Proliferacion del epitelio en un modelo murino de asma

Presentación del tema: "Proliferacion del epitelio en un modelo murino de asma"— Transcripción de la presentación:

1 Proliferacion del epitelio en un modelo murino de asma
Mailen Baeza Flores y Beatriz Ceballos González

2 INDICE: -Sistema Respiratorio -Asma -Proliferación (Ki-67)
-Inmunohistoquímica    -Resultados de nuestra investigacion  -Conclusion

3 Que es el Sistema Respiratorio?
Intercambio de Gases -Proporciona O2 -Elimina CO2 -Respiracion: involuntario y automatico Estructuras especificas del sistema respiratorio Sistema Respiratorio

4 Asma: -Enfermedad respiratoria crónica -Los bronquios se inflaman
-Mayor produccion de Mucus  -Fibras musculares se contraen Causas:   -Alérgenos: Polen                         Acaros de Polvo                         Moho                         Caspa Animal Sintomas: -Dificultad respiratoria -Opresion toracica -Silibancias -Tos

5 Proliferación: ki-67 -Ki-67 marca nucleos positivos
-Proliferacion: Incremento del numero celular 

6 Inmunohistoquímica: Antigeno: sustancia que provoca la produccion de anticuerpos Anticuerpo: proteina producida por el sistema inmunitario cuando detecta un antigeno -Técnica de tincion para detectar una proteina a traves de la utilizacion de anticuerpos. -Para desarrollar esta tecnica debemos poner anticuerpos externos al organismo (en este caso de raton) para reconocer los ki-67 de este.

7 Investigacion: Ratones :-Sanos (WT PBS) -Asmaticos (WT OVA)
                  Hipótesis: el epitelio traqueal de los animales asmáticos presentará mayor proliferación de sus células que el epitelio de los animales sanos. Metodo: -Inmunohistoquímica                 -Conteo de núcleos de células epiteliales                  

8 Procedimiento 1.Obtencion muestra: 2.Inmunohistoquimica
Tratamiento con ovoalbumina. Extracción de pulmón y conservación en formol para mantener estructura. Parafinación del pulmón. Corte con micrótomo (5 a 8 micrometros de grosor) 2.Inmunohistoquimica Desparafinacion de las muestras. Lavado con Tris HCl 1x (buffer) Microondas 10 minutos temperatura maxima- 6 minutos a 60ºc con buffer (recuperacion estructura) Incubacion con solucion Tris Hcl+ H2O2. Bloqueo. Aplicación anticuerpo primario. Aplicación anticuerpo secundario. Aplicación proteina. Tincion

9 Epitelio traqueal WT PBS
Distal AA031 10x Celula positiva (AA58) Tráquea 10x PBS A2 Tráquea (AA031) Epitelio traqueal WT OVA Epitelio tráquea A x Células positivas (tráquea AA031)

10 Resultados - Aumento en el grosor del epitelio traqueal de los WT OVA.
-Diferencia mínima entre el numero de núleos de células de epitelio de WT OVA y WT PBS.

11 conclusión - El engrosamiento traqueal de los WT ova no se debe a la proliferación de las células epiteliales de este.

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