Agustina B. Lino; Juan Manuel Fernández; Antonio Desmond McCarthy

Presentación del tema: "Agustina B. Lino; Juan Manuel Fernández; Antonio Desmond McCarthy"— Transcripción de la presentación:

1 DESARROLLO Y ESTUDIO DE MEMBRANAS POLIMÉRICAS CON ESTRONCIO PARA REGENERACIÓN DE TEJIDO ÓSEO.
Agustina B. Lino; Juan Manuel Fernández; Antonio Desmond McCarthy Introducción: La ingeniería de tejido óseo (ITO) utiliza diversos materiales para generar matrices o scaffolds que sirvan de soporte en la reparación ósea. Estudios tanto in vitro como in vivo han demostrado que el estroncio (Sr) disminuye la resorción ósea inhibiendo al actividad osteoclástica, al mismo tiempo que promueve la formación ósea aumentando la proliferación y diferenciación osteoblástica. En este trabajo se diseñaron membranas de mezcla compatibilizada PCL-PFIP (poli-di-isopropil fumarato), con distintas cantidades de Sr. De esta forma, se pretende obtener membranas con buena capacidad osteogénica [Fernández 2010; Fernández, 2011] y que actúen como un sistema de liberación de droga. Las matrices Mezcla PCL-PFIP (75:25p/p) (figura 1) fueron obtenidas por el método de casting [Fernández, 2010; Fernández, 2011]. Básicamente, los polímeros fueron disueltos en cloroformo y vertidos en caja de Petri, eliminando el solvente por evaporación total. Así se prepararon las siguientes membranas, Mezcla, Mezcla + 1 %p/p Sr y Mezcla + 5 %p/p Sr. La biocompatibilidad de las membranas fue estudiada utilizando células progenitoras de medula ósea de ratas (CPMO) obtenidas del canal diafisario medular de ratas Wistar. Se determinaron marcadores de diferenciación osteoblástica, producción de Colágeno tipo I por Sirius Red, actividad de fosfatasa alcalina (ALP) y expresión génica por RT-PCR del factor de trascripción Runx2, y de la enzima ALP. Para este fin las CPMO se plaquearon sobre las matrices y cultivaron 14 días en medio de diferenciación osteogénico. Utilizando un Espectrofotómetro de Absorción Atómica (AA Shimadzu) se evaluó la liberación de Sr al medio cultivo durante 14 días. CPMO PCL-PDIPF PCL-PDIPF PCL-PDIPF (0% Sr) (1% Sr) (5% Sr) Fig. 2: Liberación de Sr en el medio de cultivo a partir de M+1% Sr y M+5% Sr durante 14 dias. Proliferación (MTT) Colágeno ALP RUNX2 ALP Fig. 1: Imágenes SEM de Mezcla, Mezcla + 1% Sr y Mezcla + 5% Sr a 1000X (columna izquierda) y 2500X (columna derecha). Fig. 3: Proliferación celular sobre membranas con y Sr. Fig. 4: Expresión génica por RT-PCR de Runx2 y ALP; Actividad enzimática de ALP. Fig. 5: Síntesis de Colágeno de las CPMO sobre las membranas con y sin Sr. Conclusiones: El biomaterial empleado fue una mezcla compatibilizada de poli-caprolactona (PCL) y poli-diisopropil-fumarato (PDIPF), previamente caracterizado por nosotros. No se observa una liberación de Sr al medio de cultivo. El agregado de 1% Sr a la membrana mejoró su osteocompatibilidad in vitro, mientras que 5% Sr fue inhibitorio para el metabolismo celular.