UNIVERSIDA TECNICA DE AMBATO CIENCIAS DE LA SALUD LABORATORIO CLINICO ALUMNA: ROBALINO GABRIELA SEMESTRE: CUARTO «B» DOCENTE: GEOVANNY BONIFAZ CÁTEDRA HEMATOLOGÍA II

TINCIÓN DE Giemsa

FUNDAMENTO: Colorante de Romanowsky, con componentes básicos que tiñen las estructuras ácidas y componentes ácidos que tiñen las estructuras básicas. TINCIÓN:  giemsa diluida 1/10 agua destilada.

MUESTRA: sangre capilar fresca o venosa anticoagulada MUESTRA:  sangre capilar fresca o venosa anticoagulada. El coagulante de elección es la heparina o el EDTA. USO: Colorante utilizado en la búsqueda diagnóstica de parásitos intestinales como Giardia y de hemoparásitos como Leishmania y Plasmodium. 

TÉCNICA Extender la muestra en un porta limpio. Dejar secar al aire. Fijar con metanol 4-5 minutos y decantar el exceso de metanol pasado ese tiempo. Cubrir con Giemsa recién diluida 1/10 (5 gotas Giemsa por cada 45 de agua destilada) durante 25 minutos. Retirar exceso de colorante y lavar. Dejar secar.

PMN Neutróflo (arriba dcha) y PMN Eosinófilo (abajo izqda) RESULTADOS PMN Basófilo PMN Neutróflo (arriba dcha) y PMN Eosinófilo (abajo izqda)

PMN Neutrófilo (arriba) y linfocito (abajo) RESULTADOS Monocito PMN Neutrófilo (arriba) y linfocito (abajo)

Resultados Neutrófilo en cayado o en banda Monocito (arriba) y linfocito (abajo)

TINCIÓN DE WRIGHT

FUNDAMENTO Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.

MUESTRA: Sangre capilar por punción de un dedo, o venosa procedente de punción venosa y anticoagulada con EDTA. TINCIÓN: Colorante wright Eosina-azul de metilo 0.8g/l Alcohol metílico 1l Buffer Giordano pH 7

TÉCNICA Realizar en una placa un extendido de la muestra. Dejar secar. Cubrir el portaobjetos con 1-2mL de colorante wright Tras 1 minuto añadir un volumen igual de buffer giordano pH 7 soplar para homogenizar hasta permitir que la mezcla adquiera un brillo verde metálico. Dejar actuar de 3-6 minutos. Lavar con agua corriente, dejar secar a temperatura ambiente. Leer al microscopio con objetivo 40x o 100x y aceite de inmersión.

Resultado Linfocito Basófilo

Resultado Eosinófilo Neutrófilo

TINCIÓN DE AZUL CRESIL BRILLANTE

FUNDAMENTO RECUENTO DE RETICULOCITOS: Son eritrocitos no nucleados inmaduros, que contienen RNA y que continúan sintetizando hemoglobina después de la pérdida del núcleo.

MUESTRA: sangre venosa , en casos excepcionales sangre capilar MUESTRA: sangre venosa , en casos excepcionales sangre capilar. La técnica ha de realizarse a ser posible antes de que transcurra 2 horas de la extracción, con un máximo de 24 horas. TINCIÓN:  Azul de Cresil Brillante 0.5% CLoruro de Sodio al 0.85% 99.5%

TÉCNICA Se mezcla en un tubo tres gotas de azul de cresil brillante y tres gotas de sangre, se incuban durante 15 minutos a 37 grados, se hacen dos extendidos en lámina y se miran con objetivo de 100 X. Se cuentan aproximadamente 1.000 hematíes y se saca el promedio de reticulocitos.

% Reticulocitos = nº de reticulocitos observados X 100 CÁLCULO: Se realiza el recuento de reticulocitos en 10 campos, en los cuales, haya aproximadamente 100 hematíes/campo. Seguidamente calculamos la proporción de reticulocitos en dichos campos % Reticulocitos =  nº de reticulocitos observados    X  100 nº de hematíes contados ValORES DE REFERENCIA Adultos 0.5 a 2% Recién nacidos 3 a 6%