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“APOPTOSIS”
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“Apoptosis vs Necrosis”
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Características de las células apoptóticas
Reducción del volumen celular Compactación de las organelas Condensación de la cromatina Degradación internucleosomal del ADN Exposición de fosfatidil-serinas en el lado externo de la membrana plasmática Formación de “cuerpos apoptóticos”
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Extrusión de la célula apoptótica
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Apoptosis en células derivadas de epitelio uterino
Línea celular RENTROP tratadas en medio con 1% de libre de esteroides durante 24 h A: Control B: RU M C: R M Pecci et al,J.B.C. 1997,272:11791
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Tinción con DAPI
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TUNEL
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Ensayo de Anexina V
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C. elegans.... el principio.... ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)
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Vías principales de apoptosis en mamíferos
Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770
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Caspasas cysteine-dependent aspartate-specific proteases
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Tabla de caspasas
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Vías principales de apoptosis en mamíferos
Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770
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Activación por receptores de muerte
ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)
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Eventos mitocondriales
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Efecto de la dexametasona sobre la liberación del citocromo C
Marcador Mitocondrial Citocromo C Superposición de imágenes Control Dexa 10-8 M
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ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)
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Proteínas de la familia de Bcl-2
Gross et al,Genes Dev. 1999,13:1899
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Miembros de la familia de Bcl-2
Los niveles relativos de los miembros anti/pro-apoptóticos determinan el destino celular. Los miembros antiapoptóticos se localizan en membranas. Los proapoptóticos principalmente en citoplasma y se translocan a la mitocondria ante un estímulo de muerte. Regulan la liberación desde la mitocondria de proteínas que inducen la apoptosis.
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Vías principales de apoptosis en mamíferos
Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770
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ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)
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Translocación de GFP-Bax
Biochem. J. (2002) 367 (169–178)
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(A) GFP–Bax-transfected cells, stimulated with staurosporine
(A) GFP–Bax-transfected cells, stimulated with staurosporine. (B) GFP–Bax and GFP were immunoprecipitated and analysed for GFP–Bax, VDAC and ANT. The non-immunoprecipitated VDAC and actin in the supernatant (SN) were also measured. (C) Shows the selectivity of the anti-ANT polyclonal and anti-VDAC monoclantibodies used on mitochondrial extracts. Biochem. J. (2002) 367 (169–178)
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Posibles mecanismos de acción de los miembros de la familia de Bcl-2
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La dexametasona aumenta los niveles de Bax y disminuye los de Bcl-XL en timocitos
in vitro in vivo Control Dexa Control Dexa Bax Bax 1 2,35 1 1,6 Bcl-2 Bcl-2 1 0,9 1 1,1 Bcl-XL Bcl-XL Bcl-XC 1 1,02 1 ---
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Regulación por IAPs
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Vías principales de apoptosis en mamíferos
ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)
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