GENETICA y TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR

Presentación del tema: "GENETICA y TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR"— Transcripción de la presentación:

1 GENETICA y TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR
Química Biológica Patológica GENETICA y TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR Ib- Parte Tema:1 (1)  Dra. Silvia Varas

2 Esquema Concepto Epidemiología Patogenia. Bases genéticas
Manifestaciones clínicas generales Diagnóstico individual y poblacional Prevención. Programas de Pesquisa neonatal Bases del tratamiento

3 Errores congénitos del metabolismo

4 Errores congénitos del metabolismo: Presentación Clínica
Circunstancias desencadenantes Nutrientes Enfermedad intercurrente Fármacos Edad Neonatal Lactante Niño mayor Adolescente Adulto Síntomas Crónico progresivo Agudo intermitente Agudo progresivo

5 Errores congénitos del metabolismo
Categoría 1 Son las enfermedades que afectan 1 sistema funcional o 1 órgano Presenta síntomas uniformes Categoría 2 Son las enfermedades que afectan una vía metabólica expresada en una gran cantidad de órganos o células. Presentan síntomas muy diversos. Y se dividen en 3 grupos

6 Categoría 2 Grupo1: Enfermedades que afectan la síntesis o catabolismo de moléculas complejas (disturbios en trafico intracelular, lisosomas, etc). No corrigen con dieta. Grupo2: Enfermedades que afectan el metabolismo intermedio. Con un aguda o progresiva intoxicación por acumulación de un metabolito por bloqueo de una vía. (Ej: aminoácidurias, intolerancia a azucares, etc). Diagnostico: cuantificación de metabolito en plasma u orina. Tratamiento: remoción toxinas. Grupo 3: Desordenes con deficiencias de la Energía. Hay una deficiencia en la producción de energía en hígado, miocardio, músculo o cerebro. Ej: glucogenosis, defectos en la beta oxidación de ácidos grasos, etc. Hay una acumulación de síntomas y manifestaciones. Síntomas comunes: hipoglucemia, hiperlactacidemia, hipotonía, miopatía, cardiomiopatía, retraso en el desarrollo, colapso circulatorio, etc

7 Errores congénitos del metabolismo: Síndromes característicos
Enfermedad metabólica aguda del RN Síndrome neurológico Síntomas Oculares Síntomas en Piel Síntomas Hematológicos Síntomas o Síndromes Viscerales (Intestino, Hígado, Corazón, Pulmón, Riñón) Síntomas Endocrinos

8 Enfermedad metabólica aguda del RN (1)
Dificultades de alimentación Escasa ganancia ponderal Hipotonía Convulsiones Letargia Olor peculiar Hipoglucemia, hiperamoniemia, Acidosis láctica Deterioro neurológico Presentación predominantemente hepática Hipoglucemia con hepatomegalia Retraso en el crecimiento intrauterino Ictericia colestática RN con Enfermedad metabólica aguda (ECM) Glucemia Amonemia pH y bicarbonato Calcio, Magnesio Cuerpos cetónicos, AGL Acido Láctico Gases en sangre Exámenes de Laboratorio

9 Síndromes clínicos (2) Presentación aguda de síntomas
Acidosis metabólica Cetosis Hiperlactacidemias Hipoglucemia Ataques recurrentes de coma, vómitos, letargia ataxia y síntomas psiquiátricos Dolor abdominal

10 Algoritmo clínico-biológico para el diagnóstico de los Errores Innatos del Metabolismo de presentación aguda neonatal

11 Dolor abdominal (Ataques Recurrente)
Ejemplo: Dolor abdominal (Ataques Recurrente)

12 Síndromes clínicos (3) Sintomas Neurológicos Progresivos
Progresiva deterioro neurológico y mental: Infancia temprana, Infancia tardía, adolescencia o adultez: Encefalopatía aguda (hiperamoniemias, hiperglicinemias) Encefalopatía crónica (PKU, esfingolipidosis) Signos extrapiramidales: alteraciones del movimiento (distonía, ataxia) Hipotonía en periodo neonatal/Parálisis (miopatía mitocondrial, miastenia cong.)

13 Síndromes clínicos (4) Síntomas Oculares: Cataratas Opacidad Corneal
Retinitis pigmentosa Punto Rojo Macular

14 Síndrome de depósito Enfermedades lisosomales

15 Síndromes clínicos (5) Síntomas en Piel: Fascies caracteristicas
Lesiones en Piel Angioqueratoma

16 Síndromes clínicos (6) Síntomas Hematológicos
Anemias no regenerativas (macrociticas) Anemias hemolíticas Pancitopenia, neutropenia, trombocitopenias Acantocitois

17 Manifestaciones clínicas (6)

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21 Síndromes clínicos (7) Síndrome Viscerales(intestino, hígado, corazón, pulmón y riñón) Cardiomiopatía, Arritmias, Enfermedad coronaria y arterioesclerosis, Xantomas Diarreas crónicas Falla hepática

22 Tratamiento en la fase aguda
Medidas generales de soporte Balance hidroelectrolítico Aporte de glucosa Depuración de toxinas Forzar diuresis, alcalinización orina, etc Quelantes del amonio (benzoato, fenilacetato, fenilbutirato) Detoxificantes de ácidos orgánicos (glicina) Depuración extrarrenal: diálisis peritoneal, hemofiltración, exanguino-transfusión Aporte de factores deficitarios Aminoácidos (arginina) Vitaminas (B12, biotina) Carnitina Apo CII

23 Tratamiento Tratamiento del fenotipo clínico Educación sanitaria
Cirugía / Ortopedia Tratamiento farmacológico Trasplante de órganos

24 Tratamiento Tratamiento del fenotipo bioquímico
Restricción de la ingesta del sustrato (dietética) Inhibición de la síntesis del metabolito o del sustrato (quelantes) Bloqueo de receptores celulares Uso de vías metabólicas alternativas (dosis farmacológicas de vitaminas) Remplazamiento del producto deficiente (tratamiento sustitutivo)

25 Tratamiento Sustitución de la proteína/enzima anormal o disfuncional
Trasplante de órgano (tirosinemia) Remplazamiento enzimático (Gaucher, Pompe) Ingeniería genética (vectores con DNA modificado: distrofia muscular, déficit LPL) Trasplante de progenitories hematopoyéticos: médula ósea, cordón umbilical Trasplante de stem cell (células madre)

26 Tratamiento

27 Prevención Consejo genético
Requiere el diagnóstico exacto del trastorno y conocer su pronóstico (mortalidad, morbilidad) Patrón de herencia conocido (riesgo en otro descendiente) Screening Cascada Condicionamientos éticos de los padres Sobre el embrión (FIV, Fertilización “in vitro”)) Biopsia vellocidades coriónicas Amniocentesis

28 Diagnóstico Diagnóstico prenatal
Pre-implantación (fertilización in vitro) Amniocentesis (líquido amniótico) y biopsia fetal (>16 semanas) Biopsia vellocidades coriónicas (embrión implantado)

29 Diagnóstico I Diagnóstico individual
- Presentación y manifestaciones clínicas - Laboratorio (inicial) Sangre: Hematología, ionograma, glucosa, Ca, P, Mg2+, láctico/pirúvico, amonio, aminoácidos, carnitina, ácidos orgánicos, fenilpiruvico. Orina: Cuerpos cetónicos, Azúcares reductores, Ac. orgánicos LCR: proteínas, lactato y lactato/pirúvico

30 Diagnóstico II - Laboratorio avanzado
Sangre: Enzimas, ácidos orgánicos, carnitina, Ácidos Grasos Libres, niveles de Hormonas basales y post-estimulación, sobrecarga KClO4. - Biología molecular (DNA GENÓMICO): análisis de mutaciones - Biopsias: histoquímica, enzimología, - Imagen: Ecografía, TAC, etc.

31 Pesquisa neonatal sistemático en recién nacidos (criterios OMS)
Programa integrado con recursos legales, humanos y materiales. Educación de la población y del personal sanitario. Estandarización del test de “screening”, que debe ser: - Método simple. - Relación coste/beneficio adecuada. - Alta sensibilidad (% de niños afectados con test +) - Alta especificidad (% de niños sanos con test -). Recuperación de los niños con resultado positivo. Confirmación diagnóstica. Tratamiento. Seguimiento y evaluación de los pacientes 

32 Pesquisa Neonatal en Argentina
- 1986: La pesquisa neonatal de la fenilcetonuria y el hipotiroidismo congénito es obligatoria en nuestro país por la ley y , respectivamente. - 1995: se incorporo la Pesquisa de Fibrosis Quística a todos los recién nacidos por la ley

33 - Muestra de sangre desecada
Pesquisa Neonatal - Muestra de sangre desecada - Todos los recién nacidos a partir de las 24 hs y hasta el 7º día de vida.

34 Al 2013 es obligatorio la Pesquisa de:
Hipotiroidismo congénito Fenilcetonuria Fibrosis Cística Galactosemia Hiperplasia Suprarrenal Congénita Deficiencia de Biotinidasa

35 Material de extracción
mariposa nº 27G Papel Cromatográfico Aguja metálica nº 25G lanceta

36 Sector donde debe hacerse la punción en el pie del neonato

37 Zona de extracción con (lanceta)

38 Dorso de la Mano Talón (lanceta)

39 Calidad de las muestras de sangre obtenidas
OPTIMO

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41 Epidemiología Bs As PKU, FENILCETONURIA 1/10.000
Enfermedad Incidencia PKU, FENILCETONURIA /10.000 Hipotiroidismo /2.500 Galactosemia /10.000

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43 Con 8000 RN/ año en SL: 3,5 pacientes con HipoTiroidismo C. /año
2,7 pacientes FQ / año 1 paciente con Fenilcetonuria/2años 1 paciente Galactosemia / 2 años

44 BIBLIOGRAFIA: (Tema 1)

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