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MUTAGÉNESIS POR PCR Curso de Biología Molecular y Genómica Enero 2016
Dra. Sandra Moreira Ramos
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Reacción en cadena de la polimerasa
En la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la DNA polimerasa no tiene la actividad de remover los partidores (5' → 3' exonucleasa).
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Basado en lo anterior, el PCR puede ser utilizado para el diseño de nuevas estrategias de clonamiento y mutación sitio-dirigida
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Se pueden agregar sitios de restricción mediante partidores
De esta manera cualquier secuencia amplificada por PCR podrá ser clonada en cualquier vector que contenga sitios de restricción
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Mutagénesis sitio dirigida
Los partidores pueden ser diseñados complementarios a la secuencia blanco excepto la posición a mutar. De esta forma, los productos amplificados contendrán la mutación.
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De esta forma, mediante PCR se podrán realizar las modificaciones que el investigador desee utilizando partidores específicos
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