Aportes a la Fruticultura La Biotecnología en el INTA: Aportes a la Fruticultura Ing. Agr. Patricia Arnozis Formosa, octubre 2011 1

Como se organiza el INTA en nuestro país: - 15 Centros Regionales 47 Estaciones Experimentales > 300 Agencias de Extensión 6 Centros de Investigación 22 Institutos de Investigación

marcadores moleculares Biotecnología Selección asistida por marcadores moleculares Transformación Genética de especies Interacción Huésped-Patógeno 3

Marcadores Moleculares : son fragmentos específicos de ADN que pueden ser identificados en el genoma 4

Se utilizan para Obtener las huellas genómicas de individuos, variedades, poblaciones Analizar la estructura y diversidad de poblaciones naturales de mejoramiento y bancos de germoplasma Establecer relaciones filogenéticas Construcción de mapas genéticos Selección asistida

Genómica Estructural y Funcional de cultivos Resistencia a plagas y enfermedades Estudios de diversidad Caracteres de calidad Contenido de aceite: Contenido de proteínas Contenido de lignina y densidad de madera: Otras características precocidad senescencia tardía brotado temprano resistencia a frío 6

Transformación Genética Consiste en introducir en el genoma de una especie fragmentos de ADN provenientes de otras diferentes para conferirle propiedades especiales 7

Transformaciòn Genética Se busca, generar resistencia a enfermedades o factores abióticos. Trocitos de plantas (explantos) se cultivan in vitro (condiciones estériles y n edio de cultivo adecuado) para generar callos. Estos callos pueden ser transformados a través del uso de Agrobacterium tumefaciens o de biobalística. A través de diferentes ensayos histoquímicos se verifica la transformación de los tejidos. 8

Transformación Genética Adquisición de protocolos de transformación a partir de embriones maduros de soja con At

Regeneración de plantas enteras Maíz bombardeo selección Embriones inmaduros Callos friables Regeneración de plantas enteras Embriogénesis y germinación

Estudios de interacción Huésped-Patógeno Estudio de los mecanismos de defensa a enfermedades virales, en plantas modelo y en algodón

SOJA Genómica : Proyectos Cooperativos Regionales Plataforma SOUTHNOMICS BiotecSur Proyecto de Soja Stress abiótico: sequía Stress biótico: Roya asiática y Macrophomina 12

Forestales Mejoramiento asistido de Eucalyptus y Pinus taeda con marcadores moleculares QTL y mapeo de asociación en E. grandis and E. globulus Desarrollo de marcadores moleculares funcionales para Eucalyptus Identificación por marcadores de genotipos comerciales de Sauce americano Proyecto: INTA, ANPCYT-CABBIO, BIOTECSUR SEPCYT 13

FRUTALES ¿Qué estamos haciendo? Se trabaja en la puesta a punto de: nuevas técnicas para detección de patógenos sistémicos nuevos métodos de extracción

FRUTALES En avellano, nogal y pecán Se trabaja en la detección de virus por doble cadena de RNA (ds RNA) En arándano , zarzamora y frambuesa Se están ajustando técnicas de RT-PCR y se aplican en conjunto técnicas serológicas (DAS-ELISA)

En CITRUS: Se están evaluando a campo porta injertos transgénicos potencialmente resistentes a Tristeza, provenientes del Centro de Protección Vegetal y Biotecnología de Valencia

FRUTALES Análisis de Germoplasma libre de virus En Carozo Porta injertos y cultivares Mejoramiento de durazno, EEA San Pedro En Pepita Evaluación de cultivares de manzano Avellano, Nogal y Pecán selección de plantas libres de virus

En Citrus Se analizan copas y porta injertos saneados por presencia de HLB EEA Concordia

En VID Se analizan Variedades de Torrontés Riojano; Tempranillo y Bonarda para virus más comunes. EEA Mendoza

En PEPITA Se ha puesto a punto una técnica que permite detectar la presencia de virus, sin reactivos específicos para cada uno Permite un screening rápido para presencia o ausencia de virus

Facilidades disponibles para secuenciamiento y genotipado - Electroforesis capilar (ABI secuenciadores): Fragmentos marcados con diferentes cromóforos marcadores SSR y SNPs Columnas dHPLC- DNA : marcadores SNPs GoldenGate-Veracode / Illumina: SNPS marcadores 94 individuos analizados con 384 marcadores por vez Instituto de Biotecnología, INTA Castelar

GRACIAS!!!! parnozis@correo.inta.gov.ar