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Publicada porFaramundo Cuenca Modificado hace 10 años
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TEMA 3 ORGANIZACIÓN DEL MATERIAL HEREDITARIO EN PROCARIOTAS
GENÓFORO DE LOS VIRUS -Características generales -Virus ADN-fago GENÓFORO BACTERIANO -Cromosoma bacteriano -ADN extracromosómico: PLÁSMIDOS -clasificación -utilización tecnología ADN recombinante
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GENÓFOROS VIRALES VIRIÓN (diámetro 10-400 nm)
organización simple y acelular ausencia DNA y RNA en el mismo virión incapacidad reproducirse de forma independiente y llevar a cabo división celular DNA/RNA nucleocápside
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GENÓFOROS VIRALES
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VIRUS HEP. B VIRUS ARN-ADN Tipo de Molécula Tipo de Hélice
Tipo de virus según huésped. Familia de virus Lineal Sencilla Animal Retrovirus (Ribodesoxivirus) - Sarcoma de Rous (Pollo) - Leucemia de Rauscher (ratón) - HIV (virus de inmunodeficiencia humana causante del SIDA) VIRUS ARN-ADN Tipo de Molécula Tipo de Hélice Tipo de virus según huésped. Familia de virus Circular Doble (gap) Animal Hepatitis B VIRUS HEP. B
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GENÓFOROS VIRALES
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FAGO lisis bacteria ciclo lisogénico infecta E. coli cápside icosaédrica, DNA doble hélice lineal con ~ pb extremos cohesivos: extremos 5’ monocatenarios (12 nucleótidos de secuencia complemenaria)
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GENÓFORO BACTERIANO ADN doble hélice circular
tamaño variable (0,1 a 8 x109 dalton) E. coli (1.100 m longitud, 3,2 x105 pares nucleótidos) Material genético NUCLEOIDE
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GENÓFORO BACTERIANO ADN altamente organizado
Plegamiento formando DOMINIOS SUPERENRROLLAMIENTO
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GENÓFORO BACTERIANO Nº dominios en E. coli variable (12 a 80 dominios)
Composición: ADN dúplex condensado + proteínas básicas
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GENÓFORO BACTERIANO PROTEÍNAS BÁSICAS DETECTADAS EN BACTERIAS Proteína
Composición Contenido por células Semejanza con eucariontes HU Dímero subunidades y de d. dímeros Histona H2A H Dímero subunidades idénticas de d. dímero Histona H2B IHF Subunidad de d. Subunidad de d. Desconocido Desconocida H1 Subunidad de d. copias HLP1 Monómero de d. copias P Sububnidad de d. Protaminas
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-Fis -Dan (DNA-binding protein under anaerobic conditions) = YgiP (Nucleic Acids Research, 2010, Vol. 38, No –3618)
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ADN EXTRACROMOSÓMICO PLÁSMIDOS
ADN doble y circular Replicación autónoma; información no vital Posibilidad de integración en cromosoma principal bacteriano EPISOMA - secuencias inserción y transposones Tamaño variable: a pb ADN bacteriano plásmidos
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TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F) ENTRE BACTERIAS CONJUGACIÓN
FUNCIÓN PLÁSMIDOS TRANSFERENCIA FACTOR FERTILIDAD (F) ENTRE BACTERIAS CONJUGACIÓN F+ F-
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FUNCIÓN PLÁSMIDOS Hfr factor F integrado en genóforo bacteriano transferencia de marcadores cromosómicos a F- con elevada frecuencia transferencia desde punto fijo y en un orden determinado (integración específica factor F)
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FUNCIÓN PLÁSMIDOS plásmido E. coli resistente a ampicilina (ampr) y tetraciclina (tetr)
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ESTIRPE A ESTIRPE B cys+, leu+, thr+ cys-, leu-, thr--
medio mínimo con: treonina leucina sin suplementos medio mínimo con leucina y treonina
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A.- Medio mínimo con leucina y treonina:
-cys+, leu+, thr+ -cys+, leu-, thr- B.- Medio mínimo con: - TREONINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu+, thr- LEUCINA: cys+, leu+, thr+ Y cys+, leu-, thr+ MEDIO MÍNIMO: cys+, leu+, thr+
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
comparación secuencias ADN de genes evolución -rasgos característicos gen (nº intrones, posición) -estructura producto proteico gen FUNCIÓN modificación parte de secuencia ADN de un gen y reinserción CONSTRUCCIÓN ADN RECOMBINANTE
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
DIGESTIÓN ADN (enzimas de restricción) corte ADN en fragmentos para su clonación cortes escalonados ADN recombinante
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
clonación gen específico
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
diseño plásmidos como vectores de clonación de ADN
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TECNOLOGÍA “ADN RECOMBINANTE”
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