Resultados de la restricción del plásmido

Presentación del tema: "Resultados de la restricción del plásmido"— Transcripción de la presentación:

1 Resultados de la restricción del plásmido
Nov, 2010

2 Std de peso molecular: Lambda HindIII Ladder
The λ HindIII DNA Ladder is prepared by restriction digestion of phage Lambda DNA to completion with HindIII, followed by heat inactivation of the enzyme. The resulting 7 fragments range from 564 base pairs to kilobases in size. 564, 2027, 2322, 4361, 6557, 9416, bp

3 Gel modelo Std de peso molecular Sin restringir Sin muestra
T Std de peso molecular Sin restringir Sin muestra Restringido con 2 enzimas Restringido con 2 enzimas e incubado toda la noche Restringido 1 enzima VR P Inserto RNA T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto

4 Comentarios Sólo los geles del equipo 3 y 7 muestran bandas.
Para su discusión y reporte pueden usar estos dos geles y también el gel modelo. Lo siento chicos.

5 Equipos 1 y 2 SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz El mismo gel de la derecha, solo que inverti los colores y si se logran ver bandas de alto peso molecular. Aunque no hay mucha diferencia entre tratamientos

6 Equipos 4 y 3 SD 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz En este gel al que le invertí los colores se logra ver una bandita tenue que marque con una flecha como posible inserto. Solo se logran ver bandas en el gel del equipo 3, en el del cuatro parece que hay algo pero no es muy claro.

7 Equipos 6 y 5 1Enz 2Enz Std SD 1Enz 2Enz Ya le moví la intensidad al gel y no se logra ver nada. Solo el std.

8 Equipo 7 Std SD 1Enz 2Enz Muy bien chicos, Se ve claramente que la cantidad de topoisómeros disminuye cuando ponen 1 enzima y más cuando ponen 2 enzimas En el gel sobrepuesto, invertí los colores y cambie la intensidad, se observan más claramente las bandas pero aún no se nota la banda del inserto. Creó que lo que sucedió es que hay menos DNA en el carril de las dos enzimas, porque todas las bandas están más tenues.