HOSPITAL MONTE NARANCO

Presentación del tema: "HOSPITAL MONTE NARANCO"— Transcripción de la presentación:

1 HOSPITAL MONTE NARANCO
Proyectos de I+D+i HOSPITAL MONTE NARANCO

2 HOSPITAL MONTE NARANCO
DESARROLLO DE UNA PRUEBA RÁPIDA PARA EL DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES OCULARES ( ) HOSPITAL MONTE NARANCO

3 Hospital Monte Naranco
DESARROLLO DE UN SISTEMA PARA EL DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE LA QUERATITIS INFECCIOSA Diciembre Diciembre 2010 Hospital Monte Naranco

4 MICROORGANISMOS PRESENTES EN MUESTRAS OCULARES
AMEBAS: Acanthamoeba HONGOS: Candida Aspergillus Fusarium BACTERIAS: Staphylococcus Pseudomonas aeruginosa Streptococcus pneumoniae Propionibacterium acnes Acinetobacter Corynebacterium Enterobacterias VIRUS: Adenovirus Herpes simple Citomegalovirus Papiloma Virus Varicela Zoster

5 EXTRACCIÓN DE ADN DE MUESTRAS OCULARES
+ Extracción 1h 30 min 106μm ADN Vortex 10 minutos 3 horas en DTT + pronasa a 56oC BIOPSIAS

6 AMPLIFICACIÓN DE ADN MEDIANTE PCR CONVENCIONAL
ADN DIANA rDNA: 18S, 16S

7 AMPLIFICACIÓN DE ADN MEDIANTE PCR
ADN DIANA rDNA: 18S, 16S PCR- RFLP PCR

8 AMPLIFICACIÓN DE ADN MEDIANTE PCR
ADN DIANA mRNA: 18S, 16S VENTAJAS: La amplificación de cualquier microorganismo presente en la muestra en uno o dos tubos con pocos primers. Incremento de la eficiencia. INCONVENIENTES: Prácticamente cualquier material utilizado puede tener restos de ADN Los enzimas utilizados durante la extracción/amplificación tienen restos de ADN

9 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
1.- DETECCIÓN MEDIANTE SYBR Green I

10 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
1.- DETECCIÓN MEDIANTE SYBR Green I

11 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
1.- DETECCIÓN MEDIANTE SYBR Green I VENTAJAS: No se necesita diseñar sondas especificas y es mucho más barato INCONVENIENTES: Si el amplicón es pequeño es difícil distinguir el pico perteneciente al amplicón de otros que pueden aparecer por formación de dímeros de los primers

12 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
2.- DETECCIÓN MEDIANTE SONDAS Taqman

13 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
2.- DETECCIÓN MEDIANTE SONDAS Taqman

14 PCR A TIEMPO REAL O PCR CUANTITATIVA
2.- DETECCIÓN MEDIANTE SONDAS Taqman VENTAJAS: Es mucho más específico INCONVENIENTES: Es necesario el diseño de sondas específicas para el microorganismo y es mucho más caro.

15 FORMULARIO PARA LA PETICIÓN DE PRUEBAS

16 KIT PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS OCULARES

17 Proyectos de I+D+i DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES OCULARES
Diagnóstico en tiempo real de la queratitis infecciosa