Preparaciones para Examen con el Microscopio de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste de Fases. La obtención de preparaciones adecuadas para el examen microscópico puede conseguirse mediante dos técnicas generales, en las que los microorganismos pueden ser examinados en estado viviente y sin teñir ó después de la aplicación de colorantes para que resalten con más claridad:   a) Observación Vital: hace posible la observación de los organismos vivos suspendidos en un líquido b)  La Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.

Observacion Vital q Preparaciones Húmedas  a)  Observación Vital: hace posible la observación de los organismos vivos suspendidos en un líquido   q       Preparaciones Húmedas q       Preparaciones de Gota pendiente q       Tinciones Vitales -La morfología de las espiroquetas se altera mucho cuando se desecan y tiñen. -Para determinar la movilidad de las baterias. -Para determinar cambios citológicos durante la división celular. -Ofrecen ventajas para la observación con microscopía de Campo Oscuro y Contraste de Fases.

Preparación de Gota pendiente Zona excavada Anillo de Vaselina Asa de Inoculación Gota de Cultivo bacteriano Cubreobjetos Cubreobjetos Gota de Cultivo Vaselina Preparación de Gota pendiente

Preparación del Frotis: Películas a)  Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.Los pasos a seguir son:   q       Confección del frotis ó película   q       Secado q     Fijación   q       Coloración - Producto líquido - Cultivo en medio sólido - Sangre Por calor Con alcohol metílico, formol u otros fijadores

Forma de Realizar una Extensión de Sangre

Coloración q       Coloración: es el proceso de teñir artificialmente los microorganismos con colorantes ó reactivos para facilitar su estudio microscópico.   Colorante Grupo Cromóforo-         Grupo Auxócromo      Mordiente-    Soluciones acuosas ó diluídas en alcohol.

Tipos de Colorantes Colorantes Naturales. Colorantes Artificiales. Los Colorantes pueden ser: Colorantes Naturales.   Colorantes Artificiales. Según el tipo de grupo auxócromo, los colorantes artificiales se dividen en: A)   Acidos . Grupo auxócromo: COOH, SO3H . B )  Basicos . Grupo auxócromo: NH2 ó N(CH3 )2 C)   Neutros D) Indiferentes

Métodos de Coloración Los métodos de Coloración son:   a) Coloraciones Simples: fucsina fenicada diluída, azul de metileno, cristal violeta y safranina. b)  Coloraciones Selectivas ó Estructurales: para cápsulas, gránulos metacromáticos, esporas, flagelos, etc. en bacterias. c) Coloraciones diferenciales : Tinción de Gram, Tinción de Ziehl Neelsen d) Coloraciones Panópticas : Tinción de Giemsa, Tinción de Mae- Grenwald-Giemsa Tinción de Wright.

CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA FIJACIÓN CRISTAL VIOLETA TRATAMIENTO CON IODO DECOLORACIÓN CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA