VIROLOGÍA 2012 Teórico 16 Enterovirus.

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1 VIROLOGÍA 2012 Teórico 16 Enterovirus

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3 Relaciones filogenéticas entre cepas prototipo del género enterovirus, basadas en la región codificante de P1 (proteínas de cápside) La clasificación serológica original correlacionaba la respuesta inmune que generaban ciertas cepas con la protección cruzada, características de la enfermedad, etc. Pero dejó de emplearse por las inconsistencias entre las relaciones antigénicas de nuevos aislamientos. El sistema actual de clasificación se basa en la comparación de la organización genómica y la similitud de secuencias, y también considera propiedades biológicas. El árbol filogenético esta basado en proteínas de cápside. Pero sin embargo la recombinación es un evento muy frecuente entre distintos grupos de virus, lo que tiende a generar una población de variantes interrelacionadas y difícilmente clasificables de manera separada.

4 Estructura NO estructural Virus pequeño (30 nm) desnudo
Simetría icosaédrica Resistentes a bajos pH y a solventes orgánicos RdRp NO estructural RNAss polaridad positiva Proteín VPg unida covalentemente al genoma

5 Ciclo de multiplicación

6 Adsorción

7 Penetración y desnudamiento

8 Traducción dependiente del Sitio interno de entrada al ribosoma:
5´Cap El genoma del virus pierde la proteína VPg luego de liberarse en el citoplasma. No tiene Cap 5´. Sin embargo tiene una secuencia de nucleotidos que le otorgan una estructura altamente organizada: IRES. Este permite el reconocimiento y unión de la subunidad pequeña del ribosoma., para iniciar la traducción. Entre distintos tipos IREs hay poca conservación de secuencia. Debe mantenerse la estructura. Traducción dependiente del Sitio interno de entrada al ribosoma: IRES

9 Regulación de la traducción celular

10 Traducción y procesamiento de proteínas

11 Síntesis de RNA RdRp viral ARN viral (poliovirus) Proteínas celulares
Asociada a membrana RdRp viral ARN viral (poliovirus) Proteínas celulares Proteínas virales VPg actua como primer

12 Síntesis de RNA RdRp viral ARN viral (poliovirus) Primer dependiente
VPg pUpU ARN viral (poliovirus)

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14 Sitio de entrada, replicación y diseminación

15 Rta inmune innata Rta inmune adquirida celular citotoxica
Mucosa orofaríngea/intestinal Rta inmune adquirida celular citotoxica Agmídalas/Placas de Peyer Nodulos linfáticos cervicales Nodulos linfáticos mesentéricos Viremia Rta inmune adquirida humoral AC SRE Rta inmune innata SNC

16 Infecciones por poliovirus
Infección asintomática (90%). Poliomielitis abortiva (5%). Poliomielitis no paralítica (3-4%). Poliomielitis paralítica (1-2%): Poliomielitis espinal. Poliomielitis bulbar.

17 Diabetes Conjuntivitis hemorrágica

18 : Enterovirus

19 DIAGNOSTICO Recolección y conservación de las muestras
RECOLECCION LCR Tubo estéril Materia Fecal Frasco limpio Hisopados Rectal, faríngeo. Tubo c/medio de transporte viral Biopsias, Necropsias Líquido Pericárdico

20 Diagnostico por cultivo

21 BEV-specific duplication
Diagnostico molecular BEV-specific duplication Hypervariable region ► ◄ VP 4 VP2 VP3 VP1 2A 2B 2C 3A 3B 3C 3D 3'NTR 5'NTR capsid An PCR1 PCR2 Semi-nested PCR

22 SECUENCIACION GENOMICA
Identificación de los enterovirus CULTIVO RT-PCR ENTEROVIRUS LCR TIPO VIRAL NEUTRALIZACION CON POOL LBM SECUENCIACION GENOMICA PARCIAL DE VP1

23 Serología FIJACION DE COMPLEMENTO TEST DE NEUTRALIZACION
Respuesta tipo-específica Se mantienen de por vida FIJACION DE COMPLEMENTO Respuesta de Grupo Baja sensibilidad Desaparecen en 1-2 años. DETECCION DE IGM ENTEROVIRAL Poco sensible Puede persistir por muchos meses después de una infección enteroviral y puede detectarse en individuos sanos asintomáticos La presencia de IgM enteroviral no puede siempre establecer la causalidad de la enfermedad en cuestión

24 Vacunas atenuada e inactivada IPV

25 Comparación de los tipos de respuesta inmune inducida por
virus replicativos vs inactivados Killed polio vaccine (Salk) Live polio vaccine (Sabin) Days Vaccination Reciprocal virus antibody titer 512 128 32 8 2 1 Serum IgG Serum IgM Nasal and duodenal IgA Nasal IgA Serum IgA Duodenal IgA 48 96

26 Vacuna atenuada: Ej. Polio 3 - Sabin Investigación de las bases genéticas de su atenuación

27 (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL
Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin Bases genéticas de su atenuación VIRUS MUTACIÓN (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA) P1 Sabin 5´UTR (480) VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481) VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472) VP3 (3091) Regiones no codificantes Regiones reguladoras Replicación Transcripción Traducción

28 (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL
Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin Bases genéticas de su atenuación VIRUS MUTACIÓN (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA) P1 Sabin 5´UTR (480) VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481) VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472) VP3 (3091) Regiones codificantes: Proteínas de cápside Otras proteínas?

29 Reducción de la incidencia de poliomielitis
1994 2003 1988 2000 Países libres de Polio salvaje Países endémicos Países No endémicos

30 Casos de Polio

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32 Brote Polio en Isla Hispaniola

33 Vigilancia de Poliovirus
Clasificación de poliovirus de acuerdo al porcentaje de similitud en VP1: % Poliovirus Sabin relacionado. %. Poliovirus Sabin derivado (VDPV). mayor a 15%. Poliovirus Salvaje. VDPVs se dividen en: − iVDPV: asociados a personas inmunodeficiencias primarias. − cVDPV: asociados a transmisión sostenida persona a persona y pueden causar brotes. aVDPVs: ambiguos, no se pueden definir como iVDPVs o cVDPVs. Recuperados del medio ambiente.

34 Tratamiento antiviral
PLECONARYL

35 Bibliografía Fields Virology. David M. Knipe and Peter M. Howley. Fifth edition. Lippincott Williams and Wilkins Principles of Virology. Molecular Biology, Pathogenesis, and Control of Animal Viruses. S.J.Flint, L.W.Enquist, V.R.Racaniello, A.M.Skalka. Third edition. ASM PRESS. Washington, D.C Kew OM, Wright PF, Agol VI, Delpeyroux F, Shimizu H, Nathanson N, Pallansch MA. Circulating vaccine-derived polioviruses: current state of knowledge. Bull World Health Organ Jan;82(1):16-23