CARACTERIZACIÓN PARCIAL Y BIOTRANSFORMACIÓN DE LIGNINAS PROVENIENTES DE INDUSTRIAS PAPELERAS ESPAÑOLAS Proyecto: Adhesivos Naturales derivados de Lignina para la Industria de Aglomerados de Madera. Ref. PI 1997/038 Subvención: Consejería de Educación del Gobierno Autónomo de Canarias. Departamento de Microbiología y Biología Celular. Universidad de La Laguna.

Miembros del equipo investigador: D. Littman Gonzales Ríos. (Beca MUTI). D. Juan Ramón Hernández Fernaud. (Beca Gobierno Autónomo Canario). Dr. F. Perestelo Rodríguez. Dra. Ana Carnicero Perales. Becarios Prof Titulares Investigador del CSIC: Gabriel de la Fuente Martín Investigador Principal: Dr. Miguel Angel Falcón Sanabria

Empresas suministradoras de efluentes CELESA (Celulosa de Levante, S.A.) ENCE (Empresa Nacional Celulosa Española) SAICA (S. A. Industrias Celulosa Aragonesa)

Metodología para la purificación de la lignina a partir de lejías negras Excluir el pellet 150 gr de residuo sólido ENCE en 1litro de H2O 1 litro de lejía negra CELESA, SAICA Centrifugar a 23.700 g 20 min Sobrenadante acidificado Añadir HCl 1N (pH=2-3) Centrifugar a 23.700 g 20 min Excluir el sobrenadante Triturar la lignina y secado a vacío a temperatura ambiente hasta peso constante. Lavar el pellet con agua ácida (pH 2) CELESA 1.4% SAICA 4% ENCE 17% Rendimiento

Caracterización de la lignina CELESA log Pm Kav 0 0.5 1 4.8 4.1 2.1 B A a b e c Absorbancia Kav

Espectro UV-Visible

Características químicas de la lignina CELESA

Valoración espectrofotométrica y gravimétrica de la degradación de la lignina de CELESA por dos hongos ligninolíticos.

Fusarium proliferatum cultivado con la lignina CELESA log Pm Kav 0 0.5 1 4.8 4.1 2.1 B A 0,1 0,2 0,3 a d b e c Control Absorbancia Problema 0,5 1 Kav

Phlebia radiata cultivada con la lignina CELESA log Pm Kav 0 0.5 1 4.8 4.1 2.1 B A 0,025 0,05 a d b e c Absorbancia Control Problema 0,5 1 Kav

Degradación de las ligninas provenientes de los efluentes de las Industrias papeleras SAICA y ENCE.

log Pm Kav 0 0.5 1 4.8 4.1 2.1 B A 0,1 0,2 0,3 a d b e c Control Phlebia radiata Fusarium proliferatum Absorbancia 0,5 1 Kav Alteraciones en el perfil de elución en la lignina de ENCE incubada con Fusarium proliferatum y Phlebia radiata

Actividades enzimáticas de Fusarium proliferatum cultivado con la lignina de CELESA 0,1 0,2 0,3 0,4 0,015 Actividad específica. 0,01 Lacasa Cit C AAO 0,005 3 5 7 10 12 14 17 19 25 27 28 30 Días

Actividades enzimáticas de Phlebia radiata cultivada con la lignina de CELESA 20 40 60 0,9 Lacasa Cit C 0,6 Actividad específica MnP 0,3 3 5 7 10 12 14 17 19 25 27 28 30 Días 0,3 0,6 0,9 0,03 Cit C MnP LiP 0,02 Actividad específica 0,01 3 5 7 10 12 14 17 19 25 27 28 30 Días

Purificación parcial de Lacasa y de la Aril alcohol oxidasa detectadas en los sobrenadantes de Fusarium proliferatum

Espectro de RMN de la lignina de CELESA tratada con extracto crudo enzimático, conteniendo Lacasa y Aril Alcohol Oxidasa.

Porcentajes de mineralización producidos por Fusarium proliferatum % 14CO2 14C-MWL de paja de trigo 14C-b (cadena lateral)-DHP O14 CH3 -lignina organosoluble 14C-anillo-DHP 14C-MWL de pino canario 14C-lignina -lignocelulosa de haya 14C-lignina-lignocelulosa de pino canario

Mayor homogeneidad en la de distribución de sus pesos moleculares. Aumento del peso molecular de los sustratos tratados con el hongo ligninolítico o sus enzimas. Mayor homogeneidad en la de distribución de sus pesos moleculares. Incrementos en la funcionalidad de las moléculas tratadas