Universidad de Buenos Aires Facultad de Farmacia y Bioquímica Cátedra de Química Biológica Patológica Introducción al Trabajo Práctico Enfermedades Lisosomales Comisión turno tarde
Enfermedades Tay Sachs Sandhoff Variante AB
x MU MU
NAC Glu MU HexA- HexB MU NAC Glu + pH 4.4 pH 11.3
Reacción 1 disco de sangre seca eluido en Buffer citrato fosfato 22mM pH 4.4 50ul Sustrato 3mM (4MU-NacGlu) en buffer Citrato fosfato 22mM pH 4.4 100ul 2 horas a 37ºC Etilendiamina 0.13M pH 11.3 300ul
Se recomiendan duplicados de muestras y lecturas con pseudoduplicados. Disco de sangre Buffer C/F Sustrato Incubación EDA stop Vol de lectura fluo Fluorescencia 1- x si/no 50ul 100ul 2h 37º 300ul 200ul 2- x … Tener en cuenta incluir la curva de calibración y los controles necesarios. Se recomiendan duplicados de muestras y lecturas con pseudoduplicados.
Actividades de la primera clase: Toma de muestra Organizar el protocolo para armar una curva de calibración Cálculos Búsqueda en Pubmed