GUÍA de Lab. A. Q. GRADO-FARMACIA

Presentación del tema: "GUÍA de Lab. A. Q. GRADO-FARMACIA"— Transcripción de la presentación:

1 GUÍA de Lab. A. Q. GRADO-FARMACIA
Salvador Sagrado Dpto. Q. Analítica (Farmacia) GUÍA de Lab. A. Q. GRADO-FARMACIA TAREAS EVALUABLES (SE VALORARA LA FECHA DE ENTREGA) - Previo al Lab (Entregables al comenzar las prácticas) [1] Cuestiones (Leer la introducción del cuadernillo de prácticas en pdf. y acceder a los enlaces allí indicados. Hacer el cuestionario on-line en aula virtual) [2] Esquemas prácticas 1, 3, 4 y 5 (presentar el 1er día, según modelo para la práctica 2, resuelto al final del cuadernillo). El prof. Lo valorará y devolverá. - Sesiones experimentales (Laboratorio). Breve explicación + 5 sesiones prácticas [3] Informe parcial-resultados. Al final de cada día/práctica presentar al prof. el borrador cumplimentado (tras los cálculos) del informe (al final del cuadernillo). El prof. lo valorará in situ. - Posterior al Lab. Sesión seminario post-prácticas: [1] Desarrollo Prácticas (discusión grupal participativa. El prof. valorará in situ la participación activa, sobre todo el cuadernillo, el experimental, los esquemas) [2] Presentación Informe (discusión grupal participativa. El prof. valorará in situ la participación activa sobre los resultados del informe en el cuadernillo) [3] Informe-resultados (Entrega del informe, hoja de informe suelta-impresa aparte. El prof. valorará posteriormente los resultados de dicha hoja) Calificación final: Examen [1] 30% + Memoria [2] 20% + Resultados [3] 50%

2 ANÁLISIS ANALITOS MUESTRAS TÉCNICA (método)
1) DUREZA (Ca, Mg) AGUA VOLUMETRÍA (complejos) 2) N-acetíl-L-cisteína MEDICAMENTO ESPECTROFOTOMETRÍA (Vis.) 3) FLUORURO DENTÍFRICO POTENCIOMETRÍA 4) Ca MEDICAMENTO ABSORCIÓN ATÓMICA 5) PARACETAMOL MEDICAMENTO HPLC ASPIRINA CAFEÍNA TÉCNICA (método)

3 ANÁLISIS ORGANIZACIÓN PRACTICAS: ANALITOS MUESTRAS
1) DUREZA (Ca, Mg) AGUA 2) N-acetíl-L-cisteína MEDICAMENTO 3) FLUORURO DENTÍFRICO 4) Ca MEDICAMENTO 5) PARACETAMOL MEDICAMENTO ASPIRINA CAFEÍNA Parejas días exp. 1º 2º º º º 1,2 3,4 5,6 7,8 7,8 5,6 7,8 3,4 5,6 7,8 1,2 3,4 5,6 7,8 1,2 3,4 5,6 1,2 3,4 1,2

4 Ejemplos... y algunos datos esperables INFORME (por pareja)
Pedir al profesor junto con la muestra o patrón-verificación PRÁCTICA (ANALITO) ETAPA (Código) (Resultado previsto, unidades) RESULTADOS (Completar. Media y s con cifras significativas) INCIDENCIAS (código) (Describir por detrás) DUREZA Muestra: Agua MUESTRA Dm mg.L-1 CaCO3 Media ±s = 1230 ± 50 (Verificado) RSD(%) = <5% ; n = . Verificar Nº patrones de Calibrado: 5 ó (justificar) N-acetíl-L-cisteína Muestra: Medicamento CALIBRACIÓN VERIFICACIÓN Nv 10-40 % MUESTRA Nm Fabricante mg/unidad np = 5 (o incidencia) ; R2= >0.99 Media ±s = RSD(%) = ; n = 3 (o incidencia) RSD(%) = ; n = . N1 N2 INCIDENCIAS: N1 . Eliminación de 1 patrón de calibrado por que se alejaba de la recta de calibrado, por lo que np= 4 N2 Eliminación de 1 réplica de la muestra discrepante por que superaba el ensayo Q, por lo que n = 2

5 CÁLCULOS (ver Guía en Cuaderno de prácticas):
Opcionalmente o para verificar... HOJA EXCEL statreg.xls (ordenadores prácticas) Calibrado + interpolación Media ± s, RSD%, n (+ ensayo Q)

6 Calibración del método (instrumental)
- Patrón (p): NAC (puro, desecador) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 5.2] Pesar con precisión en balanza analítica g de N-acetíl-L-cisteína… enrasar a 250 mL con agua. (aforado) mp Vp ~[0.01] g =0.25 L [Ap- 6.1] Tomar alícuotas de la disolución de N-acetíl-L-cisteína de 0 a 5 mL (por ejemplo, 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mL) (pipeta grad.) e introducir en matraces de 25 mL. (aforado) ... vi vp =[0 – 5] mL =25 mL NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material ‘Recta de calibrado’: Blanco, ‘Cero’ instrumento seco * Cp1 Ap1 vi Cp Api mp Vp Cpi(mg/L) mp : masa de patrón Vp : volumen disolución patrón (madre) vi : volumen alícuotas patrón (alícuotas i ) vp: volumen disolución patrones calibrado Cpi : concentración patrones calibrado (mg/L) Api : absorbancia patrones calibrado Informe np=5 (R2 >0.99) Cp5 Ap5 vp

7 Verificación del método (instrumental)
- Patrón verif. (pve); [20-30%]-Analito (a): NAC Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 6.2] Pesar en balanza analítica 0.04 g del patrón de verificación… enrasar a 100 mL con agua (aforado). Por triplicado, tomar 1 mL (pipeta grad.) de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 mL … mpve Va vi va ~[0.04] g =0.1 L =1 mL =25 mL NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material seco * Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Aa1 Ca1 vi Ca ma mpve Va Aai Ca-pvei (%) ? Aa3 Ca3 va mpve : masa de patrón-verif. Va: volumen disolución analito-pve (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) Ca-pvei : concentración de analito en el pve (%); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Cai Cai

8 Análisis de muestra (m) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC)
- Analito (a): NAC (contenido según fabricante) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 6.3] Pesar en balanza analítica el contenido de un sobre o cápsula. Triturar en un mortero. Pesar g de muestra… llevar a 250 mL en un matraz aforado. Por triplicado, tomar 1mL de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 mL… mc mm Va vi ~[0.125] g =0.25 L =1 mL =25 mL NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material seco * Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Aa1 Ca1 Ca ma vi mc mm Va Aai ma-c (mg/unid.) ? Aa3 Ca3 mc : masa de comprimido mm : masa de muestra Va: volumen disolución analito-muestra (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) ma-ci : masa de analito por comprimido (mg/unid.); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) va Cai Cai

9 Calibración del método (instrumental)
- Patrón (p): NAC (puro, desecador) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 5.2] Pesar con precisión en balanza analítica g de N-acetíl-L-cisteína… enrasar a 250 mL con agua. (aforado) mp Vp ~[0.01] g =0.25 L [Ap- 6.1] Tomar alícuotas de la disolución de N-acetíl-L-cisteína de 0 a 5 mL (por ejemplo, 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mL) (pipeta grad.) e introducir en matraces de 25 mL. (aforado) ... vi vp =[0 – 5] mL =25 mL Cpi (mg/L) = mp(g) / Vp(L) x 103(mg) / 1(g) x vi(L) / vp(L) = (mp(g) 103 vi(L)) / (Vp(L) vp(L)) Cálculo ‘Recta de calibrado’: Blanco, ‘Cero’ instrumento * Cp1 Ap1 vi Cp Api mp Vp Cpi(mg/L) mp : masa de patrón Vp : volumen disolución patrón (madre) vi : volumen alícuotas patrón (alícuotas i ) vp: volumen disolución patrones calibrado Cpi : concentración patrones calibrado (mg/L) Api : absorbancia patrones calibrado Informe np=5 (R2 >0.99) Cp5 Ap5 vp

10 Verificación del método (instrumental)
- Patrón verif. (pve); [20-30%]-Analito (a): NAC Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 6.2] Pesar en balanza analítica 0.04 g del patrón de verificación… enrasar a 100 mL con agua (aforado). Por triplicado, tomar 1 mL (pipeta grad.) de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 mL … mpve Va vi va ~[0.04] g =0.1 L =1 mL =25 mL Ca-pvi (%) = 100 ma(g) / mpve(g) = (Cai(mg/L) x va(L) / vi(L) x Va(L) x 1(g) / 103(mg)) / mpve(g) = (Cai(mg/L) va(L) Va(L)) / (vi(L) 10 mpve(g)) Cálculo * Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Aa1 Ca1 vi Ca ma mpve Va Aai Ca-pvei (%) ? Aa3 Ca3 va mpve : masa de patrón-verif. Va: volumen disolución analito-pve (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) Ca-pvei : concentración de analito en el pve (%); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Cai Cai

11 Análisis de muestra (m) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC)
- Analito (a): NAC (contenido según fabricante) Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 6.3] Pesar en balanza analítica el contenido de un sobre o cápsula. Triturar en un mortero. Pesar g de muestra… llevar a 250 mL en un matraz aforado. Por triplicado, tomar 1mL de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 mL… mc mm Va vi ~[0.125] g =0.25 L =1 mL =25 mL ma-ci (mg/unid.) = ma(mg) x mc(g) / mm(g) = (Cai(mg/L) x va(L) / vi(L) x Va(L) ) x mc(g) / mm(g) = (Cai(mg/L) va(L) Va(L) mc(g) ) / (vi(L) mm(g)) Cálculo * Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Aa1 Ca1 Ca ma vi mc mm Va Aai ma-c (mg/unid.) ? Aa3 Ca3 mc : masa de comprimido mm : masa de muestra Va: volumen disolución analito-muestra (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) ma-ci : masa de analito por comprimido (mg/unid.); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) va Cai Cai

12 Ejemplo de Registro de ensayo
(basado en los esquemas y cálculos)