Resultados de la restricción

Presentación del tema: "Resultados de la restricción"— Transcripción de la presentación:

1 Resultados de la restricción
Grupo 1,

2 ¿Qué son las enzimas de restricción?
Solo para ayuda resolución del examen ¿Qué son las enzimas de restricción? Enzimas bacterianas que: A) reconocen secuencias específicas de 4 a 8 pares de bases, denominadas sitios de restricción o secuencia de reconocimiento. B) Escinden o rompen ambas hebras de DNA en ese sitio.

3 Qué tipo de corte hacen las enzimas de restricción?
Solo para ayuda resolución del examen Qué tipo de corte hacen las enzimas de restricción? sustratos productos Se obtiene corte en la doble cadena en la región del palíndrome. Extremos cohesivos o pegajosos (clonación molecular) Extremos romos

4 Std peso molecular utilizado en la práctica
DNA HindIII fragments The Hind III digest of phage-DNA yields the following 8 discrete fragments. Lambda DNA was completely digested by Hind III, phenol extracted, ethanol precipitated, dissolved in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) and 1 mM EDTA. 

5 Para el reporte Si tienen bandas de sus muestras discutan sobre esto en su reporte Sí no hubo o no se visualizaron las bandas tomen otro gel o bien el que les puse del semestre pasado Discutir sobre esos resultados

6 Arreglos poco usuales de DNA
1. No se observó el inserto en el carril del plásmido restringido con dos enzimas (E2), muy oscura esa parte del gel, pero… 2. Si se observa en E1 y E2 el vector recombinante (aprox 6500pb; EQ1,2 y 4, muy tenue en EQ3) 3. Se observa en el carril E2 el vector de clonación (aprox 5000; EQ2 y 4 ) 4. Topoisómeros en todos los carriles desde P. 5. Cosas raras en P, arreglos de alto peso molecular de DNA posibles enrollamientos entre DNAs plasmídicos y/o DNA cromosomal. Y contaminación con DNA cromosomal. EQ1 EQ2 EQ3 EQ4 P E1 E2 Std P E1 E P E1 E2 P E1 E2 Std DNA cromosomal Arreglos poco usuales de DNA Vector recombinante Vector clonación Topoisómeros Inserto

7 Arreglos poco usuales de DNA
1. EQ7 si tiene el inserto en el carril del plásmido restringido con dos enzimas (E2) muy tenue 2. En el EQ7 se observa en E2 el vector recombinante (aprox 6500pb), también en EQ6 E1 muy tenue 3. No se observa el vector de clonación, pero hay una banda intensa por debajo de 4300? 4. Cosas raras en P, arreglos de alto peso molecular de DNA posibles enrollamientos entre DNAs plasmídicos y/o DNA cromosomal. EQ5 EQ6 EQ7 P E1 E2 Std P E1 E2 Std P E1 E2 DNA cromosomal std Arreglos poco usuales de DNA Vector recombinante Vector clonación Topoisómeros Inserto

8 EQ1 semestre 2016_02 P E1 E2 Std Arreglos poco usuales de DNA o DNA
Vector recombinante Vector clonación Inserto RNA