GRUPO HPA.

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1 GRUPO HPA

2 INTRODUCCIÓN FLIA. Pasteurellaceae RECLASIFICACIÓN EN 1996
SECCIÓN XVII VOL 2 (BERGEY) GROS. Actinobacillus, Haemophilus, Pasteurella y Mannheimia

3 INTRODUCCIÓN ORGANISMOS GRAM NEGATIVOS, PATÓGENOS PARA ANIMALES (mamíferos y aves) Y HOMBRE PROCESOS SEPTICÉMICOS Y RESPIRATORIOS INVOLUCRADOS EN CUADROS POLIMICROBIANOS

4 GÉNERO Actinobacillus

5 CARACTERÍSTICAS BACILOS DE 0,4 X 1 HASTA 6 MICRAS
INMÓVILES, NO ESPORULADOS FINA CAPA DE “SLIME” (ADHERENCIA DE COLONIAS AL AGAR) UTILIZAN CARBOHIDRATOS CON PRODUCCIÓN DE ÁCIDO SIN GAS

6 MORFOLOGÍA Y TINCIÓN A. lignieresii A. suis

7 CARACTERÍSTICAS ESPECIES PRINCIPALES: A. lignieresii, A. equuli, A. suis, A. pleuropneumoniae ORGANISMOS EXIGENTES, AEROBIOS O MICROAERÓFILOS (5% CO2) A. pleuropneumoniae REQUIERE FACTOR V (NAD) COLONIAS PEQUEÑAS, REDONDAS, BLANQUECINAS

8 SATELITISMO A. pleuropneumoniae

9 COLONIAS A. pleuropneumoniae

10 CARACTERÍSTICAS SUPERVIVENCIA LIMITADA EN AMBIENTE
SENSIBLES A ANTIBIÓTICOS DE USO FRECUENTE COMENSALES EN MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA GRAN VARIEDAD DE HOSPEDADORES

11 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
ANTÍGENOS TERMOESTABLES (SOMÁTICOS Y CAPSULARES) Y TERMOLÁBILES (SUPERFICIE) A. lignieresii: 6 TIPOS (TERMOESTA-BLES); A. equuli (28 GRUPOS –LPS-) A. pleuropneumoniae (ANTÍGENOS CAPSULARES Y SOMÁTICOS)

12 PODER PATÓGENO A. lignieresii: COMENSAL CAVIDAD ORAL Y FARINGE EN RUMIANTES CAUSA: LENGUA DE MADERA, PROCESO ESPORÁDICO TIPO GRANULOMATOSO A. pleuropneumoniae: CAUSA PLEURONEUMONÍA FIBRINO-HEMORRÁGICA EN PORCINOS

13 PODER PATÓGENO TOXINAS RTX (Apx) (CITOLÍTICAS/CITOTÓXICAS). REPETICIONES DE NONAPÉPTICOS RICOS EN GLICINA Apx1 HEMOLÍTICA Y CITOTÓXICA PARA MACRÓFAGOS Y NEUTRÓFILOS OTROS: CÁPSULA, LPS, FIMBRIAS, SUPERÓXIDO DISMUTASA

14 PODER PATÓGENO A. equuli: ENFERMEDAD DEL POTRILLO DORMILÓN
LEUCOTOXINA, TOXINA TIPO RTX A. suis: SEPTICEMIA, ARTRITIS, NEUMONÍA EN CERDOS TOXINAS ApxI y ApxII

15 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
MUESTRAS: LESIONES GRANULOMA-TOSAS, PLEURONEUMONÍA, etc. REMITIR EN MEDIO DE TRANSPORTE A. lignieresii: OBSERVACIÓN DIRECTA DE GRÁNULOS: BACILOS G – MEDIOS A. pleuropneumoniae: IHQ, IFD

16 AISLAMIENTO AGAR SANGRE (BOVINO U OVINO) ALGUNOS CRECEN EN McCONKEY
A. pleuropneumoniae: FACTOR V, AGAR CHOCOLATE MAYOR DESARROLLO EN MICROAEROFILIA (1-3 DÍAS A 37ºC)

17 IDENTIFICACIÓN COLONIAS GRISES ADHERIDAS AL AGAR
COLONIAS “BLANDAS” Y “PEGAJOSAS” (RELACIÓN CON ESTRUCTURA LPS) A. pleuropneumoniae, equuli y suis: HEMÓLISIS (EFECTO CAMP) REACCIONES BIOQUÍMICAS: UREASA, FERMENTACIÓN DE CARBOHIDRATOS

18 IDENTIFICACIÓN A. pleuropneumoniae: SEROLOGÍA (HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA) MÉTODOS MOLECULARES: REACCIÓN DE POLIMERASA EN CADENA (PCR)

19 GÉNERO Haemophilus

20 CARACTERÍSTICAS BACILOS O COCOBACILOS 1 micra DE ANCHO Y LONGITUD VARIABLE PLEOMÓRFICOS, INMÓVILES, AERO-BIOS Y ANAEROBIOS FACULTATIVOS FERMENTAN CARBOHIDRATOS NECESITAN FACTORES DE LA SANGRE (CARÁCTER NO EXCLUYENTE)

21 FACTORES X y V

22 FACTORES X y V

23 HÁBITAT COMENSALES EN APARATO RESPIRA-TORIO, BOCA, VAGINA, TRACTO G.I., MUCOSAS EN GENERAL BAJA PERSISTENCIA EN AMBIENTE ESPECIFIDAD DE HOSPEDADOR H. somnus (RUMIANTES), H. parasuis (CERDOS), H. paragallinarum (AVES)

24 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
GRAN HETEROGENEIDAD H. parasuis: ANTÍGENOS TERMOES-TABLES, 16 SEROVARES POR PRECIPITACIÓN EN GEL DE AGAR MUCHAS CEPAS NO TIPIFICABLES

25 PODER PATÓGENO CÁPSULA (H. influenzae)
LPS (H. paragallinarum, H. parasuis, H. somnus) (mortalidad en septicemias) FACTORES DE ADHERENCIA (PILI) PROTEÍNAS CAPTADORAS DE Fe

26 PODER PATÓGENO INFECCIONES SUPURATIVAS
H. somnus: VASCULITIS TROMBÓTICA, PROCESOS NECRÓTICOS Y HEMORRÁGICOS H. parasuis: BRONCONEUMONÍAS SECUNDARIAS, ENF. DE GLÄSSER (poliserositis) H. paragallinarum: CORIZA INFECCIOSA

27 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
GRAN LABILIDAD DE LAS MUESTRAS AGAR CHOCOLATE (FACTORES X y V), ADICIÓN DE ANTIBIÓTICOS INCUBACIÓN EN 10% CO2 COLONIAS DE HASTA 2 mm DIÁMETRO LUEGO DE 48 HS, BLANCAS, AMARI-LLENTAS, HEMÓLISIS SEGÚN ESPECIE

28 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
POSIBLE ENRIQUECIMIENTO PREVIO EN CALDO IDENTIFICACIÓN POR REACCIONES BIOQUÍMICAS: indol, ureasa, catalasa, oxidasa, producción de ácido a partir de carbohidratos PCR: H. parasuis, H. paragallinarum

29 H. parasuis

30 H. influenzae

31 GÉNEROS Pasteurella y Mannheimia

32 INTRODUCCIÓN REVISIÓN TAXONÓMICA DEL GÉNERO Pasteurella EN ÚLTIMAS DÉCADAS DIVISIÓN DE ESPECIES CLÁSICAS EN SUBESPECIES Y CREACIÓN DE NUEVAS ESPECIES CREACIÓN DEL GÉNERO Mannheimia

33 CARACTERÍSTICAS BACILOS O COCOBACILOS (0,3 – 1 µm x 1 – 2 µm), GRAM NEG., AISLADOS, PARES O CORTAS CADENAS INMÓVILES, NO ESPORULADOS, ANAE-ROBIOS FACULTATIVOS, METABOLIS-MO RESPIRATORIO Y FERMENTATIVO OXIDASA Y CATALASA POSITIVOS

34 HÁBITAT Pasteurella: MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA DE MAMÍFEROS Y AVES Mannheimia: CRIPTAS DE TONSILAS PARTE DE MICROFLORA DE GANADO SANO

35 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
ANTÍGENOS SOMÁTICOS Y CAPSULARES P. multocida: 5 TIPOS CAPSULARES (A, B, D, E y F) Y 16 TIPOS SOMÁTICOS SEROVARIEDADES: COMBINACIÓN DE AMBOS ANTÍGENOS ASOCIADAS A ENFERMEDADES ESPECÍFICAS DE ANIMALES

36 ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
A:1, A:3, A:4 CÓLERA AVIAR E:2, B:2 SEPTICEMIA HEMORRÁGICA BOVINOS Y BÚFALOS Mannheimia haemolytica (EX P. haemolytica BIOGRUPO 1) POCO VALOR DIFERENCIACIÓN ANTIGÉNICA

37 PODER PATÓGENO P. multocida (GRUPO D) TOXINA DERMONECRÓTICA CODIFICADA POR GEN toxA PRODUCE OSTEOLISIS DE CORNETES NASALES (RINITIS ATRÓFICA CERDO) CÁPSULA DE ÁC. HIALURÓNICO, LPS ACTIVIDAD HEMOLÍTICA POST TRATAMIENTO CON TWEEN 80

38 PODER PATÓGENO FIMBRIAS TIPO IV: ADHESIÓN
M. haemolytica: EXOTOXINA PROTEICA (LEUCOTOXINA, Lkt), MIEMBRO DE TOXINAS RTX MODULADORES DE LEUCOCITOS EFECTOS DEPENDENDIENTES DE CONCENTRACIÓN DE TOXINA

39 PODER PATÓGENO Lkt FORMA COMPLEJOS CON LPS in vivo REFORZANDO ACTIVIDAD TAMBIÉN PRESENTE EN P. multocida, P. aerogenes y P. trehalosi PROTEÍNAS RECEPTORAS DE TRANSFERRINA (tpbA y tpbB)

40 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
MUESTRAS DE ÓRGANOS O DE PUS, EXUDADOS, HISOPADOS, etc. OBSERVACIÓN DIRECTA: TINCIÓN BIPOLAR, IF, IHQ AGAR SANGRE Y AGAR McCONKEY (DIFERENCIAR ENTRE ESPECIES)

41 OBSERVACIÓN DIRECTA

42 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
COLONIAS BLANCO GRISÁCEAS, REDONDAS, BRILLANTES, MUCOIDEAS (CÁPSULA) COLONIAS MUCOSAS A RUGOSAS LUEGO DE SUBCULTIVO M. haemolytica: HEMÓLISIS, CRECIMIENTO EN McCONKEY IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA

43 P. multocida

44 M. haemolytica

45 IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA