Análisis de Sobrevida en Leucemia Linfática Crónica (LLC) según expresión de ZAP-70 y CD 38 Jarchum G, Rodríguez C, Arévalo M, Lavarda M, Rizzi M, Minoldo D, Balseiro M, Basquiera A, Dubersarsky C, Risser R, Laplagne A, Bisio L, Cobos A. PaneroC.,DeLeon A. Gallo M, Heller V. GRUPO DE ESTUDIO DE ENF. LINFOPROLIFERATIVAS SANATORIO ALLENDE CORDOBA HOSPITAL NACIONAL CLINICAS CORDOBA HOSPITAL CORDOBA HOSPITAL PRIVADO DE CORDOBA CENTRO HEMATOLOGICO DE LEON SERV . HEMATOLOGIA OULTON

FACTORES CON PRONOSTICO DESFAVORABLE EN LEUCEMIA LINFATICA CRONICA TRADICIONALES ESTADIOS CLINICOS AVANZADOS RAI/BINET TIEMPO DE DUPLICACION LINFOCITARIA LACTICO DEHIDROGENASA B2- MICROGLOBULINA CD23 SOLUBLE TIMIDIN KINASA PATRON DIFUSO DE INFILTRACION DE MEDULA RESPUESTA AL TRATAMIENTO BIOMARCADORES CONTEMPORANEOS del(11q) y del(17p) POR FISH ESTADO MUTACIONAL DE REGION VARIABLE DE CADENAS PESADAS DE GENES DE IG USO DE GEN VH3.21 ZAP-70(>20% positivo) CD38(>30% positivo)

VALOR PRONOSTICO DE ESTADO MUTACIONAL, ZAP-70 Y CD38 EN PACIENTES CON LLC Rassenti, Blood, 2008,1923

Rassenti, Blood, 2008,1923

INTRODUCCIÓN Receptor Linfocito-B ZAP-70: proteína asociada a la cadena zeta del receptor TCR en LT Subrogante de estado mutacional de linfocitos LLC

RELACION FUNCIONAL ENTRE ZAP-70 Y CD38 EN LLC FOSTAMATINIB DEAGLIO, BLOOD, AUG 2006,1053

DEAGLIO, BLOOD, AUG 2006,1053

Objetivos Determinar sobrevida libre de progresión (SLP) y sobrevida global(SG) en pacientes con LLC según expresión de ZAP-70, CD 38 y la combinación de ambos

Material y Métodos Estudio retrospectivo multiinstitucional ZAP-70 y CD 38 por citometría de flujo central , valores de corte para positividad 20% y 30%, respectivamente. Sobrevida libre de progresion (SLP) Tiempo desde el diagnostico a progresion de la enfermedad: Aparicion de adenopatias ,cambio de estadio Tiempo de duplicacion linfocitaria < de 6 meses Sintomas generales Sobrevida global Tiempo desde el diagnostico hasta muerte Analisis Estadistico SG y SLP se analizaron por el método de Kaplan- Meier y la comparación entre los grupos se estableció por Log-rank test. El modelo de regresión de COX fue usado para evaluar el efecto de las covariables (ZAP-70 y CD38) como factor pronóstico independiente en SLP. MÉTODOS Análisis de ZAP-70 y CD38 por Citometría de flujo El análisis de ZAP-70 se realizó en muestras frescas de sangre periférica, por triple marcación directa con los siguientes Ac monoclonales: CD5-FITC ( Immunotech), CD19-PCy5 ( Immunotech), permeabilización y posterior marcación con anti ZAP-70 ( clon 1E7.2 Caltag) conjugado con PE. La expresión de ZAP-70 se evaluó en la población linfoide-B CD19/CD5+ en base a la expresión de las células T de la muestra ( valor de corte  20%). La detección de CD38 se realizó por triple marcación directa con : CD5-FITC/ CD38-PE/ CD19-Pcy5 . El % de positividad se evaluó en la población CD19/CD5+ con respecto a un control isotípico que se corrió con cada muestra.(se utilizaron 2 valores de corte  30% y  7%).

Resultados N: 138 pacientes: H 29 M 26 Edad media: 64 a rango:36 a 89 Estadio Rai: 0/I: 80%; II, III y IV: 20%. Seguimiento medio: 37 meses. Rango:1 a 187 meses

RESULTADOS N (%) SLP HR p SG ZAP70+ 16.5m 4.6 0.0007 6.8 a 7.49 0.07 42 (35) 16.5m 4.6 0.0007 6.8 a 7.49 0.07 ZAP70- 79 (65) 121m No alcanzada CD38 + (>30%) 26(19) 17m 2.7 0.03 6.7a 1.5 0.7 CD38 - 108 (78) 101 m

RESULTADOS SOBREVIDA LIBRE DE PROGRESION Según ZAP 70+ (>20%) y CD38+ (>30%) 1000 2000 3000 4000 5000 0,00 0,25 0,50 0,75 1,00 Días ZAP 70 P 0.0007 CD38 p 0.03 ZAP70- CD38- CD38+ ZAP70+

RESULTADOS SOBREVIDA GLOBAL Según ZAP 70+ (>20%) y CD38+ (>30%) 1,00 CD38- 0,75 CD38+ 0,50 ZAP 70 p 0.07 CD38 p 0.7 ZAP70+ 0,25 0,00 2000 4000 6000 8000 Días

Análisis Multivariado de Sobrevida Libre de Progresión Variable N° Pacientes Hazard Ratio (95% IC) Valor P ZAP 70+ (>20%) 42 5,10 (1,53 a 17,01) 0,008 CD38+ (>30%) 26 1,48 (0,47 a 4,62) 0,4985 Análisis Multivariado de Sobrevida Global Variable N° Pacientes Hazard Ratio (95% IC) Valor P ZAP 70+ (>20%) 42 8,57 (0,79 a 91,8) 0,0759 CD38+ (>30%) 26 0,45 (0,02 a 8,47) 0,5917

RESULTADOS Análisis según Subgrupos % SLP (Meses) SG (Meses) A ZAP70-CD38- (60) 121 No alcanzada B ZAP70+CD38+ (14) 17 81,6 C ZAP70+CD38- (18) 16.4 116 D ZAP70-CD38+ (7) 55

RESULTADOS Sobrevida Libre de Progresión. Subgrupos B vs A= HR 5,33 ; p=0,0039 C vs A= HR 4,42; P=0,005 B vs C= HR 1,18; p=0,8947 D vs A= HR 2,86; p=0,2242 Sobrevida 1,00 B D A=ZAP-/CD38- A 0,75 C D=ZAP-/CD38+ 0,50 0,25 B=ZAP+/CD38+ C=ZAP+/CD38- 0,00 1000 2000 3000 4000 5000 Días

CONCLUSIONES DETERMINACION DE ZAP 70 Y CD38 TIENEN VALOR PRONOSTICO EN ANALISIS UNIVARIADO PARA SLP EN PTES CON LLC. EN ANALISIS MULTIVARIADO SOLO ZAP 70 TIENE SIGNIFICACION EN LOS GRUPOS DISCORDANTES ZAP 70 ES SUFICIENTE PARA DEFINIR MAL PRONOSTICO

MUCHAS GRACIAS