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Imagen de una célula humana en mitosis, en la que los microtúbulos se muestran en verde (formando el huso mitótico), los cromosomas en azul en el ecuador del huso y los cinetocoros en rojo.
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Homo sapiens 2n=46
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ASTER MICROTÚBULOS DEL HUSO MITÓTICO
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ASTERES
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EL ADN PUEDE SER DAÑADO POR DIFERENTES MECANISMOS
ENERGÍA LIBERADA POR RADICALES LIBRES DE OXIGENO QUE SE PRODUCEN NORMALMENTE O BIEN PRODUCIDOS POR ENERGÍA IONIZANTE (RADIACIÓN) PUEDE ROMPER ENLACES FOSFODIESTER ENTRE LAS FIBRAS DE LA DOBLE HÉLICE DE ADN. AGENTES QUÍMICOS QUE PUEDEN MODIFICAR LAS BASES PURÍCAS O PURINAS (BASES NITROGENADAS). ALTERACIONES ENZIMÁTICAS DE ENZIMAS QUE CONTROLAN LA REPLICACIÓN DEL ADN
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ACTIVIDADES 1: Extraídas del A. Allot y D. Middendorff, 2014. Biology
ACTIVIDADES 1: Extraídas del A. Allot y D. Middendorff, Biology. Cambridge. Pág. 54 EN LA MICROGRAFÍA EL ADN SE HA TEÑIDO DE AZUL, LOS CENTRÓMEROS DE ROSA FLUORESCENTE Y LOS TELÓMEROS DE VERDE. RESPONDER: DEDUZCA EL ESTADO DE LA MITOSIS DANDO UNA RAZÓN PARA SU RESPUESTA (3 PUNTOS) EN LA MICROGRAFÍA DE UNA CÉLULA EN INTERFASE LOS CENTRÓMEROS ESTÁN SOBRE UN LADO DEL NÚCLEO MIENTRAS QUE LOS TELÓMEROS ESTÁN SOBRE EL OTRO LADO. EXPLIQUE. (2) UNA ENZIMA LLAMADA TELOMERASA ACTÚA SOBRE LA LONGITUD DE LOS TELÓMEROS AGREGANDO MUCHAS SECUENCIAS DE ADN REPETITIVO. ESTA ENZIMA ESTÁ SOLAMAENTE ACTIVA EN LAS CÉLULAS GERMINALES QUE DARAN LUGAR A LAS GAMETAS. CUANDO EL ADN ES REPLICADO DURANTE EL CICLO CELULAR DE LAS CÉLULAS SOMÁTICAS EL ADN FINAL DE LOS TELÓMEROS NO ES REPLICADO POR LO CUAL LOS TELÓMEROS SE ACORTAN EN CADA DIVISIÓN. PREDIGA LAS CONSECUENCIAS DEL ACORTAMIENTO DE LOS TELÓMEROS PARA UNA PLANTA O UN ANIMAL (3)
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ACTIVIDAD 2 CÁLCULO DEL INDICE MITÓTICO:
En la siguiente diapositiva se presentan 4 micrografías de células en mitosis en Allium cepa (cebolla). Suponiendo que las mismas son réplicas del mismo experimento (ver la última diapositiva para conocer el protocolo), A. Seleccione 30 células al azar en cada micrografía (piense un método para seleccionar un área de conteo que le sirva de control y mantenga el método en todas las micrografías). Calcule el porcentaje de células en mitosis y el porcentaje de células en cada fase para cada réplica. presente sus resultados en una misma tabla (datos brutos y procesados) junto con los promedios y desvíos. Realice los gráficos correspondientes mostrando los resultados. Lea el protocolo correspondiente al ensayo y escriba un informe planteando, pregunta de investigación, variables, hipótesis, resultados
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Micrografías del experimento de mitosis
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Materiales y Métodos Se obtuvieron cebollas (Allium cepa) y el agua mineral de un supermercado de Pilar. Las cebollas fueron trasladadas al laboratorio el mismo día de la compra donde se cepillaron, lavaron y pesaron utilizando una balanza NUTRI 100 (± 1g). Se seleccionaron cebollas de 150 g ±10g. Se incubaron cinco cebollas con agua mineral Villavicencio ). El volumen de agua de incubación fue de 100 cm3, medido con probeta volumétrica. Se midió, previa a la incubación, la longitud inicial de 5 raíces en cada una de las cinco cebollas de cada tratamiento. La longitud tomada para el muestreo inicial se fijó en 0,2 cm de crecimiento inicial. Las raíces seleccionadas fueron las cercanas al centro de la cada cebolla y se cortaron las raíces adyacentes para no confundir el seguimiento al finalizar la observación. A continuación se utilizaron 5 vasos de precipitados por tratamiento, y se colocaron 100 ml de agua mineral cada vaso junto a una cebolla. (Figura 1) y a su vez los vasos fueron colocados en un baño térmico con un termómetro para evitar cambios bruscos en la temperatura de incubación durante los días siguientes. La incubación fue por 72 horas y al finalizar se retiraron las cebollas del agua, se registró la longitud final de las raíces seleccionadas y se cortaron enteras de cada cebolla. Se seleccionó una raíz de cada cebolla a la que se le efectuó la tinción (en total 5 raíces) y posteriormente se observaron al microscopio tomándose una micrografía de las mitosis en cada caso. Las raíces fueron colocadas en tubos de ensayo junto con 2 ml de acido clorhídrico 1N y 2 cm3 Carnoy (3:1 etanol- ácido acético). Los tubos de ensayo se colocaron en baño maría a 60º C por 15 minutos, al cabo del cual las raíces fueron retiradas del baño y eliminado el HCl y el Carnoy, con tres lavados con agua destilada. En los mismos tubos, se colocaron 3 gotas de orceina por 15 minutos. Con una pinza se tomaron las raíces y se colocaron sobre el portaobjetos. Se cortó la punta de cada una y se cubrió con cubreobjetos, haciendo presión, de manera de disgregar la raíz. Luego se observó al microscopio a 100X
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Materiales y Métodos Figura 1- Dispositivo utilizado para hacer la incubación. En el vaso de precipitados se coloca agua mineral o agua de red, según el tratamiento que corresponda, y se incuba las cebollas por 72 horas.
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