LABORATORIO CLINICO EMBARAZO INFERTILIDAD. LA PRUEBA DEL SAPO En el año 1942 un citólogo argentino, Eduardo Patricio Diego de Robertis, demostró que la.

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1 LABORATORIO CLINICO EMBARAZO INFERTILIDAD

2 LA PRUEBA DEL SAPO En el año 1942 un citólogo argentino, Eduardo Patricio Diego de Robertis, demostró que la hCG actuaba sobre las células de Sertoli de sapos, provocando la expulsión de espermatozoides. En 1947, su discípulo Carlos Galli Mainini observaba cómo la orina de mujeres embarazadas inyectadas en el saco linfático dorsal del Bufo Arenarium-Hensel (bufo arenarum) promovía la espermatogénesis bajo el estímulo de hCG. Se obtienen resultados positivos a la media hora; el 80 % lo hace a la segunda hora y casi la totalidad a las 3 h, de allí en adelante es muy difícil que una prueba negativa se convierta en positiva.

3 Luego de la fecundación el embrión se desarrolla en la trompa de Falopio por unos días. Aproximadamente el día 5 post- fecundación entra en el útero y al día 8-9 comienza la implantación y el contacto del embrión con la circulación materna Es en ese momento la hormona hCG que está produciendo el embrión comienza a pasar a la sangre de la madre. Luego de unos días la hCG ya es detectable en la madre por una prueba de embarazo, cuando aún la mujer no ha percibido la falta de la menstruación

4 HCG Familia de las glicoproteínas Es secretada por la placenta, empezando con el inicio del trofoblasto, desde el momento de la implantación, y sirve de apoyo al cuerpo luteo durante las primeras semanas del embarazo. Molécula de 39.500 dalton Compuesta de dos subunidades, a y b (covalente). Estas subunidades pueden aparecer de forma libre, o sin capacidad de unión. Solamente HCG intacta posee actividad biológica. La subunidad a-HCG es estructuralmente idéntica a la hormonas glicoproteicas análogas de la putuitaria, (LH), (FSH) y TSH. La unidad b especifica les confiere sus diferentes actividades biológicas.

5 D ETERMINACIÓN DE BHCG  SANGRE CUANTITATIVA CUALITATIVA  ORINA CUALITATIVA

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7 A partir de los niveles detectados en sangre de esta hormona (medidos en mUI/ml), es posible estimar en qué semana de la gestación se está: 9–130: entre 3-4 semanas 75–2600: entre 4-5 semanas 850–20800: entre 5-6 semanas 4000–100200: entre 6-7 semanas 11500–289000: entre 7–12 semanas 18300–137000: entre 12-16 semanas 1400–53000: entre 16–19 semanas (2º trimestre) 940–60000: entre 19-41 semanas (3º trimestre)

8 AUMENTO DE B HCG Si la GCH en la sangre es positiva y no hay un embarazo implantado apropiadamente en el útero, puede indicar: Embarazo ectópico Aborto espontáneo Cáncer testicular (en los hombres) Tumor trofoblástico Mola hidatiforme

9 INFERTILIDAD ES LA INCAPACIDAD DE UNA PAREJA QUE NO USA METODOS ANTICONCEPTIVOS PARA LOGRAR UN EMBARAZO CLINICA Y BIOLOGICAMENTE DETECTABLE, DURANTE CIERTO PERIODO DE TIEMPO POR LO GENERAL UN AÑO, ó EL FRACASO PARA LLEVAR UN EMBARAZO A TERMINO EN REPETIDAS OCASIONES

10 INFERTILIDAD 1.- ESTABLECER LA CAUSA A) EDAD DE LA MUJER. B) DURACION DE LA EXPOSICION AL EMBARAZO. C) FACTOR MEDICO CAUSAL. 2.- PROPORCIONAR UN PRONOSTICO

11 INFERTILIDAD FACTOR MEDICO CAUSAL: 1.- FACTOR CENTRAL ó DE OVULACION 2.- FACTOR CERVICAL ó DEL MOCO 3.- FACTOR UTERINO ó ENDOMETRIAL 4.- FACTOR VULVAR O VAGINAL 5.- FACTOR TUBARICO 6.- FACTOR MASCULINO

12 INFERTILIDAD FACTOR CENTRAL ó DE OVULACION - ES UNA DE LAS CAUSAS MAS FRECUENTES. - SE CARACTERIZA POR FALTA COMPLETA DE OVULACIÓN ó UNA OVULACIÓN INFRECUENTE ó IRREGULAR. - EXISTEN ALTERACIONES DEL CICLO MENSTRUAL: OLIGOMENORREA AMENORREA - SE RELACIONA CON NIVELES ELEVADOS DE PROLACTINA. - HAY QUE DESCARTAR PROBLEMAS HIPOTALAMICOS E HIPOFISIARIOS. - OVARIO POLIQUISTICO

13 INFERTILIDAD FACTOR CERVICAL ó DEL MOCO SE DEBE APRECIAR LA: - VISCOCIDAD - ELASTICIDAD - CRISTALIZACION

14 INFERTILIDAD FACTOR UTERINO ó ENDOMETRIAL - INFECCIONES POST ABORTO ó PARTO - SECRECION INSUFICIENTE DE PROGESTERONA - ANOMALIAS CONGENITAS - FIBROMAS ó MIOMAS UTERINOS - SINEQUIAS UTERINAS - LESIONES ENDOMETRIALES - ENDOMETRIOSIS

15 INFERTILIDAD FACTOR VULVAR O VAGINAL - ATRESIAS - APLASIAS - INFECCIONES - DISPAREUNIA

16 INFERTILIDAD FACTOR TUBARICO - SON ENTRE EL 20-35% DE LAS CAUSAS DE INFERTILIDAD. - INFECCIONES - ABORTOS - OBSTRUCCION CORNUAL - OCLUSION FIMBRICA - ENDOMETRIOSIS

17 ESPERMATOGRAMA

18 ANÁLISIS DEL SEMEN El semen es producido a partir de una suspensión concentrada de espermatozoides, mezclados y diluidos por secreciones de los órganos sexuales accesorios. 2 atributos cuantificables principales: # total de espermatozoides Volumen total del líquido

19 RECOGIDA DE LA MUESTRA PREPARACIÓN Cuarto privado cerca al laboratorio. 2 -7 dias Instrucciones claras escritas y habladas. Limitar fluctuaciones de T° y control del tiempo

20 RECOGIDA DE LA MUESTRA PREPARACIÓN Información en el formulario: Nombre completo Fecha de nacimiento Número de identificación Período de abstinencia Fecha y hora de recogida Dificultades en la recogida de la muestra Intervalo entre recogida e inicio del análisis

21 RECOGIDA DE LA MUESTRA Muestra por masturbación y eyaculación.. Nombre Número de identificación Fecha y hora de la recolección

22 ANÁLISIS MACROSCÓPICO 1. LICUEFACCIÓN 2. VISCOCIDAD 3. APARIENCIA 4. VOLUMEN 5. PH

23 ANÁLISIS MACROSCÓPICO VOLUMEN Medición precisa es esencial, permite calcular el número total de espermatozoides. Es mejor medir el volumen pesando el recipiente donde se recolectó la muestra. Cada envase debe pesarse previamente, registrar el peso.

24 ANÁLISIS MICROSCÓPICO Obtener muestra representativa. Mezclar bien antes de tomar alicuotas Resultados deben concordar Tomar alícuota de 10 ul Evitar formación de burbujas de aire Agregación: adherencia de esperm. inmóviles entre sí o de esperm. móviles a hebras de moco, cel. no espermáticas o detritos.

25 MOTILIDAD DE ESPERMATOZOIDES Evaluar: Motilidad progresiva (PR): Se mueven activamente, en forma lineal o en un círculo grande, independiente de la velocidad. Motilidad no progresiva (NP) Inmóviles (IM) El límite de referencia inferior de la motilidad total (PR + NP) es de 40% El límite de referencia inferior de la motilidad progresiva (PR) es de 32%

26 MORFOLOGÍA ESPERMÁTICA Preparación del frotis Fijación y coloración Observación microscópica Contaje de 200 espermatozoides por réplica Comparación de los valores y determinar si son aceptables.

27 CLASIFICACIÓN DE LA MORFOLOGÍA ESPERMÁTICA Se recomienda clasificación: normal/ anormal, con opción al recuento de los tipos de anormalidades. Espermatozoide: Cabeza Cuello Pieza intermedia Pieza principal Pieza terminal

28 INFERTILIDAD FACTOR MASCULINO :ESPERMATOGRAMA 1.- RECOLECCION Y MANEJO DE LA MUESTRA 2.- EXAMEN MACROSCOPICO A) ASPECTO B) VOLUMEN C) CONSISTENCIA D) Ph 3.- INVESTIGACION MICROSCOPICA A) MOVILIDAD - PROGRESIVA RAPIDA Y LINEAL - LINEAL ó NO LINEAL LENTA - NO PROGRESIVA - NO MOVILIDAD B) CONCENTRACION DE ESPERMATOZOIDES

29 INFERTILIDAD 4.- EXAMENES MICROSCOPICOS ADICIONALES A) VIABILIDAD DE LOS ESPERMATOZOIDES B) CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS C) DETECCION DE ANTICUERPOS 5.- ANALISIS BIOQUIMICOS A) PLASMA SEMINAL - PROSTATA: ZINC, ACIDO CITRICO, FOSFATASA ACIDA - VESICULA SEMINAL: FRUCTUOSA - EPIDIDIMO: L-CARNITINA

30 INFERTILIDAD VOLUMEN: 2ml ó mas PH: 7.2-7.8 CONCENTRACION: 20´000,000 ml TOTAL DE ESPERMA: 40´000,000 MOTILIDAD: 50% progresión anterograda : 25% progresión lineal rápida MORFOLOGIA: 50% normal VIABILIDAD: 50% vivos LEUCOCITOS: menos de 1´000,000 ZINC: 2.4 umol ACIDO CITRICO: 52 umol FRUCTUOSA: 13 umol PRUEBA DE MAR: menos del 10% PUEBA DE INMUNOBEADS: menos del 10%

31 INFERTILIDAD NORMOZOOSPERMIA: eyaculado normal. OLIGOZOOSPERMIA : menos de 20´000,000 de espermatozoides. ASTENOZOOSPERMIA: menos 50% de espermatozoides con progresión anterograda, ó menos de 25% con movimiento lineal rápido. TERATOZOOSPERMIA: menos del 50% con morfología normal. OLIGOASTENOTERATOZOOSPERMIA: AZOOSPERMIA: ausencia de espermatozoides en eyaculado. ASPERMIA: no hay eyaculado