MÉTODOS DE ESTUDIO DE LAS CÉLULAS
PROBLEMAS: Las células son pequeñas: procariotas 1-2µm, eucariotas 5-20µm. Las células son incoloras y translúcidas. Las células eucariotas están compartimentizadas. Disponibilidad.
Definición de microscopio: RAE: Instrumento óptico destinado a observar objetos extremadamente diminutos, haciendo perceptible lo que no es a simple vista. Instrumento óptico formado por un sistema de lentes que permiten la ampliación de la imagen para la observación de objetos muy pequeños.
Principales características de un microscopio Amplificación M.O. 500-1000x M.O. inmersión 2000x M.E. 100.000x Poder de resolución: capacidad para mostrar separados dos puntos muy cercanos. Depende de la calidad de las lentes, de la longitud de onda de la luz empleada y del índice de refracción del medio (aire 1,0; aceite 1,5) En los microscopios ópticos: 300 nm; inmersión: 200 nm.
Anton van Leeuwenhoek Robert Hooke
FRACCIONAMIENTO CELULAR Conjunto de métodos y técnicas que tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en un determinado componente celular, ya sea éste un orgánulo (mitocondrias, núcleos, peroxisomas, ..) una fracción de membrana, complejos multiproteicos (citoesqueleto de actina, microtúbulos, poros nucleares, etc..), etc... Todo proceso de fraccionamiento subcelular tiene dos etapas : rotura de las células o tejidos para obtener un lisado celular (o tisular) en el que la fracción deseada se encuentre en condiciones adecuadas para su purificación. separación de la fracción deseada del resto de componentes de la célula o del tejido.
CROMATOGRAFÍA
ELECTROFORESIS
CULTIVOS CELULARES
DIFRACCIÓN DE RAYOS X
ISÓTOPOS RADIACTIVOS