MODULO AYUDAS DIAGNOSTICAS LABORATORIO CLINICO DOCENTE ADRIANA TORRES RANGEL BACTERIOLOGA ESP. GERENCIA DE LA CALIDAD Y AUDITORIA EN SALUD (En Curso)

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1 MODULO AYUDAS DIAGNOSTICAS LABORATORIO CLINICO DOCENTE ADRIANA TORRES RANGEL BACTERIOLOGA ESP. GERENCIA DE LA CALIDAD Y AUDITORIA EN SALUD (En Curso) LABORANDO HOSPITAL LOCAL DEL NORTE SECRETARIA DE SALUD DEPARTAMENTAL

2 DESARROLLO DE LA CLASE DESARROLLO TEMA DE MICROBIOLOGIA ARTICULO
VIDEOS

3 MICROBIOLOGIA El estudio microbiológico de muestras de tejidos y líquidos corporales permite establecer el diagnóstico etiológico de diferentes enfermedades infecciosas Normas de Bioseguridad

4 Identificación de muestras
Toda muestra debe ser etiquetada con los siguientes datos básicos: 1. Nombre completo y edad del paciente. 2. Número de historia clínica: en algunas instituciones corresponde al documento de identificación. 3. Habitación donde está ubicado el paciente o servicio de localización. 4. Tipo de muestra y sitio anatómico. Por ejemplo, secreción de herida quirúrgica abdominal, tejido úlcera pie diabético; orina obtenida a través de sonda vesical permanente; sangre obtenida a través de catéter venoso central, etc. 5. Fecha y hora de recolección.

5 Condiciones generales de almacenamiento y transporte
Las muestras para cultivo de bacterias no deben ser almacenadas por más de 24 horas, independientemente del medio y la temperatura de almacenamiento. Según el volumen obtenido: menos de 1 ml ó 1 cc deben ser transportados en los primeros 15 a 30 minutos para evitar evaporación, desecación y exposición a condiciones ambientales. Muestras de líquido espinal, especímenes de vagina, oído interno y ojos no deben ser refrigeradas. Los frascos para recolección de líquidos deben tener tapa rosca; no se recomienda el uso de tapones de gasa o algodón que pueden absorber el líquido colectado y generar el riesgo de derramamiento y exposición biológica.

6 Criterios de aceptabilidad o rechazo de muestras
Cantidades insuficientes Temperaturas inadecuadas Recipientes rotos o con fugas Deficiente calidad de la muestra Muestras sin identificar Transporte demorado Muestras repetidas

7 CONDICIONES GENERALES PARA LA OBTENCION Y MANEJO DE MUESTRA
Elegir el lugar correcto a partir del cual se obtendrá la muestra empleando la técnica apropiada. Es decir, debe obtenerse la muestra del sitio de infección identificado por medio de una técnica aséptica que asegure la no contaminación de la muestra con flora normal. Obtener una suficiente cantidad de muestra para asegurar el aislamiento del germen relacionado con el proceso infeccioso en estudio y evitar los resultados falsos negativos. Obtener la muestra antes del inicio de la terapia antimicrobiana. Si el paciente ya hubiera recibido alguna dosis del antimicrobiano al momento de obtener la muestra, el Laboratorio debe ser informado al respecto. Enviar las muestras al laboratorio inmediatamente después de haber sido obtenidas para su procesamiento, con el objeto de incrementar la probabilidad de recuperación de los micro- organismos involucrados en el proceso infeccioso. Las muestras se colocan en un recipiente secundario apropiado para su transporte al laboratorio para evitar cualquier derrame y por lo tanto los riesgos que de ello se derivan. El paciente debe ser informado en forma clara y sencilla de acuerdo a su grado de instrucción sobre los procedimientos a realizar.

8 UROCULTIVO TÉCNICA DE RECOLECCIÓN
Realizar higiene de genitales, desechar la primera parte de la orina, introducir el frasco colector, recoger la parte media de la orina sin detener el flujo urinario (5-10 cc) y terminar de eliminar en el sanitario o pato. Tapar el frasco sin contaminar la muestra. TRANSPORTE Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente. DX: BACTERIURIA IVU Mycobacterias

9 HEMOCULTIVO El momento optimo de obtención de la muestra para hemocultivo es justo antes del pico mas alto de fiebre, sin embargo esta situación ideal no es frecuente. Alternativamente las muestras pueden obtenerse de acuerdo con el caso. Por ejm. • BACTEREMIAS CONTINUAS: En cualquier momento, ejm. Endocarditis. • BACTEREMIAS INTERMITENTES: Una hora antes del pico febril, ejm. Brucelosis Adultos: 10 ml- Neonatos 1-3 ml Antes de iniciar tto 3 hemocultivos intervalo de 1 hora diferente zona TRANSPORTE Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección a temperatura ambiente

10 HEMOCULTIVO Guía para la cronología y el número de cultivos de sangre en adultos: • En sepsis: Se debe tomar dos a tres muestras de lugares diferentes en un lapso de diez minutos • En endocarditis aguda: Obtener tres muestras de tres lugares diferentes en un lapso de 1 a 2 horas. • En endocarditis subaguda: Obtener tres muestras de tres lugares diferentes a intervalos de al menos quince minutos. Si el cultivo es negativo a las 24 horas, obtener tres muestras más. • En fiebre de origen desconocido: Obtener dos o tres muestras de lugares diferentes con diferencia de una hora o más entre una y otra muestra. Si el cultivo es negativo a las 24 horas, obtener dos a tres muestras más. VIDEO

11 Muestras del tracto respiratorio
NASAL: Escobillones esteriles, Rotarlos, Fosas Nasales, Extendido Sólo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores para la detección de portadores de Staphylococcus aureus o en lesiones nasales. Para búsqueda de hongos se recomienda la misma técnica. TRANSPORTE Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente.

12 Muestras del tracto respiratorio
NASOFARINGEO No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea • Tomar la muestra preferiblemente en ayunas. • Si se sospecha de Bordetella pertussis esta muestra deberá ser sembrada inmediatamente sea obtenida TRANSPORTE Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no exceder de dos horas y a temperatura ambiente. VIDEO

13 Muestras del tracto respiratorio
ESPUTO POR EXPECTORACIÓN ESPONTÁNEA El esputo no es la muestra ideal para el diagnóstico de neumonía; MICOSIS TB se recomienda preferiblemente el lavado broncoalveolar. • Recolectar la muestra en la mañana, en ayunas preferiblemente. • Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de la lengua sólo con agua para remover el exceso de flora oral y retirar prótesis dental en pacientes de edad. • Para pacientes pediatricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a través de succión. • Para el estudio de mycobacterias se deben colectar tres muestras seriadas en días consecutivos para pacientes hospitalizados. CULTIVA 2 TRANSPORTE Se recomienda en los primeros 15 minutos de la recolección, no excederde dos horas y a temperatura ambiente. En caso de no ser inmediatamenteprocesada la muestra, debe ser conservada a 4ºC VIDEO

14 LCR Punción lumbar -Meningitis
Tres tubos sin conservantes con tapón de rosca. Estudio bioquímico, estudio microbiológico y investigación de células TRANSPORTE. El producto debe enviarse inmediatamente al laboratorio, pues alguno de los agentes etiológicos como S. pneumoniae, pueden lisarse rápidamente a partir de una hora tras su recogida. Nunca deberá refrige-rarse pues se puede afectar la viabilidad de N. meningitidis y H. influenzae. Las muestras para el estudio de virus se enviarán en hielo, si el envío se retrasa más de 24 horas, se deberá de conservar a -70ºC.

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16 Muestras de piel y mucosas
HERIDAS ABIERTAS Limpieza SS Esteril HERIDA CERRADAS Limpieza soluciones antisépticas a base de yodopovidona o clorhexidina. Posteriormente aplicar alcohol isopropílico al 70% Puncionar el absceso con aguja y jeringa estériles. En caso de enviar la muestra en jeringa con aguja protegida por el capuchón, el transporte debe ser inmediato para garantizar el crecimiento de gérmenes anaerobios. Si se envía la muestra en tubo estéril con tapa, se recomienda hacerlo en los primeros 15 minutos de la recolección a temperatura ambiente. VIDEO

17 COPROCULTIVO CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
• No cultive muestras de consistencia dura. • Para estudio de rotavirus y Clostridium diffi cile, enviar muestra diarreica y no utilizar escobillón. • En el caso de pacientes pediátricos, si no es posible recoger muestra de materia fecal se puede tomar la muestra a través de frotis rectal. • No se recomienda realizar coprocultivo de rutina para pacientes con estancia hospitalaria mayor de 3 días, a no ser que el diagnóstico de ingreso haya sido gastroenteritis. TÉCNICA DE RECOLECCIÓN Recolectar en lo posible más de 2 cc o gramos de materia fecal. TRANSPORTE Se recomienda durante la primera hora luego de la recolección a temperatura ambiente. Para estudio de mycobacterias debe enviarse inmediatamente al laboratorio, protegida de la luz directa.

18 Muestras ocular CUIDADOS Y RECOMENDACIONES • No usar gotas oftálmicas 18 a 24 horas antes de la muestra. • Ausencia de cualquier cosmético. • No tomar antibióticos 24 a 48 horas antes. Secreción conjuntival: tome una muestra por cada ojo con escobillones separados, previamente humedecidos con solución salina. Rote el escobillón en cada conjuntiva, coloque un escobillón en el medio de transporte o en tubo estéril seco con tapa rosca o tapón de caucho y con el otro realice extendido en lámina de vidrio o usar anestésicos que posean actividad antimicrobiana. TRANSPORTE Inmediatamente luego de la recolección a temperatura ambiente.

19 MUESTRAS OTICAS CUIDADOS Y RECOMENDACIONES • No usar gotas óticas de 18 a 24 horas antes de la toma de la muestra. • No tomar o aplicar antibióticos de 24 a 48 horas antes. • Pacientes con otitis supurativa con probable ruptura de tímpano no practicar lavado. • Si la sospecha de infección es de otitis media la muestra deberá ser tomada por un especialista a través de timpanocentesis. No se recomienda hacer de rutina, sino en aquellos casos crónicos que no responden a la terapia instaurada. TÉCNICA DE RECOLECCIÓN • Este procedimiento lo debe realizar un médico especialista. • No se recomienda toma de muestras con escobillón rotado en otitis media o externas supurativas. • De ser posible la muestra debe ser tomada con ayuda de microscopio por otorrinolaringólogo.

20 Muestras para detección de hongos MUESTRAS MICÓTICAS
LESIONES DESCAMATIVAS Capas superficiales de la piel Cabello Cuero cabelludo CUIDADOS Y RECOMENDACIONES • No aplicar ningún tratamiento fúngico oral o tópico por lomenos 3 días antes. • No aplicar cremas, ungüentos o polvos en el sitio de la toma dela muestra. • La toma de la muestra debe ser realizada por personal experto.

21 COLORACION DE VON STOLTEMBERG
Corynebacterium diphtheriae,( causante de la DIFTERIA) La muestra de garganta puede tomarse con un hisopo de algodón PROCEDIMIENTO: · Agregar el colorante de Von Stoltemberg y dejarlo durante 15 min. · Lavar con agua corriente · Secar al medio ambiente · Agregar una gota de aceite de imercion · Observar al microscopìo

22 EXAMEN DIRECTO KOH Examen que determina la presencia de hongos a través de un muestra de diferentes partes como: uñas, cuero cabelludo, lesiones de varias partes del cuerpo entre otros