Vilmarie Figueroa Nieves Victor Torres Tania N. Pérez Del Río

Presentación del tema: "Vilmarie Figueroa Nieves Victor Torres Tania N. Pérez Del Río"— Transcripción de la presentación:

1 Vilmarie Figueroa Nieves Victor Torres Tania N. Pérez Del Río
Laboratorio # 3 Tinción Gram, simple, negativa, cápsula, catalasa y oxidasa Identificación de cocos Vilmarie Figueroa Nieves Victor Torres Tania N. Pérez Del Río

2 Tinción Gram y Tinción Simple

3 Tinción Simple Materiales: Mechero “Loop” de inoculación
Un cultivo de 24 horas de cualquier bacteria Azul de metilo Cristal violeta Carbol fuchsin Mechero “Loop” de inoculación Bandeja de tinción Microscopio Papel de lente Porta objeto

4 Conceptos Básicos de Tinción
Visualización de los microorganismos se dificulta por: Tamaño Transparencia Decoloración

5 Conceptos Básicos de Tinción
Químicamente la tinción es un compuesto orgánico: Benceno Compuesto orgánico sin color Cromóforo Auxocrómo Imparte color al Benceno Grupo químico que permite la ionización al grupo cromógeno

6 Conceptos Básicos de Tinción
Técnicas de tinción Tinción Simple Tinción Gram Morfología: cocos, bacilos y espirilos. Arreglo: cadenas, agrupaciones, pares y tétradas. Grupos: gram+ y gram- Visualización: flagelados, cápsulados, esporas y núcleos.

7 Conceptos Básicos de Tinción
Fijación de las bacterias Coloque una o dos  gotas de el agua en el centro de la laminilla. 1.

8 Conceptos Básicos de Tinción
Fijación de las bacterias Con un movimiento circular, riega la suspensión en la laminilla aproximadamente del tamaño de 10¢. 2.

9 Conceptos Básicos de Tinción
Fijación de las bacterias Transfiere una pequeña cantidad del inóculo bacterial del cultivo a la gota de agua. Riega el mismo de forma circular aproximadamente del tamaño de 5¢. 3.

10 Conceptos Básicos de Tinción
Fijación de las bacterias Dejar que se seque el frotis. Aguantando la laminilla por un extremó, rápidamente pásala por el mechero de dos a tres veces. 4.

11 Tinción Simple Procedimiento: Preparar el frotis de la bacteria.
Poner una laminilla en la bandeja de tinción e inundar el frotis con los indicadores de tinción.

12 Tinción Simple Se utiliza un sólo reactivo colorante:
Carbón fuchsin: 15 a 30 segundos Cristal Violeta: 20 a 60 segundos Metíl Azul: 1 a 2 minutos Echerichia coli Bacillus cereus Staphylococcus aureus

13 Tinción Simple Resultados Metil Azul Cristal Violeta Carbón Fuchsin
Dibujo Organismo Morfología celular: -Forma -Arreglo Color ____________

14 Tinción Simple Resultados Cilíndrico Esférico Espiral Helicoidal

15 Tinción Gram

16 Tinción Gram La mas importante tinción utilizada en bacteriología es la tinción Gram, nombrado por el Dr. Christian Gram. Este divide las células bacterianas en dos grandes grupos, Gram positivo (+) y Gram negativo (–), el cual es un gran instrumento para la clasificación y diferenciación de los microorganismos.

17 Tinción Gram Objetivos:
Demostrar las bases químicas y teóricas para diferencial el procedimiento de tinciones. Demostrar las bases químicas de una tinción. Diferenciar entre dos principales grupos de bacterias: Gram + y Gram -

18 Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas:
Principios: Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas: Gram Positivas Gram Negativas

19 Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas:
Principios: Bacterias Gram Positivas y Gram Negativas:

20 Peptidoglucano: Principios: Copolímero formado por secuencias de:
N-acetil-glucosamina Acido N-acetilmurámico Por enlaces β-1,4

21 Bacterias Gram Positivas
Principios: Bacterias Gram Positivas Bacillus anthracis

22 Bacterias Gram Negativas
Observaciones Bacterias Gram Negativas Escherichia coli

23 Tinción Gram 1 Se utiliza un sólo reactivo colorante: 2 3 7 6 5 4
Cristal Violeta: 1 minuto Iodo: 1 minuto Alcohol: 10 a 15 segundos Safranina: 45 segundos 2 3 7 6 5 4

24 Tinción Gram

25 Tinción Gram Resultados E. Coli B. Cereus S. aureus ____________
Dibujo Organismo Morfología celular: -Forma -Arreglo Color ____________

26 Bacterias Gram Negativas
Observaciones Bacterias Gram Negativas Proteus vulgaris

27 Serratia marcescens GRAM -

28 Bacterias Gram Positivas
Observaciones Bacterias Gram Positivas

29 Micrococcus luteus GRAM +

30 Spirillum

31 Spirillum