3 mecanismos responsables de la generación de Corrientes de calcio transientes que desencadena la contracción del musculo liso. En la figura A, vemos como canales operados por receptores o un oscilador de membrana inducen a la despolarización de la membrana que induce a la entrada de calcio y la contracción. En la figura B vemos como un oscilador citosolico induce la despolarización que induce una entrada de calcio que genera la contracción. En la figura C vemos como un oscilador en las células intersticiales de Cajal induce la despolarización de la membrana.(Berridge 2008) Fuente: Berridge, M. J.Smooth muscle cell calcium activation mechanisms. The Babraham Institute, Babraham, Cambridge UK.J. Physiol 586.21 (pp 5047–5061) 2008

5 Fuente: Sanders, K.M. Regulación de la excitación de musculo liso y su contracción.Department of Physiology and Cell Biology, University of Nevada School of Medicine, Reno, NV, USA. Neurogastroenterol Motil (Suppl. 1), (pp 39– 53) 2008. Fig 1.

6 Control Inicial Figura 3.0: Registro de control sobre el músculo liso aislado de intestino de conejo en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 4, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

7 Figura 27. El oscilador Citosolico de calcio responsable de la actividad marcapaso de las células intersticiales de Cajal, libera pulsos periódicos de calcio que forman una onda de calcio. El incremento de Ca2+ activa canales de Cl- (CLCA) que dan corrientes de entrada espontaneas transientes (STICS) que se suman para formar la corriente espontanea de despolarización (STD) que resulta en la generación de ondas lentas de despolarización de la membrana. La corriente al moverse a través de la GAP junctions permite esas ondas de transmitirse a las células vecinas de musculo liso y se contraen. Fuente: Berridge, M. J.Smooth muscle cell calcium activation mechanisms. The Babraham Institute, Babraham, Cambridge UK.J. Physiol 586.21 (pp 5047–5061) 2008

8 Resultados de Acetilcolina Figura 3: Registro del efecto de la acetilcolina sobre el músculo liso aislado de intestino de conejo en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 4, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

9 Figura 4. Promedio de las variaciones en el tono del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de acetilcolina. Fuente. Anexo 1, cuadro 1

10 Figura 5. Promedio de las variaciones en la frecuencia de contracción del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de acetilcolina. Fuente. Anexo 1, cuadro 2

11 Figura 6. Promedio de las variaciones en la amplitud del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de acetilcolina. Fuente. Anexo 1, cuadro 3

12 Fuente: Billington Charlotte K., Le Jeune Ivan R Young Kenneth W. and Hall Ian P. 2008. A major functional role for phosphodiesterase 4D5 in human airway smooth muscle cells. American journal of respiratory cell and molecular biology, 38(1), 1-7. Cuadros extraído de referencias del articulo.

13 Resultados de Adrenalina. Figura 7: Registro del efecto de la adrenalina sobre el músculo liso aislado de intestino de conejo en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 4, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

14 Figura 8: Promedio de las variaciones en el tono del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de adrenalina. Fuente: anexo 1, cuadro 4.

15 Figura 9: Promedio de las variaciones en la frecuencia de las contracciones del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de adrenalina. Fuente: anexo 1, cuadro 5

16 Figura 10: Promedio de las variaciones en la amplitud de las contracciones del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de adrenalina. Fuente: anexo 1, cuadro 6.

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18 Membrana Celular β Receptor Adrenalina β G α GTPGDP Adenilato Ciclasa PK-A MLCK HIPERPOLARIZACIÓN AMPc k+ Fuente: Presentación realizada por estudiantes de medicina, resultados de laboratorio efecto de drogas en músculo liso aislado, 2007. Modificada 2011

19 Resultados de Pilocarpina. Figura 11: Registro del efecto de la pilocarpina sobre el músculo liso aislado de intestino de conejo en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 7, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

20 Figura 12: Promedio de las variaciones en el tono del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de pilocarpina. Fuente: anexo 1, cuadro 7

21 Figura 13: Promedio de las variaciones en la frecuencia de las contracciones del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de pilocarpina. Fuente: anexo 1, cuadro 8.

22 Figura 14: Promedio de las variaciones en la amplitud de las contracciones del músculo liso de intestino de conejo al agregar 5 gotas de pilocarpina. Fuente: anexo 1, cuadro 9.

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24 Pilocarpina M3 Ca++ α B γ PLC IP3DAG PIP2 Calmodulina Ca++ Achasa Fuente: Presentación realizada por estudiantes de medicina, resultados de laboratorio efecto de drogas en músculo liso aislado, 2007. Modificada 2011

25 Resultados del Bloqueo competitivo de la Atropina sobre la Acetilcolina. Figura 15: Registro de efecto de atropina, en el efecto de la acetilcolina en el músculo de intestino de conejo aislado en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 1, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

26 Fuente: Anexo 1, cuadro 10.

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29 Fuente: Mathias, E., et al. Frequency encoding of cholinergic- and purinergic- mediated signaling to mouse urinary bladder smooth muscle: modulation by BK channels.Am J Physiology Regulatory Integrative Comp Physiology292:616- 624, 2007.

30 Fuente: Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Modificado 2011.

31 Atropina Fuente: Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Modificado 2011.

32 Figura 15: Registro de efecto de atropina, en el efecto de la acetilcolina en el músculo de intestino de conejo aislado en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 1, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

33 Atropina Fuente: Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Modificado 2011.

34 Atropina Fuente: Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Modificado 2011.

35 Figura 15: Registro de efecto de atropina, en el efecto de la acetilcolina en el músculo de intestino de conejo aislado en solución Tyrode. Fuente: Hoja de recolección de datos de mesa 1, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina. Universidad de Costa Rica.

36 Atropina Fuente: Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Modificado 2011.

37 Resultados de EDTA Figura 19: Registro de un minuto de control y tres minutos posteriores a la adición de 10 gotas de EDTA a músculo liso aislado de intestino de conejo obtenido mediante un quimógrafo. Fuente: Mesa 4 Laboratorio de Fisiología para Medicina, jueves 12 de mayo del 2011.

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43 EDTA quela los iones de calcio

44 Aumenta la probabilidad de apertura de los canales de Na+ estabilizados por Ca+2

45 La entrada de Na+ produce despolarización y así es como se explica la hiperexcitabilidad (efecto inicial)

46 Figura 19: Registro de un minuto de control y tres minutos posteriores a la adición de 10 gotas de EDTA a músculo liso aislado de intestino de conejo obtenido mediante un quimógrafo. Fuente: Mesa 4 Laboratorio de Fisiología para Medicina, jueves 12 de mayo del 2011.

47 La despolarización activa los canales de Ca+2 voltaje dependientes, y por el gradiente antes creado el Ca+2 SALE!!

48 El Ca+2 que sale es quelado por EDTA y el efecto total es una disminución de la concentración de Ca+2 y por lo tanto RELAJACIÓN!!!

49 Figura 19: Registro de un minuto de control y tres minutos posteriores a la adición de 10 gotas de EDTA a músculo liso aislado de intestino de conejo obtenido mediante un quimógrafo. Fuente: Mesa 4 Laboratorio de Fisiología para Medicina, jueves 12 de mayo del 2011.

50 Fuente: Jankowski, R., et al. Development of an experimental system for the study of urethral biomechanical function. 2004. Am J Physiol Renal Physiol 286: F225–F232.

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52 Resultados de KCl Figura 23: Registro de un minuto de control y tres minutos posteriores a la adición de 10 gotas de KCl a músculo liso aislado de intestino de conejo obtenido mediante un quimógrafo. Fuente: Mesa 4 Laboratorio de Fisiología para Medicina, jueves 12 de mayo del 2011.

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57 Cambio en la concentración iónica del LEC cambio en el potencial de membrana

58 Despolarización de la membrana con lo que aumenta la probabilidad de apertura de los VOCCs

59 Entrada de calcio por los VOCCs con lo que aumenta [Ca+2]i

60 Fuente: Ratz P.H., Berg K.M. et al. Regulation of smooth muscle calcium sensitivity: KCl as a calcium-sensitizing stimulus 288:769-783, 2005.

61 Fuente: Ratz P.H., Berg K.M. et al. Regulation of smooth muscle calcium sensitivity: KCl as a calcium-sensitizing stimulus 288:769-783, 2005. Modificada.

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63 CONCLUSIONES. 1. Determinar y comparar el efecto sobre el tono, la amplitud y la frecuencia de contracción de la acetilcolina, adrenalina y pilocarpina sobre el músculo liso aislado de conejo en solución Tyrode con respecto a un control. -Después de agregar acetilcolina, se da generalmente un aumento del tono, con una disminución de la frecuencia y amplitud de la contracción del músculo liso. Al pasar el tiempo se observa que el tono disminuye y la frecuencia y amplitud aumentan.

64 1. Determinar y comparar el efecto sobre el tono, la amplitud y la frecuencia de contracción de la acetilcolina, adrenalina y pilocarpina sobre el músculo liso aislado de conejo en solución Tyrode con respecto a un control. - Al añadir adrenalina a la preparación de músculo liso aislado de conejo, se observa una disminución en el tono, la frecuencia y la amplitud de las contracciones del músculo. -La pilocarpina produce un aumento en el tono, frecuencia y amplitud de las contracciones del músculo liso aislado de conejo al ser comparado contra un registro control en ausencia de esta sustancia.

65 2. Observar y analizar la modificación sobre el tono, la amplitud y la frecuencia de contracción que produce la atropina con respecto a un control, y el efecto sobre la atropina al añadir acetilcolina en el músculo liso de intestino de conejo aislado en solución Tyrode. - La atropina disminuye el tono, la frecuencia y la amplitud, en el músculo liso de intestino de conejo aislado en solución Tyrode con respecto a el estado basal, por encontrarse en mayor cantidad que la acetilcolina y ser un inhibidor competitivo de dicha sustancia. -La acetilcolina produce un aumento en el tono, la frecuencia y la amplitud al agregarla al músculo con atropina, esto se debe a que al aumentar la concentración de acetilcolina con respecto a la atropina, aumenta la probabilidad de que la acetilcolina se una a su receptor (M3), lo que disminuye el efecto de la atropina como inhibidor competitivo.

66 3. Determinar y analizar la respuesta en torno a la excitabilidad y la contractibilidad del músculo liso aislado de conejo en solución Tyrode, al agregar sustancias que cambian las concentraciones de iones en el LEC, tales como EDTA y KCL, comparadas con un control. - La adición de EDTA produce de forma neta una disminución de la excitabilidad y contractilidad, que se refleja en una disminución de la frecuencia y la amplitud de la contracción del músculo liso con respecto al control. El tono tiende a aumentar levemente en el primer minuto y luego se mantiene. -El KCl en el primer minuto aumenta el tono y posteriormente tiende a ser mayor durante el segundo y tercer minuto con respecto al control. La frecuencia tiende a ser levemente mayor que el control y la amplitud disminuye levemente en primer minuto y luego tiende a ser levemente mayor que el control. El efecto neto es un aumento de la contractilidad y excitabilidad del músculo liso.

67 Referencias Bibliográficas. Bigovic, D. et al. Relaxant Effect of the Ethanol Extract of Helichrysum plicatum (Asteraceae) on Isolated Rat Ileum Contractions. Molecules. Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, University of Nis, Bulevar dr Zorana Djindjica. 2010; 15:3391-3401. Berridge,M. J. Smooth muscle cell calcium activation mechanisms. The Babraham Institute, Babraham, Cambridge UK.J.Physiol586.21 (pp 5047–5061), 2008. Boron, W. F., & Boulpaep, E. L. Medical Physiology: A cellular and molecular approach. (2da ed). Philadelphia: Sauders and Elsevier Editorial, 2009. Burnstock G. Autonomic Neurotransmission: 60 Years Since Sir Henry Dale. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2009; 49:1-30. Horman S, Morel N, Vertommen D, Hussain N, Neumann D, Beauloye C, Najjar N, Forcet C, Viollet B, Walsh M, Hue L, Rider M. AMP-activated Protein Kinase Phosphorylates and Desensitizes Smooth Muscle Myosin Light Chain Kinase. The journal of biological chemistry. 2008; 283:18505–18512 Karczmar A. Story of Muscarinic Receptors, Alkaloids with Muscarinic Significance and of Muscarinic Functions and Behaviors. ARBS Annu Rev Biomed Sci. 2009; 11:T1-T50.

68 Koeppen, B & Stanton, B. Berne y Levy, Fisiología. (6ta ed). Barcelona: Mosby Elsevier, 2009 Lorenzo, P.; Moreno, A. et al.Velásquez. Farmacología Básica y clínica. 18° ed. Madrid: Editorial Médica Panamericana, 2009. Mathias, E., et al. Frequency encoding of cholinergic- and purinergic-mediated signaling to mouse urinary bladder smooth muscle: modulation by BK channels. Am J Physiology Regulatory Integrative Comp Physiology 292:616-624, 2007. Nakayama, S., et al. Interstitial Cells of Cajal Review Series. Department of Cell Physiology, Nagoya University Graduate School of Medicine.(pp 1-29) Japan. 2007. Pocock G, Richards C.D. Fisiología humana. 2° ed. Barcelona: Masson, 2005. Rang, H.P. & Dale E.L. (2008). Farmacología. (6 ta ed). España: ELSEVIER. Pág. 153- 155. Ratz P.H., Berg K.M. et al. Regulation of smooth muscle calcium sensitivity: KCl as a calcium-sensitizing stimulus. Am J PhysiolCellPhysiol 288:769-783, 2005. Sanders, K.M.. Regulation of smooth muscle excitation and contractionDepartment of Physiology and Cell Biology, University of Nevada School of Medicine, Reno, NV, USA. NeurogastroenterolMotil (Suppl. 1), (pp 39–53) 2008 Sushil K. S., Molecular, functional, and pharmacological targets for the development of gut promotility drugs. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 291:G545-G555, 2006. Valsecia, M., et al. Farmacología Médica, volumen 1: Farmacología general y del sistema nervioso autónomo. Argentina: UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PATAGONIA SAN JUAN BOSCO, 2011; pág. 84-88

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70 Anexos Tono (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 101615 301,4 1,1 40302830 502019 70302928 8040 903132 1001920 Promedio023,42523,0523,1375 Desviación011,8911,8712,03 n8888 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 1: Tono en mm del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar acetilcolina

71 Frecuencia (contracciones/min) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 1147139 31181412 41327 511101312 78000 85000 94000 109300 Promedio9,375611,7511,5 Desviación3,583,393,201,73 n8544 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 2: Frecuencia en contracciones por minuto del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar acetilcolina.

72 Amplitud (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 15,5222,5 30,50,40,150,25 4533,5 510234 77000 817000 95000 10132500 Promedio7,8756,482,16251,28125 Desviación5,2310,391,481,66 n8544 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 3: Amplitud en mm del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar acetilcolina.

73 Tono (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 10-2 30-0.2-0.5-0.6 400-3-4.5 50-3-6-7 70-3-4-4.5 80000 90112 10041114 Promedio0-0.36666667-0.5-0.37142857 Desviación02.655.566.99 n8677 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 4: Tono en mm del músculo de intestino de conejo al agregar adrenalina.

74 Frecuencia (contracciones/min) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 115300 312865 4 1400 511000 712115 87000 95213 109100 Promedio10.3754.833333332.666666674.33333333 Desviación3.205.192.891.15 n8633 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 5: Frecuencia en contracciones/min del músculo de intestino de conejo al agregar adrenalina.

75 Amplitud (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 14.53.500 30.40.500 453.7500 57000 71200.54.75 810000 97102 3200 Promedio6.11252.150.50.84375 Desviación3.731.450.351.94 n8522 Cuadro 6: Amplitud en mm del músculo de intestino de conejo al agregar adrenalina. Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica

76 Tono (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 108109 300.50.30.4 40112319 5071519 70343734 80313029 90272827 100252928 Promedio017.937521.537520.675 Desviación012.7112.1711.30 n8888 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 7: Tono en mm del músculo de intestino de conejo al agregar pilocarpina.

77 Frecuencia (contracciones/min) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 117181913 312131412 413122113 511131413 791714 89111213 9792224 10891210 Promedio10.7512.751614 Desviación3.243.334.044.21 n8888 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 8: Frecuencia en contracciones/min del músculo de intestino de conejo al agregar pilocarpina.

78 Amplitud (mm) MesaControl1 minuto2 minuto3 minuto 1652.254 30.40.251.50.3 4863.254.5 571196 710897 813632 9141121 10121377 Promedio8.87.531254.6253.975 Desviación4.454.113.184.24 n8888 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 9: Amplitud en mm del músculo de intestino de conejo al agregar pilocarpina.

79 Tono (mm) AtropinaAcetilcolina MesaControl (1min)2min3min4min5min 10-2-9-42 300-700 40-9-2046 50-4-713 80-9-14-2-3 90-8-19-0,5 1004 01 Promedio0-4,66666667-9,42857143-0,41,41666667 Desviación05,1251016310,113643,049590143,07272951 n76756 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 10: Tono en mm del músculo de intestino de conejo al agregar atropina y luego acetilcolina.

80 Frecuencia (contracciones/ min) AtropinaAcetilcolina MesaControl (1min)2min3min4min5min 114110912 311501312 4 901110 593003 7998119 8127358 92112028 1092000 Promedio12,1257,255,58,58,85714286 Desviación4,0155946013,654742523,535533914,183300133,07834216 n88267 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 11: Frecuencia en contracciones/min del músculo de intestino de conejo al agregar atropina y luego acetilcolina.

81 Amplitud (mm) AtropinaAcetilcolina Control (1min)2min3min4min5min Mesa 132,5033 3330911,1 43506,515 552003 7121117 18 876438 922011 10 11000 Promedio5,6255,312510,56,583333337,3875 Desviación3,7008686243,788492929,192388165,851637956,53499736 n88267 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 12: Amplitud en mm del músculo de intestino de conejo al agregar atropina y luego acetilcolina.

82 Tono (mm) SujetosControl1 minuto2 minuto3 minuto 1022,55 30000 40157 50000 70004 800-7 902,53,53 100000 Promedio01,8333333332,52,4 Desviación00,762,554,04 n8345 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 13: Tono en mm del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar 10 gotas de EDTA.

83 Frecuencia (contracciones/minuto) SujetosControl1 minuto2 minuto3 minuto 11339 3121112 413161211 5131200 78863 89885 96875 107760 Promedio10,1259,1258,571428578,16666667 Desviación2,763,872,574,31 n8876 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 14: Frecuencia en contracciones/min del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar 10 gotas de EDTA.

84 Amplitud (mm) SujetosControl1 minuto2 minuto3 minuto 15213 30,750,40,60,4 43,5544,5 51100 712 8,55 82320630 9131213,516 109 80 Promedio8,406257,85,27,3625 Desviación7,536,884,412,15 n8584 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 15: Amplitud en mm del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar 10 gotas de EDTA

85 Frecuencia (contracciones/minuto) SujetosControl1 minuto2 minuto3 minuto 1150016 310111211 412 13 57660 77109 8 11 93367 106680 Promedio8,758,28571429911,3333333 Desviación3,773,303,943,01 n8776 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 17: Frecuencia en contracciones/min del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar 10 gotas de KCl.

86 Amplitud (mm) SujetosControl1 minuto2 minuto3 minuto 13000,5 30,60,40,250,15 46,5866 59870 71610,513,510,5 815 2312 994 16 108550 Promedio8,38757,271428579,535714297,525 Desviación5,294,737,406,43 n8776 Fuente: Hoja de recolección de datos, Jueves 12 de mayo del 2011, Laboratorio de Fisiología para Medicina, ME2012. Universidad de Costa Rica. Cuadro 18: Amplitud en mm del músculo liso aislado de intestino de conejo al agregar 10 gotas de KCl.


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