APLICACIONES DE LA HEMOAGLUTINACIÓN 2015. Interacción Anticuerpo - Antígeno partículado agrupamiento visible Aglutinación Implican la aglutinación de.

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1 APLICACIONES DE LA HEMOAGLUTINACIÓN 2015

2 Interacción Anticuerpo - Antígeno partículado agrupamiento visible Aglutinación Implican la aglutinación de eritrocitos HEMAGLUTINACIÓN

3 Estas reacciones, en las que participan los antígenos de superficie de los eritrocitos y sus anticuerpos complementarios, se utilizan de modo sistemático en la determinación de grupos sanguíneos y en diagnóstico de la mononucleosis infecciosa.

4 Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos patógenos para causar la aglutinación de los eritrocitos. Detectar el patógeno Pruebas de hemaglutinación Detectar los anticuerpos dirigidos contra las hemaglutininas del microorganismo Inhibición de la hemaglutinación Suelen ser pruebas específicas de serotipo o subtipo y bastante sensibles.

5 Ciertos virus, como los que causan la parotiditis epidémica, sarampión y gripe, tienen la capacidad de aglutinar eritrocitos sin una reacción antígeno-anticuerpo; este proceso se denomina Hemaglutinación viral. Este tipo de hemaglutinación puede ser inhibida por los anticuerpos que neutralizan al virus aglutinante

6 Se basa en la pérdida de la capacidad hemoaglutinante de un virus al formarse el complejo antígeno-anticuerpo. Cuando se enfrenta un virus conocido a un virus problema, estos se unen impidiendo la hemoaglutinación viral (provocando la IHA). INHIBICIÓN DE LA HEMOAGLUTINACIÓN (IHA)

7 Esto se demuestra haciendo reaccionar la mezcla de antígeno con anticuerpo (suero del paciente) y luego con glóbulo rojo, los que no se unen y sedimentan formando un botón o punto; en ausencia del anticuerpo específico se expresa la propiedad hemoaglutinante del virus, que se visualiza por la formación de una malla de aglutinación.

8 Suero A

9 Esta técnica es utilizada para tipificar (identificar) virus con capacidad hemoaglutinante presentes en una muestra dada (virus influenza, parainfluenza, etc.), que al unirse a los anticuerpos específicos, pierden esta propiedad.

10 MONONUCLEOSIS INFECCIOSA Es una enfermedad provocada por un virus de la familia de los Herpes conocido como virus de Epstein-Barr. LINFOCITOSIS ATÍPICA

11 El virus de Epstein-Barr (EBV) es uno de los virus más frecuentes y ha sido asociado a varios tipos de tumores incluyendo el Carcinoma de Nasofaringe Indiferenciado (CNI), el linfoma de Burkitt y linfomas de células B en pacientes con inmunodeficiencias. En los últimos años, se ha propuesto el virus de Epstein-Barr como el causante del Síndrome de Fatiga Crónica.

12 El virus, de la familia de los virus Herpes, consiste en una cadena helicoidal de DNA doble encapsulada rodeada de una cápside icosaédrica de 164 capsómeros. Todo el virus está envuelto por una cubierta glicoproteica. Los dos tipos de virus de Epstein- Barr que existen en la naturaleza no pueden ser distinguidos serológicamente.

13 El virus es transmitido mediante saliva infectada, a menudo a partir de adultos asintomáticos y suele ocurrir cuando se besan. Con contactos menos íntimos, el contagio es menor. En algún caso se ha producido la transmisión del virus en transfusiones y trasplantes de médula.

14 Infección Primaria Células B en cavidad oral Células epiteliales Replicación viral Crecimiento y transformación de las células B Infección lítica (ocasional) Memoria de la célula T Respuesta inmune Reactivación EBV - específico citotóxico para célula T Células B durmientes (como consecuencia de células T alteradas) Infección persistente Infección Células epiteliales Replicación Proliferación de EBV en la saliva EBV replicadas en células B Infección persistente : estado crónico del virus Otras células B

15 Los estudios epidemiológicos indican que más del 90% de individuos asintomáticos seropositivos son portadores del virus en sus secreciones orales. Los glóbulos blancos suelen estar elevados alcanzándose entre 10.000 y 20.000 células/mL a las 2-4 semanas de la infección. Se demuestra normalmente linfocitosis con más de un 10% de linfocitos atípicos.

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17 Linfocitos atípicos: más grandes con abundante citoplasma, vacuolas indentaciones de la membrana Entre las células anormales predominan las CD8+. Son frecuentes una neutropenia y trombocitopenia moderadas durante el primer mes de la enfermedad. La función hepática es anormal en el 90% de los casos: las transaminasas y la fosfatasa alcalina están aumentadas y también la bilirrubina en un 40% de los casos.

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20 Parte experimental Fundamento de la Técnica Los anticuerpos heterófilos asociados a la mononucleosis infecciosa se detectan por su capacidad de aglutinar los eritrocitos de caballo o carnero y neutralizándose simultáneamente los anticuerpos no asociados a la mononucleosis (con extracto de riñón de cobayo). La aglutinación se visualiza macroscópicamente. MONONUCLEOSIS INFECCIOSA

21 Material requerido Muestra: suero Placa para la reacción Palillos mezcladores Pipetas automáticas Punteras Cronómetro Parte experimental Ver inserto según kit de reactivo a utilizar

22 La sífilis es una enfermedad venérea provocada por la infección de una espiroqueta T. pallidum. Los test serológicos para sífilis son clasificados como:  No treponémicos  Treponémicos: TPHA, ELISA y FTA-abs. Aplicaciones de la INMUNO-HAI TPHA

23 Principio de la TPHA Eritrocitos estabilizados de ave, sensibilizados con componentes antigénicos del Treponema pallidum altamente purificados, muestran aglutinación cuando reaccionan con anticuerpos contra esos antígenos presentes en el suero, plasma o líquido cefalorraquídeo de pacientes con sospecha de sífilis.

24 Anticuerpos provenientes de TREPONEMAS SAPRÓFITAS podrían causar falsos positivos si son absorbidos por componentes presentes en el diluyente estabilizados de hematíes sensibilizados

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27 Muchas gracias…