RED DE INFECCIONES DE TRANSMISION SEXUAL RED DE DIAGNOSTICO DE NEISSERIA GONORRHOEAE

LABORATORIOS DE REFERENCIA DE LA PROVINCIA DE SALTA Hospital “Señor del Milagro” - Salta Capital Bioquímica : Guantay Cristina del Valle Mail: hmilagro_micro@hotmail.com te:0387 -4317410 Atención: 7-16HS Hospital “San Bernardo” - Salta Capital Bioquímica: Silva Viviana María Mail: microbiologia_hsb@yahoo.com Tel : 0387-4320300 ATención:7-19HS Hospital “San Vicente de Paul” – Orán Bioquímica : Amador Silvia Mail: laboran@yahoo.com.ar te:03878-421107. Atención: 7-14 HS

DESCRIPCION DE LA INFECCION POR NEISSERIA GONORRHOEAE Características de la enfermedad: Enfermedad infectocontagiosa Tropismo por diferentes mucosas de uretra y endocervix, orofaringea , rectal y otras Vía de Contagio: Transmisión sexual Reservorio: Humano Presentación clínica: Uretritis en hombre, Cervicitis, Enfermedad inflamatoria pélvica y Embarazo Ectópico en mujeres- Conjuntivitis en recién nacidos- Proctitis en ambos sexos.

DESCRIPCION DE LA INFECCION POR NEISSERIA GONORRHOEAE Especificaciones de la bacteria: Diplococo gram negativo Metabolismo oxidativo Utiliza la glucosa sin producir gas Exigente para crecer (Thayer M) Capacidad de generar resistencia a ATB Requiere microaerofilia para crecer

OBJETIVOS: Objetivo General de la Red: Llegar al diagnostico oportuno y eficiente en toda la provincia de Salta de manera de instaurar el tratamiento antimicrobiano adecuado, evitando las complicaciones futuras. Objetivo Especifico: 1- Mejorar el diagnostico de laboratorio. 2- Capacitar personal en toma de muestra . 3- Dar las pautas adecuadas para el transporte y envió de muestras al centro de referencia.

Actividades que realiza la Red de Neisseria Gonorrhoeae Talleres de formación del personal técnico en la toma de muestras Talleres de adiestramiento para bioquímicos de la provincia de Salta para toma de muestra y procesamientos en los lugares que fuera posible. Evaluación de la sensibilidad antimicrobiana. Control de calidad externa: Los laboratorios de referencia provincial participan del Programa de Control de Calidad Nacional del Instituto “Carlos G. Malbran”.

Toma de muestra Abstinencia sexual 48 hs No usar óvulos ni pomadas Suspender tratamiento ATB y esperar 72hs para la toma de muestra. No iniciar tratamiento ATB hasta toma de muestra. Ambos sexos Mujeres Muestra endocervical, vaginal, uretra, recto, glándulas de Bartolini y orofaringe. Varones Retención de orina de tres horas para muestras de uretra. Otras exudado rectal y de orofaringe. Secreción conjuntival Líquido articular Hemocultivo Contenido de cavidad peritoneal, biopsia de endometrio. Otras Muestras

Determinaciones que realizan los laboratorios de referencia Toma de muestras con hisopos tratados con carbón al 1 % o de Dracon. Realización de extendido para coloraciones de Gram, Azul de Metileno y Giemsa. Cultivar en medio Agar sangre, Agar Chocolate y Agar Thayer Martin .en atmosfera de CO2 entre 7-10%. Estudio de colonias típicas. Realización de antibiograma. Denuncia de caso clínico en SIVILA.

Algoritmo Diagnóstico Toma de muestra Uretral- Cervical AZUL METILENO COLORACION DE GIEMSA COLORACION DE GRAM SEMBRADO AGAR CHOCOLATE Y AGAR SANGRE THAYER MARTIN TRICHOMONAS OBSERVACION DE DIPLOCOCOS GRAM NEGATIVO INTRA Y EXTRA CELULAR OBSERVACION DE DIPLOCOCOS GRAM NEGATIVO INTRA Y EXTRA CELULAR NEGATIVO POSITIVO AISLAMIENTO EN THAYER MARTIN OXIDASA IDENTIFICACION BIOQUIMICA SUCEPTIBILIDAD ANTIBIOTICA GRAM SUPEROXOL CATALASA

Envío de muestras al Laboratorio de Referencia Las muestras tomadas en los distintos centros asistenciales deberán ser enviadas lo antes posible la sobrevida de las bacterias es de 6 a 12 hs desde la toma. Antes de colocar las muestras en transportes conviene hacer frotis para coloraciones si es posible Adjuntar la planilla de datos: FICHA DE DATOS (Fig. 1) Nombre y Apellido Fecha de toma de muestra Documento Fecha de nacimiento Sexo Genero Tratamiento antibiótico (SI/NO)

Notificación de Resultados Se enviaran por vía mail o fax desde el centro al derivante . En aquellos casos en los que los centros derivantes envíen sus muestras con notificación a través de SIVILA, los resultados serán enviados por ese mismo medio.

Notificación de Uretritis no gonocócicas Definición: Requiere la exclusión de un examen directo y un cultivo de Neisseria gonorrheae positivo Agentes etiológicos: MAS RELEVANTES (representan el 95%) OTRAS (representan el 5%) Chamidya Trachomatis (80%) Trichomonas vaginalis Ureaplasma urelyticum- Micoplasma hominis (15%) Cándida sp Herpes simplex G.A.M

CHLAMIDYA TRACHOMATIS Bacteria Gram (-), intracelular obligada Ciclo evolutivo único Patologías asociadas: uretritis, cervicitis, EPI, EE, OT, epididimitis, orquitis, alteración de la calidad espermática. Muestras para diagnóstico en el laboratorio de la red Hisopado endocervical Hisopado uretral Hisopado vaginal MUESTRAS

Cuerpos elementales fluorescentes de Chlamydia trachomatis TOMA DE MUESTRAS: Se utiliza un cepillo para la recolección de células infectadas. El mismo debe ser fijado con alcohol. No se requiere medio de transporte. Metodología de diagnostico: Inmunofluorescencia directa con la utilización de anticuerpos monoclonales marcados. Sensibilidad del 80 – 90% Especificidad del 98 – 99% Cuerpos elementales fluorescentes de Chlamydia trachomatis

UREAPLASMA URELYTICUM MICOPLASMA HOMINIS Derivan de bacilos Gram positivos que perdieron la pared y redujeron su genoma. Parásitos obligados con íntima relación huésped-microorganismo, alta adherencia a las células epiteliales y localización intracelular. Existen 14 especies aisladas en el hombre, 12 pertenecen al género Mycoplasma y 2 al género Ureaplasma Colonizan el tracto urogenital. Forman parte de la flora habitual de uretra masculina y de la flora vaginal; por lo tanto hay que determinar un umbral patológico. Patologías asociadas: uretritis NG, litiasis renal, endometritis, salpingitis, vaginosis bacteriana, Embarazadas: abortos y corioamnionitis

Hisopado uretral Hisopado vaginal Esperma MUESTRAS A ANALIZAR Diagnóstico: Se basa en las propiedades des estas bacterias de fermentar la glucosa e hidrolizar la arginina y la urea; como así también la sensibilidad diferencial a antimicrobianos (Eritromicina. Lincomicina, Trimetoprima + Sulfametoxazol. Los métodos diagnósticos deben ser semi-cuantitativos para determinar umbral patológico. Se utilizan equipos comerciales MYCOFAST EVOLUTION 3, ITS2 MICOPLASMA DE BIOMERIEUX. Las muestras requieren medio de transporte específico dependiendo del equipo utilizado.

MYCOFAST EVOLUTION 3: Medio de transporte y galería de trabajo

IST 2 MICOPLASMA BIOMERIEUX: Medio de transporte Recolección de muestras Inoculación en el Laboratorio Medio de transporte posterior a la incubación

GALERIA DE DIAGNÓSTICO Presencia de Ureaplasma sp Test de Sensibilidad (9 antibióticos) Presencia de Micoplasma hominis

CONCLUSIONES: Para estudiar las uretritis no gonoccocicas por Chlamydia deberán enviarse al laboratorio de red las muestras de hisopados fijados con alcohol y con la ficha de datos del paciente (Fig. 1) Para el diagnóstico de Micoplasmas genitales se les deberá proveer de los medios de transporte, los cuales deberán llegar al Laboratorio de Referencia dentro de as 24 hs.