PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A. Penacino Fundacion INGEN www.ingen.org.ar Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos www.adn.ac Sociedad Latinoamericana de Genética Forense www.slagf.org

Qué parte del ADN estudia la Genética Forense? Sólo NO CODIFICANTE (junk dna) porque: 1) Hay mas regiones variables. 2) Cuestiones éticas. Existen alrededor de 3.000.000 de sitios variables en nuestro genoma.

Ejemplo de sitio variable «NN» Sitio de adhesión (constante en todos los humanos) Sitio de adhesión (constante en todos los humanos) Alelo 1 Alelo 2 Unidad de Repetición (ej.: ACTG)

ESCENA DEL CRIMEN

MUESTRAS

OTRAS MUESTRAS

PCR: Reaccion en cadena de la polimerasa SE copia muchas veces un fragmento de ADN

ADN Se repite 30 veces el Ciclado Se desnaturalizan las cadenas Reasociación de Primers Síntesis de la nueva cadena

Secuenciador de adn

Ejemplo de sitio variable «NN» Sitio de adhesión (constante en todos los humanos) Sitio de adhesión (constante en todos los humanos) Alelo 1 Alelo 2 Unidad de Repetición (ej.: ACTG)

Kits con 21 o mas marcadores

Marcadores de cromosoma masculino

Kits con 23 o mas marcadores

Analizando un caso criminal. Material Indubitado de la Víctima. Material Subungueal Tomado de la Víctima Coincidencia total Tejido Dactilar de la Víctima. Sangre del Sospechoso1. Sangre del Sospechoso 2

CALCULOS ESTADISTICOS. indice y probabilidad de paternidad CALCULOS ESTADISTICOS * indice y probabilidad de paternidad. * indice y probabilidad de coincidencia

Marcadores de cromosoma X Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers Dye Markers  6-FAM Amelogenin  DXS10103  DXS8378 DXS7132 DXS10134 BTG DXS10074  DXS10101  DXS10135 BTY DXS7423 DXS10146 DXS10079 BTR HPRTB DXS10148

Marcadores de cromosoma X

Rastreo de Línea de Herencia Materna: El ADN Mitocondrial (ADNmt)

Mitocondria *Central de energía celular. *100 a 1000 mitocondrias por célula. *Información Genética Propia.

Genoma Mitocondrial *Circular, covalentemente cerrado. *16.569 pares de bases. *D-Loop o Región de Control no codificante (variable).

Secuenciación del ADNmt Herencia Materna Alto Número de Copias Regiones Variables ubicadas en el D-loop

COMO LLEGAMOS HASTA AQUÍ COMO LLEGAMOS HASTA AQUÍ? Los primeros intentos: metodo de southern blot (1985-1991)

GRAN AVANCE: PCR (1991) LOS METODOS MANUALES

Los secuenciadores menos o mas «automaticos» (1996- Actualidad) ABI 377 ABI 310

Atentado a la Embajada de Israel 1992 Atentado a la Embajada de Israel

Toma de muestras del atentado

Métodos en uso en 1992

Métodos innovadores (basados en PCR)

Atentado a la mutual israelita AMIA 1994 Atentado a la mutual israelita AMIA

Atentado a la AMIA Vista general

Atentado a la AMIA. Muestras

Atentado a la AMIA. Resultados

Atentado a la AMIA. Resultados

Atentado a la AMIA. Resultados

www.ingen.org.ar La realización de estudios de paternidad gratuitos o a bajo costo para personas de escasos recursos, y los análisis de evidencias forenses a bajo costo (50% del arancel normal) a través de convenios con los Poderes Judiciales provinciales. Particulares: laboratorios propios en Monte Grande. Poderes Judiciales: laboratorio del Colegio de Farm. y Bioquímicos, gestionado por la Fundación.

www.ingen.org.ar 2) La capacitación de profesionales que se dedican a los análisis de ADN mediante cursos y jornadas, con especial referencia a la solución de errores y dificultades que se presentan en el laboratorio. Organización y/o patrocinio de Congresos –como COLTIC y TIAFT-, Jornadas y cursos de perfeccionamiento para profesionales.

www.ingen.org.ar 3) Puesta en marcha de laboratorios oficiales mediante la modalidad “llave en mano”, los cuales prestan servicios al Poder Judicial local. - Estrategia: alta calidad de resultados al menor costo posible. En San Luis (finalizado), Misiones (en ejecución) y Santiago del Estero (en ejecución). Una decena de provincias en etapa de consulta.

www.ingen.org.ar 4) Estudio de metodologías de análisis de ADN orientadas al reemplazo de los costosos reactivos importados; y desarrollo de nuevas tecnologías. Asesoramiento sobre la optimización de recursos y uso de reactivos accesibles en el mercado local. Investigación de nuevas tecnologías: fenotipado forense (proyecto).

2015? 2017? 2020?

Nuevos desarrollos: otros conceptos -INDELS-

Otra tecnología: Microarreglos de ADN

Microarreglos de ADN

Microarreglos de ADN

Fully Integrated Portable DNA Analyzer

Fully Integrated Portable DNA Analyzer (1) Recolección de la muestra (2) Extracción del ADN (3) PCR (4) Electroforesis (5) Análisis de STRs. TODO EL PROCESO EN 25 MINUTOS!.

-Forensic Phenotyping- HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO -Forensic Phenotyping-

HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO Analysed tooth of General Władysław Sikorski (World War II). Władysław Sikorski indeed had blue eyes and blond hair

FENOTIPADO FORENSE: últimos hallazgos publicados OJOS AZULES , PIEL y CABELLOS CLAROS - mutación de los Genes OCA1 y OCA2- (oculocutaneous albinism) ↓ melanina : Hum Genetics CABELLOS ROJOS y PIEL CLARA - mutación del Gen MC1R ↑feomelanina : Science Polimorfismo Gen MC1R (Melanocortin 1- receptor) - 30 variantes alélicas de la eumelanina a través de las enzimas TYRP1, TYRP2, SILV y la proteína P COLOR DE OJOS , PIEL y PELOS - variantes alélicas de los genes SLC24A4 y IRF4 COLOR DE PELO - variante cercana al gen KITLG COLOR DE OJOS y PECAS - dos variantes del gen TYR PECAS - una variante asociada a 6p25.3 PELO OSCURO, PIEL COLOR OLIVA y COLOR DE OJOS - polimorfismos en el gen MATP (Membrane associated transporter protein)

FIN Sociedad Latinoamericana de Genética Forense: www.slagf.org Más información sobre análisis de ADN: Sociedad Latinoamericana de Genética Forense: www.slagf.org Laboratorio: www.adn.ac Fundación INGEN: www.ingen.org.ar