RESULTADOS ESTUDIO DE LA INCIDENCIA DE MUTACIONES DE VEGFR Y PDGFR EN CNMP Y EVALUACIÓN DE SU POTENCIAL PAPEL PREDICTIVO Y/O PRONÓSTICO María R. Atienza 1, Rocío García-Carbonero 1, Ana C. Martín-Rodríguez 2, Sara Alonso-Villanueva 2, Joaquín Iglesias 2, Ángel Castaño 3, Fernando López-Ríos 4, Luis Paz-Ares 1. 1.Unidad de Oncología Integral. Hospital Universitario Virgen del Rocío. 2.Bionostra S.L. 3.Servicio de Anatomía Patológica. Hospital Universitario de Fuenlabrada. 4. Unidad de Anatomía Patológica. Centro Integral Oncológico “Clara Campal” INTRODUCCIÓNOBJETIVOS MÉTODOS CONCLUSIONES La angiogénesis es una de las vías con mas interés terapéutico en CNMP 1. No se han evaluado si existen mutaciones en alguna de las vías implicadas con valor pronóstico. Los objetivos de este estudio son: 1.Identificar mutaciones en los genes que codifican VEGFR-2 y PGDFR-α y β y determinar su incidencia en tumores de pacientes afectos de CNMP. 2.Analizar la correlación entre las mutaciones y diferentes variables clínicas y supervivencia global (SG) para establecer su valor pronóstico. 1.Se seleccionaron muestras tumorales de pacientes con CNMP del Hospital Doce de Octubre, Madrid. 2.Se procedió a la extracción del ADN y se diseñaron cebadores específicos para amplificar los 10 exones que componen el dominio tirosina-quinasa de los tres genes estudiados: VEGFR-2 y PDFGR-α y β. 3.Una vez obtenidos los fragmentos de ADN se determinó su composición nucleotídica mediante secuenciación directa y mediante DGEE para evitar el enmascaramiento de mutaciones. 4.Para la recogida de datos se estimó un tamaño muestral de 80 pacientes. Se establecieron las variables principales: dependientes (SLP y SG) e independientes (mutaciones de VEGFR-2 y PDFGR-α y β) y las covariables (datos demográficos, datos relevantes del tumor y del abordaje clínico). Una vez establecida la incidencia de mutaciones y recogidos los datos clinicos se correlacionó las variables independientes con las dependientes y las covariables. 5.El análisis estadístico se hizo con el programa SPSS 10.0 en entorno Windows . 1.Kerbel RS. Tumor angiogénesis. N Engl J Med. 2008; 358: O´Byrne KJ, Koukourakis MI, Giatromanolaki A et al. Vascular endothelial growth factor, platelet-derived endothelial growth factor and angiogénesis in non- small cell cancer. Br J Cancer 2000;82: Las diversas estrategias antiangiogénicas están dando sus frutos en la clínica. No se han identificado biomarcadores implicados en la angiogénesis con valor pronóstico y/o predictivo de respuesta. - Hemos analizado la existencia de mutaciones en VEGFR-2 y PGDFR-α y β, algunas de las vías más importantes implicadas en la angiogénesis, en CNMP 2 y no hemos detectado ninguna que parezca tener valor pronóstico per se. - No se ha analizado su utilidad como predictores de respuesta, lo que podría ser un interesante campo de investigación. REFERENCIAS - N=112 muestras. - Se identificar cuatro variantes genéticas de los genes PDGFR-α y β y ninguna en el gen VEGFR-2.Las alteraciones identificadas correspondían SNP, single nucleotide polymorphism. - Las mutaciones en exón 12 y 13 de PDGFR-α (SNP 12A y SNP 13A) y en el exón 19 de PDGFR- β (SNP 19B) no producían cambio en el aminoácido. SNP 17A se encontró en una región intrónica. - Covariables: Edad media al diagnóstico 68 años. Varones 96.5% y la mayoría fumadores o ex fumadores. El 79% tenia un estadio precoz. El 60% eran epidermoides y el 25% adenocarcinomas. - SNP 13A y 17A se encontraron en todas las muestras tumorales. SNP 12A se encontró en 18.6% de las muestras y SNP 19B en el 36%. - No se encontró ninguna correlación entre la aparición de estos polimorfismos y el sexo, habito tabaquico, estadio o histología. - Globalmente tampoco se observaron diferencias en la SG en función de la presencia de los polimorfismos. NMedianaSG (3a)SG (5a)P Todos los pacientes m ( )53%49% Estadio TNM  I  II  III  IV m 29.0 m 20.8 m 4.3 m 63% 47% 39% 0% 60% 42% 31% 0% Histología  Ca. Epidermoide  Adenocarcinoma  Ca. Células Grandes m 37.4 m 88.1 m 57% 52% 56% 51% 46% 56% PDGFR B19  Wild Type  SNP m 64.8 m 53% 57% 47% 53% PDGFR A12  Wild Type  SNP m 50.7 m 53% 56% 50% 49% PDGFR exón B19PDGFR exón A12 Wild TypeSNPWild TypeSNP Sexo  Mujer  Varón 0 (0%) 47 (61.0%) 1 (100%) 30 (39.0%) 2 (100%) 43 (72.9%) 0 (0%) 16 (27.1%) Hábito tabáquico  Nunca fumador  Exfumador  Fumador  Desconocido 2 (40.0%) 14 (56.0%) 28(63.6%) 3 (75.0%) 3 (60.0%) 11 (44.0%) 16 (36.4%) 1 (25.0%) 2 (66.7%) 13 (59.1%) 28 (82.4%) 2 (100%) 1 (33.3%) 9 (40.9%) 6 (17.6%) 0 (0.0%) Histología  Adenocarcinoma  Carcinoma epidermoide  Carcinoma células grandes  Carcinoma no microcítico  Carcinoma microcítico  Otros 10 (47.6%) 28(63.6%) 5 (55.6%) 1 (100%) 2 (100%) 11 (52.4%) 16 (36.4%) 4 (44.4%) 0 (0.0%) 11 (64.7%) 25 (75.8%) 6 (85.7%) 1 (100%) 1(50.0%) 6 (35.3%) 8 (24.2%) 1 (14.3%) 0 (0.0%) 1 (50.0%) Grado de diferenciación tumoral  Bien diferenciado  Moderadamente diferenciado  Pobremente diferenciado  Desconocido 12 (52.2%) 8 (100%) 7 (58.3%) 20 (57.1%) 11 (47.8%) 0 (0.0%) 5 (41.7%) 15 (42.9%) 12 (63.2%) 5 (71.4%) 23 (82.1%) 7 (36.8%) 2 (28.6%) 5 (17.9%) Estadio TNM  I  II  III  IV 30 (69.8%) 10 (45.5%) 5 (45.5%) 2 (100%) 13 (30.2%) 12 (54.5%) 6 (54.5%) 0 (0.0%) 29 (80.6%) 10 (62.5%) 6 (75.0%) 0 (0.0%) 7 (19.4%) 6 (37.5%) 2 (25.0%) 1 (100%) Tabla 1. Análisis mutacional de PDGFR exón B19 y A12 y su correlación con distintas variables clínicas An á lisis mutacional de PDGFR ex ó n B19 y A12 y su correlaci ó n con distintas variables cl í nicas Tabla 2. Supervivencia global según el estadio TNM, histología y PDGFR Grafico 1. Supervivencia global en PDGFR B19 wild type y mutado. Gráfico 2. Supervivencia global de PDGFR A12 wild tye y mtado.