GRUPOS SANGUÍNEOS Silvia Arias A50544 Ana Elena Núñez A53994 Daniel Chacón A31362.

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1 GRUPOS SANGUÍNEOS Silvia Arias A50544 Ana Elena Núñez A53994 Daniel Chacón A31362

2 Generalidades  La sangre está constituida por el líquido plasmático y por células/elementos figurados de la sangre.  Los eritrocitos en su superficie tienen glucoproteínas y glucolípidos que pueden actuar como antígenos.  La sangre se clasifica en varios grupos de acuerdo con la presencia o ausencia de los diversos antígenos.  24 grupos sanguíneos y más de 100 antígenos detectables, pero desde el punto de vista clínico interesan sólo los antígenos A, B y Rh.

3 Generalidades  La sangre Rh positiva es la que posee antígeno D en sus eritrocitos; la negativa no lo posee.  El plasma sanguíneo puede tener o no Ac que reaccionan con los antígenos eritrocíticos A, B y Rh.  El plasma normalmente no contiene Ac contra los antígenos de sus propios eritrocitos.  Pero sí contiene anticuerpos contra los antígenos que no están presentes en sus eritrocitos.

4 SISTEMA RHESUS

5 El Sistema Rhesus (Rh)  Uno de los sistemas de Ag más polimórficos e inmunogénicos conocidos en humanos.  Descrito en 1940 por Landsteiner y Wiener.  Mujer embarazada transfundida con sangre de su esposo → severa rx transfusional, hijo nace muerto, con eritroblastosis fetal.  Su suero aglutinaba los eritrocitos de su esposo y del 80% de los donadores caucásicos ABO- compatibles.

6 El Sistema Rhesus (Rh)  Landsteiner y Wiener descubren que el suero de conejos inmunizados con eritrocitos de monos Macaca mulatta (antes M. rhesus) aglutinaban el 85% de las muestras humanas de eritrocitos.  Inicialmente se pensó que los Ac animales y humanos reconocían un factor común, llamado Rh, en la superficie de eritrocitos de M. rhesus y de los humanos.  Rh y anti-Rh (aloanticuerpo humano).  Heteroanticuerpo → anti-LW

7 El Sistema Rhesus (Rh)  Al menos 45 antígenos independientes → 5 con importancia especial.  El más significativo clínicamente, junto con el Sistema ABO, en medicina transfusional.  Dos nomenclaturas = dos teorías de herencia.  Antígenos D, C o c, y E o e.  d no expresa ningún antígeno Teoría Fisher- Race Teoría Wiener 3 genes estrechamente unidos, heredados de cada progenitor 1 gen Rh heredado de cada progenitor (gen en mosaico) Dd CcRr Ee

8 El Sistema Rhesus (Rh) Fisher-RaceWienerf génica (%) DCeR1R1 40 DcER2R2 16 DceR0R0 2 DCERzRz 0,08 dcer38 dCer’1 dcEr’’1 dCEryry muy raro  Antígenos C (c) y E (e) se heredan en bloque.  8 haplotipos:

9 El Sistema Rhesus (Rh)  R → usado cuando el antígeno D se expresa → Rh+.  r → usado cuando el antígeno D no se expresa → Rh-.  85% de los individuos caucasoides expresan el antígeno D → Rh+.  15% no expresan el antígeno D → Rh-.  La mayoría de los individuos Rh- tienen genotipo rr (dce/dce).  Individuos que heredan antígenos C (c) y/o E (e), pero no D, se clasifican como Rh- (e.g. dCe/dce).

10 El Sistema Rhesus (Rh)  El antígeno D es altamente inmunogénico:  Induce una respuesta inmune en el 80% de los individuos D-negativos (Rh-) transfundidos con 200 mL de sangre D- positiva (Rh+).

11 El Sistema Rhesus (Rh)  D u → variable débil del antígeno D, poco frecuente en caucasoides, pero común en individuos de raza negra (22%).  Eritrocitos D u → reacciones débiles o negativas con anti-D.  3 categorías:

12 El Sistema Rhesus (Rh)  D u adquirido  Herencia del gen C en posición trans en relación con el gen D → expresión débil del antígeno D.  No producen anti-D si reciben sangre Rh+.

13 El Sistema Rhesus (Rh)  Variante D u  Antígeno D → al menos 4 partes (estructura).  Si falta una o más partes → expresión débil de D.  Individuos con variante D u pueden producir Ac contra la parte del Ag D que carecen → deben ser transsfundidos con sangre Rh-.

14 El Sistema Rhesus (Rh)  D u hereditario  Poseen el antígeno D completo, pero está débilmente expresado (no se conoce la causa).

15 REACCIONES TRANSFUCIONALES

16 Reacciones Transfusionales  Reacciones transfusionales hemolíticas agudas:  Frecuencia 1:12.000 (episodios : unidades).  Aparecen cuando el receptor posee Ac preformados que lisan los eritrocitos del donante.  Isoaglutininas ABO (IgM → producción).  IgM → respuesta independiente de células T (no produce memoria inmunológica).  Producen aglutinación, activan el complemento y provocan hemólisis intravascular.

17 Reacciones Transfusionales  Clínica:  Hipotensión  Taquicardia  Taquipnea  Fiebre  Escalofríos  Hemoglobinemia  Hemoglobinuria → NTA  Dolor torácico o en un flanco  Molestias locales en el lugar de infusión.

18 Reacciones Transfusionales  Reacciones post-transfusionales hemolíticas retardadas:  Frecuencia 1:1.000 (episodios : unidades).  Aparecen en pacientes previamente sensibilizados a los aloantígenos eritrocitarios.  Aloanticuerpos → IgG (anti-D).  IgG → puede activar el complemento (vía clásica C1q).  IgG → opsonizan eritrocitos Rh+ → son fagocitados por células del Sistema Fagocítico Mononuclear.  Provocan hemólisis extravascular.

19 Reacciones Transfusionales  Clínica:  Aparecen de 5-10 días después de la transfusión.  Fiebre  Anemia  Ictericia  Ocasionalmente hemoglobinuria

20 ANEMIA HEMOLÍTICA AUTOINMUNE

21 Anemia Hemolítica Autoinmune  Destrucción de eritrocitos por actividad inmune que se dirige contra los glóbulos rojos del mismo huésped.  Produce anemia si la Médula Ósea no es capaz de reponerlos.

22 Autoanticuerpos  Anticuerpos con con especificidad para los antígenos asociados a los glóbulos rojos.  Fríos: IgM Temperaturas inferiores a 37° Causan hemólisis más graves.  Calientes: IgG Reaccionan a temperatura del cuerpo.

23 Hemólisis relacionada con IgG  Adherencia inmunitaria de los eritrocitos a los fagocitos mediada por el anticuerpo.  Activación del complemento.

24 Anemia Hemolítica Autoinmune  Más frecuente en adultos, mujeres.  Complicación de alguna enfermedad que afecta al sistema inmunitario.  Fatiga, síntomas de anemia, ictericia leve, esplenomegalia.  Prueba de antiglobulina, o prueba de Coombs.

25 Prueba de Coombs Directa  Glóbulos rojos del paciente y Antisueros anti-IgG, para aglutinar los eritrocitos cuando estas inmunoproteínas se encuentran en la superficie de los glóbulos rojos.

26 Prueba de Coombs Indirecta  Para detectar anticuerpos que no están fijados.  Se utiliza el suero del paciente y glóbulos rojos normales que llevan el antígeno

27 ENFERMEDAD HEMOLÍTICA DEL RECIÉN NACIDO

28 Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido  Aloinmunización: Producción de anticuerpos dirigidos contra el grupo sanguíneo de otra persona.  Eritroblastosis fetal.  Se produce cuando existe incompatibilidad entre los grupos sanguíneos de la madre y el feto.

29 Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido  Se puede desarrollar cuando una madre Rh- tiene un feto Rh+  El paso más importante de eritrocitos fetales a la circulación materna es durante el parto.  Abortos.  Examen prenatal invasivo.  Esfuerzos extraordinarios.

30 Aloinmunización  De acuerdo al grado de hemólisis:  Anemia  Ictericia  Hidropesía Fetal  Existe una correlación entre la cantidad de bilirrubina y la gravedad de la anemia.

31 Inmunoglobulina Anti-Rh  Indicaciones para su administración:  Postparto  Anteparto  Postamniocentesis  Postransfusión  Aborto

32 Hemólisis Fetal por Incompatibilidad ABO  20 al 25% de los embarazos.  Evidencia de laboratorio en 1 de cada 10  Anticuerpos anti-A y anti-B son IgM.  Antígenos A y B se expresan escasamente.  Células distintas de eritrocitos expresan antígenos A Y B

33 PRUEBAS DE LABORATORIO

34 Determinación de los Grupos Sanguíneos y la Prueba Directa de Antiglobulina en Neonatos

35 Equipo y materiales  Centrifuga  Pipetas  Dispensador  Tubos de suspensión  Tarjetas de microtyping  ABO/Rh para neonatos  Reactivos  Diluyente 1 (bromelina)  Diluyente 2 (LISS modificado)  Muestra  Sangre del cordón umbilical Diamed-ID

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37 Procedimiento Permita que todos los reactivos alcancen la temperatura del cuarto antes del uso. Identifique la tarjeta de microtyping (nombre del paciente y número). Remueva el aluminio. Prepare una suspensión 0.8% de eritrocitos de la muestra en ID-diluyente 2 10 μ L concentrado de eritrocitos del cordón + 1.0ml ID- diluyente 2 20 μ L sangre entera + 1.0ml ID-diluyente 2 Mezcle bien.

38 Procedimiento Agregue 50 μ L de la suspensión de eritrocitos a cada microtubo Agregue 25 μ L de diluente 1 (bromelina) a los tubos 1-5. Incube la tarjeta a la temperatura del cuarto por 10min Centrifugue las tarjetas de microtyping por 10min Interprete los resultados

39 Imp. El control debe ser negativo Interpretación

40 Determinación del grupo sanguíneo ABO Anti-AAnti-BAnti-ABGroup Tubo, reacción 0-4 3-40 A 0 B AB 000O

41 Determinación del grupo sanguíneo Rhesus  Reacciones positivas, grado 3-4 en el microtubo “D”, indican la presencia del antígeno  Reacciones positivas, grado 2 en el microtubo “D”, sugieren la presencia del antígeno Du  Reacciones negativas en el microtubo “D” indican la ausencia del antígeno D

42 Prueba directa Coombs  Reacciones grado 4 en el microtubo “dir.coombs” indican que la prueba es positiva.  Reacciones grado 0 en el microtubo “dir.coombs” indican que la prueba es negativa.

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44 Determinación del Grupo Sanguíneo ABO con Grupo Reverso y Rh en Adultos

45 Equipo y materiales  Centrifuga  Pipetas  Dispensador  Tubos de suspensión  Reactivos  Diluente 1 (bromelina)  DiaCell A1  DiaCell B  Tarjetas de microtyping  ABO + grupo reverso  Muestra  Concentrado de eritrocitos/sangre entera (para ABO)  Suero/plasma (para el grupo reverso)

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47 Procedimiento  Permita que todos los reactivos alcancen la temperatura del cuarto antes del uso.  Identifique los ID-microtyping de la tarjeta (nombre del paciente y número). Remueva el aluminio.  Prepare una suspensión 0.5% de eritrocitos de la muestra en ID-diluente 1 25 μ L concentrado de eritrocitos + 0.5ml ID-diluyente 1 50 μ L sangre entera + 0.5ml ID-diluyente 1

48 Procedimiento  Mezcle bien e incube a la temperatura del cuarto durante 10min.  Agregue  10 μ L de la suspensión de eritrocitos en los microtubos “A, B, D y ctl”  50 μ L de ID-DiaCell A1 al microtubo “A1”  50 μ L de ID-DiaCell B al microtubo “B”  50 μ L de suero/plasma a los microtubos “A1 y B”

49 Procedimiento  Incube la tarjeta a la temperatura del cuarto por 10min  Centrifugue la tarjeta por 10min  Interprete

50 Imp. El control debe ser negativo Interpretación

51 Determinación del grupo sanguíneo ABO Anti-AAnti-BA cellB cellABO 4003-4A 04 0B 4400AB 003-4 O Microtubos con suspensión de eritrocitos Microtubos con suero/plasma

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53 Gracias!