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Un método de investigar recombinantes para fragmentos de DNA insertados. Al emplear el plásmido pBR322, se inserta un fragmento de DNA en el sitio de PstI.

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1 Un método de investigar recombinantes para fragmentos de DNA insertados. Al emplear el plásmido pBR322, se inserta un fragmento de DNA en el sitio de PstI único. Esta inserción altera la codificación de gen para una proteína que proporciona a la bacteria huésped resistencia a ampicilina. Por consiguiente, las células que portan el plásmido quimérico ya no sobrevivirán cuando se colocan en una placa con un medio de sustrato que contiene este antibiótico; por tanto, la sensibilidad diferencial a la tetraciclina y ampicilina puede usarse para distinguir clonas de plásmido que contienen un inserto. Un esquema similar que se fundamenta en la producción de una fusión dentro de cuadro de un DNA recién insertado que da por resultado un fragmento peptídico capaz de complementar una forma N-terminalmente truncada, inactiva, de la enzima β-galactosidasa, un componente del operón lac (figura 38-2), permite la formación de colonias de color azul-blanco sobre placas de agar que contienen un colorante hidrolizable por medio de β-galactósido. Las colonias positivas para β-galactosidasa son de color azul; esas colonias contienen plásmidos en los cuales se insertó con éxito un DNA. De: Genética molecular, DNA recombinante y tecnología genómica, Harper. Bioquímica ilustrada, 30e Citación: Rodwell VW, Bender DA, Botham KM, Kennelly PJ, Weil P. Harper. Bioquímica ilustrada, 30e; 2016 En: Recuperado: October 22, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved


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