FluSpec: A Simulated Experiment in Fluorescence Spectroscopy (FluSpec: un simulador de experimentos en espectroscopia de fluorescencia) Ángela Catalina Franco Becerra Angie Tatiana González Arenas Edwin Hernando Tarazona Suescún ANALÍTICA II EFRÉN MUÑOZ UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS ESCUELA DE QUÍMICA TUNJA 2015

ESPECTROFOTOMETRÍA DE FLUORESCENCIA Fluorescencia: Es un proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la absorción de radiación electromagnética y al relajarse al estado basal liberan el exceso de energía en forma de fotones. Espectrofotometría de Fluorescencia: también llamada espectrofotometría es un tipo de espectroscopia electromagnética, la cual analiza la fluorescencia de una muestra. La cual consiste en medir la cantidad de energía radiante que absorbe una molécula en razón a una longitud de onda incidente.

INTRODUCCIÓN En la espectroscopia de fluorescencia, las especies son las primeras en ser excitadas mediante la absorción de un fotón, desde su estado electrónico fundamental, a uno de los diversos estados vibratorios en el estado electrónico excitado. La molécula luego vuelve a declinar a uno de los varios niveles de vibración del estado electrónico fundamental emitiendo un fotón en el proceso. Como las moléculas pueden decaer en cualquiera de los varios niveles vibratorios en el estado fundamental, los fotones emitidos tendrán entonces diferentes energías, y de este modo diferentes frecuencias.

RESUMEN El paquete de software (programa de computador) FluSpec es una herramienta educativa que contiene una serie de experimentos en espectroscopia de fluorescencia que se pueden simular bajo ciertas condiciones. El procedimiento que se debe seguir para cada uno de los experimentos a simular esta contenido también en el paquete de datos del programa y de la misma forma se encuentra un paquete con los resultados que se pueden obtener con dicho software.

FUNDAMENTO EXPERIMENTAL Para la simulación de experimentos en espectroscopia de fluorescencia se utilizó el programa o software educativo FluSpec que contiene una serie de experimentos que son posibles ser desarrollados mediante un proceso de simulación. En primera instancia se reconoce el programa a utilizar, y se hace un recorrido y explicación acerca de dicho software. Luego se asigna a uno de los experimentos que eran posibles simular. En este sentido, el experimento que se va a desarrollar consiste en una simulación del espectro de espectroscopia de fluorescencia que se obtendría para el Sulfato de quinina al ser sometido a radiación de UV-VIS con una concentración nula de NaCl. Se investigó entonces, el efecto de la excitación de longitud de onda sobre el espectro de emisión de excitación a 280, 300, 375 y 390 nm; de este modo se registraron los valores de longitud de onda para los cuales en el espectro se presentaba un mayor valor de intensidad de luz.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

CONCLUSIONES En la espectroscopia de fluorescencia, primero se excita la muestra mediante la absorción de un fotón de luz, desde su estado electrónico basal a uno de los distintos estados vibracionales del estado electrónico excitado. Las colisiones con otras moléculas causan que la molécula excitada pierda energía vibracional hasta que alcanza el estado vibracional más bajo del estado electrónico excitado. El programa o software FluSpec resulta una herramienta muy útil para entender el fenómeno de fluorescencia que presentan algunos compuestos, pues en él se pueden simular diversos experimentos y valorar diferentes muestras bajo ciertas condiciones. En la caso de el sulfato de quinina se puede afirmar que a una longitud de onda de excitación de la luz de 300 nm se presenta la mayor intensidad de emisión de luz por parte de dicho compuesto. En un experimento típico, se miden las diferentes frecuencias de luz fluorescente emitida por una muestra, manteniendo la luz de excitación a una longitud de onda constante. A esto se le llama espectro de emisión. Un espectro de excitación se mide mediante el registro de una serie de espectros de emisión utilizando luz de diferentes longitudes de onda, como se hizo en este caso.

BIBLIOGRAFÍA FREIFELDER. D. Técnicas de Bioquímica y Biología molecular. Editorial REVERTÉ S.A. Primera edición, España 2003, Pág. 459 – 462 http://www.espectrometria.com/espectrometra_de_fluorescencia http://www.espectrometria.com/tipos_de_espectrometra HOLLER, WEST, SCOOG, Fundamentos de Química Analítica, editorial REVERTÉ S.A. Cuarta edición, Barcelona - España, 2001, Pág. 614 - 616

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