HMC COLORACIÓN DE PAPANICOLAOU Y CITOLOGIA CÉRVICO VAGINAL CITOLOGIA CÉRVICO VAGINAL.

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1 HMC COLORACIÓN DE PAPANICOLAOU Y CITOLOGIA CÉRVICO VAGINAL CITOLOGIA CÉRVICO VAGINAL

2 1928 RESEÑA HISTORICA publicó 1940 George Papanicolaou Médico griego radicado en EE.UU. en Ernest Ayre El primer raspado en extendidos del cuello uterino

3 RESEÑA HISTORICA 1ra. Clasificación: George Papanicolaou: “Citología Exfoliativa” 1950: 1954:Publicó su atlas de citología exfoliativa. Se universalizó su método Sistematizo métodos de TomaTinciónCriterios de evaluación

4 COLORACION PAPANICOLAOU El doctor George Papanicolau. Descubrió podían estudiarse las células descamaban Tanto Como otras partes del cuerpo Que un método con el cual pudiendo diagnosticarse células anormales o cáncer, inflamación e infecciones. de la

5 Cuando hay alteraciones en la forma de las células o el núcleo hace sospechar una patología premaligna. Cuando hay alteraciones en la forma de las células o el núcleo hace sospechar una patología premaligna. COLORACION PAPANICOLAOU En base a eso se maneja Que es el método de detección

6 COLORACION PAPANICOLAOU Además en las citología se pueden describir Hongos Tricomonas Gardnerella Cuando es insuficiente hay que repetirlo fijándose en porqué es insuficiente: fue mal tomada?, mal enviada?, mal procesada?, RESULTADO : MAL INFORME (Sistema Bethesda)

7 Diagnóstico Citológico de : Aparato genital femenino : - Vulva - Mucosa vaginal - Cérvix - Endometrio - Ovarios - Trompas uterinas Aparato genital Masculino :- Testículos - Vesícula Seminal - Próstata: Líquido prostático - masaje prostático - punción - aspiración

8 - Riñón, vías urinarias - vejiga - Aparato Digestivo - boca - glándulas salivales - esófago - estómago- intestino - páncreas - hígado - Ganglios linfáticos - Glándula tiroides - Cavidades que encierran líquidos - Tracto Respiratorio - tráquea - bronquiolos - bronquios - pulmón - pleura L.C.R. L. Pleural L. Asítico L. Quístico L. Articular

9 FIJADORES CITOLOGICOS Fijación: Fijar es detener los procesos vitales del tejido para preservar sus características morfológicas. A. Rapidez B. Preservar las estructuras C. Mínimos cambios CARACTERÍSTICAS DE UN BUEN FIJADOR

10  ALCOHOL ETÍLICO 95% - 100 %  Alcohol - éter (500 ml alcohol + 500 ml éter) El Eter va a acelerar el proceso de fijación, el tiempo estimado deberá ser 15-30´.  Spray comerciales (Mezcla de fijador + sellador)  Alcohol isopropilico fija células en sitios donde se almacenan las muestras, mantienen el detalle celular.  Propilenglicol o polietilenglicol impermeabiliza el extendido. (Sellador - laca que protege )

11 FIJADORES CITOLOGICOS Fijador Celular "Spray"- Ginecología / Citología. Pulverizador spray. Preserva la morfología de las células y los detalles nucleares. Preserva la morfología de las células y los detalles nucleares. Rápido secado. Rápido secado. Soluble en agua y alcoholes. (transporte de muestras). Soluble en agua y alcoholes. (transporte de muestras). Apto para cualquier tinción posterior. Apto para cualquier tinción posterior. Fija rápidamente previniendo la desecación celular Fija rápidamente previniendo la desecación celular

12 FIJADORES CITOLOGICOS Penetra los espacios aéreos de las células inhibiendo deformaciones citoplasmáticas. Penetra los espacios aéreos de las células inhibiendo deformaciones citoplasmáticas. Produce una película sobre la superficie del frotis, (solubilidad en agua y alcoholes). Produce una película sobre la superficie del frotis, (solubilidad en agua y alcoholes).

13 -Raspado por medio de espátulas (cuello uterino) bisturí (piel). - Escobillado o cepillado (cuello uterino) (bronquios) - Lavados que son utilizados en cavidades - Aspirados, métodos al vacío - Punción - Aspiración - Impronta : A través de fotografía para estudio de muestras sospechosas de cáncer, ayuda al Dx. -Impronta intraoperatoria: Dx inmediato al momento de la operación. Métodos para Obtener Muestras

14 - Para muestras líquidas, centrifugación o filtración - Extensión del material citológico en porta objetos. Características de un buen extendido: - Láminas nuevas -Delgado - Extender la muestra sin parar 2 veces por el mismo lugar, extender con bagueta de vidrio, bajalengua, espátula de madera. - El extendido hay que hacerlo al momento y luego fijarlo ya que las células se deterioran ( 15”- 20”) Preparación del Material Celular

15 Toda solicitud de análisis que llegue al laboratorio de citología clínica debe de cumplir una serie de requisitos para interpretación del diagnóstico. Nombre Nombre Tipo de muestra Tipo de muestra Datos Clínicos Datos Clínicos Impresión diagnóstica y consideraciones técnicas como fijador y fecha. Impresión diagnóstica y consideraciones técnicas como fijador y fecha.

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18 COLORACION PAPANICOLAOU Principio y ventaja Ventaja: a.Una buena definición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatina de las células. b. Un aspecto transparente de los citoplasmas y una diferenciación celular, que permite apreciar grados de maduración celular y actividad metabólica. La tinción de Papanicolaou es un método de tinción poli crómico que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplasmático.

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20 COLORACION PAPANICOLAOU Tinción: Las células en estado normal (sin teñir) presentan muy poco contraste de las diferentes estructuras celulares. Tienen una composición determinada que varía discretamente según el tipo de tejido y unas características físicas propias que determinan la posibilidad de ser teñidas. Las células en estado normal (sin teñir) presentan muy poco contraste de las diferentes estructuras celulares. Tienen una composición determinada que varía discretamente según el tipo de tejido y unas características físicas propias que determinan la posibilidad de ser teñidas.

21 La tinción pretende destacar lo mas posible la estructura nuclear y suavemente el citoplasma, para indicarnos si es eosinófilo o basófilo para ello se emplean distintos colorantes como: La Hematoxilina DE HARRIS La Hematoxilina DE HARRIS Orange-G (colorante monocromático) Orange-G (colorante monocromático) EA-36 (colorante polícromo) EA-36 (colorante polícromo) COLORACION PAPANICOLAOU

22 1. Hematoxilina Tiñe cromatina, núcleo ayuda al Dx oncológico. 2. Orange G - 6Tiñe células maduras (contiene queratina) 3. EA -36 Tiñe todos los citoplasmas (colorante policromo) Light green células inmaduras EA - 36 Pardo Bismark (basófilas o cianófilas) Eosina “Y” (eosinófilas) COLORACION PAPANICOLAOU

23 Las muestras deben estar previamente bien fijadas. 1. Alcohol Etilico corriente o de 95% 5min. 2. Agua de caño corriente en una cubeta 1min. 3. Hematoxilina de Harris 2min. 4. Lavar en agua de caño a chorro continuo2min. 5. Paso opcional: Antes del chorro continuo 6. Alcohol Etilico al 95% 1min. o de 15-20 baños 7. Orange G-6 2min. COLORACION PAPANICOLAOU EN EL HMC PROCEDIMIENTO:

24 8. De frente pasar al alcohol al 95%1min o 15-20 baños 9. Solución de Acido Acético al 1% en Alcohol de 95% 5-6 baños 10. Acido Fosfotungtico al 1% en alcohol de 95% 5-6 baños 11. Alcohol Etilico al 95% I 1min o 15-16 baños 12. EA-31 (o EA-36)30 segundos 13. Alcohol Etilico al 95% I 1min o 15-16 baños 14. Alcohol Etilico al 95% Il 1min o 15-16 baños 15. Alcohol Etilico al 95% Ill 1min o 15-16 baños 16. Alcohol Etilico al 100% l1min o 15-16 baños COLORACION PAPANICOLAOU EN EL HMC

25 17. Alcohol Etilico al 100% ll1min o 15-16 baños 18. Alcohol Etilico al 100% lll1min o 15-16 baños 19. Desparafinizante l1min o 15-16 baños 20. Desparafinizante ll1min o 15-16 baños 21. Desparafinizante lll1min o 15-16 baños 22. Montaje de las laminas: Balsamo de Canada y Laminilla cubreobjetos COLORACION PAPANICOLAOU EN EL HMC

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33 COLORACION PAPANICOLAOU RESULTADOS DE LA COLORACIÓN Núcleo-->Violeta azulado Citoplasma --> De acuerdo a la maduración de la célula que van desde anaranjado al verde.

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35 George Papanicolau clasificó a las células según orden de normal patológico. George Papanicolau clasificó a las células según orden de normal patológico. PAP INormal PAP IIProcesos infecciosos -- de tipo benigno PAP IIIAtípia leve o sospechosa PAP IV Citología sugestiva, existen células atípicas pero que no reúnen características para considerarlas malignas. PAP VCélulas malignas COLORACION PAPANICOLAOU

36 Se usa la CLASIFICACIÓN DE BETHESDA (USA) Todo normal: PAP tipo 1. Muestra inadecuada: No tiene la cantidad de células adecuada para diagnostico o exceso de células. Falta rótulo. Lámina rota. No trae datos del paciente. COLORACION PAPANICOLAOU

37 Citología Cérvico vaginal Cervix Uterino: La portio vaginales del cervix uterino esta cubierta de epitelio pavimentoso estratificado semejante a la membrana mucosa de la pared vaginal. La portio vaginales del cervix uterino esta cubierta de epitelio pavimentoso estratificado semejante a la membrana mucosa de la pared vaginal. La Superficie interna del cervix esta cubierta por una única membrana de epitelio cilíndrico con células mucosas productoras de moco. A esta porción se le llama endocervix. La Superficie interna del cervix esta cubierta por una única membrana de epitelio cilíndrico con células mucosas productoras de moco. A esta porción se le llama endocervix.

38 La unión entre el epitelio pavimentoso estratificado de la portio vaginales y el epitelio cilíndrico productor de moco del endocervix, histológicamente es neta y evidenciable, llamándose unión escamocolumnar.

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40 Células normales del epitelio de los órganos genitales femeninos Estas células se clasifican en células: 1. Superficiales 2. Intermedias 3. Parabasales 4. Basales Células epiteliales pavimentosas estratificadas de la vagina y de la >

41 1.- Células Superficiales A menor aumento. A menor aumento. Se observa Grandes células con núcleos pequeños y picnoticos. A mayor aumento 1. Núcleo: Redondo o elíptico. Picno- tico y homogéneo. 2. Borde claro. 3. Se observa un halo perinuclear. 4. Citoplasma: Abundante, poligonal, delgado. 5.El borde esta plegado

42 2.- Células Intermedias a) A pequeño aumento. Aspecto general de la célula: casi tan grande como la célula superficial. b)A mayor aumento 1. Núcleo: Redondo o mas elíptico 2. Menor condensación de la cromatina que en las células superficiales. Fina 3. El borde nuclear es difuso. 4. Citoplasma: de formas variadas y discretamente mas grueso. 5. El borde celular esta plegado. No se ve vacuolas

43 3.- Células Parabasales a) A menor aumento. Cada célula es mucho mas pequeño que las células superficiales o intermedias, pero el núcleo es desproporcionalmente mayor b)A mayor aumento 1. Núcleo: Grande, redondo o elíptico 2. El núcleo suele estar situado en el centro, pero en ocasiones excéntrico. 3. Los gránulos de cromatina son mas obtensibles. 4. Citoplasma: Menos abundante que en las células superficiales y parcialmente espeso. 5. En ocasiones existe un halo perinuclear

44 4.- Células Basales Provienen de una sola capa basal No aparecen en los raspados ordinarios citoplasma es escaso y muy basófilo El núcleo relativamente grande, redondeado y central

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46 CÉLULAS DEL EPITELIO CILÍNDRICO Aparecen en la zona más interna de la superficie del cuello uterino y del canal endocervical. Son las llamadas células endocervicales. Aparecen en la zona más interna de la superficie del cuello uterino y del canal endocervical. Son las llamadas células endocervicales. Su presencia junto con la aparición de células de metaplasia le dan validez al frotis, es decir, indican que se ha hecho correctamente.

47 CÉLULAS DEL EPITELIO METAPLÁSICO Aparecen entre el epitelio cilíndrico y el plano poliestratificado, en la uniónescamo-columnar, ES LA ZONA MÁS IMPORTANTE QUE HAY QUE ANALIZAR!!!. Aparecen entre el epitelio cilíndrico y el plano poliestratificado, en la uniónescamo-columnar, ES LA ZONA MÁS IMPORTANTE QUE HAY QUE ANALIZAR!!!. Las células metaplásicas son las encargadas de proliferar para pasar de un epitelio cilíndrico a uno poliestratifiado, así pues, son células inmaduras que van pasando por distintos estadios hasta convertirse en células epiteliales basales ya maduras.

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