Viceministerio de Desarrollo Estratégico de los Recursos Naturales Dirección General de Diversidad Biológica Módulo de capacitación en Bioseguridad de.

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1 Viceministerio de Desarrollo Estratégico de los Recursos Naturales Dirección General de Diversidad Biológica Módulo de capacitación en Bioseguridad de los Organismos Vivos Modificados - OVM” Eliana Yglesias Gálvez Especialista en Bioseguridad 29-30/09/2015

2 PRINCIPIOS Y CONCEPTOS UTILIZADOS EN LA PRODUCCIÒN DE OVM
Detección de OVM Conceptos básicos Cómo se hace un OVM

3 ¿PORQUÉ LOS OVM? Necesidad de tener cultivos que hagan un mejor uso del agua y fertilizantes, tengan una mayor resistencia a las plagas y enfermedades; tolerantes a herbicidas, y que puedan almacenar una mayor cantidad de reservas y nutrientes en los componentes de la cosecha (semillas, frutos, etc.) Esto se traduce con un mayor beneficio (en términos, por ejemplo, de durabilidad o valor nutritivo) o ambos. Otros OVM derivados de plantas, animales, microorganismos y virus, se han modificado para propósitos de elaboración de medicamentos, mejora ambiental como la bio-remediación y, recientemente; aplicaciones industriales.

4 CONCEPTOS BÁSICOS Ingeniería genética
Conjunto de metodologías y técnicas dirigidas a lograr la modificación del material hereditario de una especie

5 Biotecnología Biotecnología (CBD)
Toda aplicación tecnológica que utilice sistemas biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para usos específicos. Biotecnología Moderna ( PCB) Aplicación de: Técnicas in vitro de ácidos nucleicos, incluidos el ácido desoxirribonucleico (ADN) recombinante; y la inyección directa de ácidos nucleicos en las células u organelos, ó La fusión de células más allá de la familia taxonómica que supera las barreras fisiológicas naturales de la reproducción, y que no son técnicas utilizadas en la reproducción y selección tradicional (Protocolo de Cartagena)

6 Organismo vivo modificado (OVM)
Cualquier organismo vivo que posea una combinación nueva de material genético que se haya obtenido mediante la Biotecnología Moderna (Protocolo de Cartagena)

7 Estructura del gen y expresión génica

8 Estructura del gen y expresión génica
gen 1 gen 2 gen 3 gen gen gen 3 mRNA DNA Proteína

9 Evento La combinación de la versión exacta del gen y su ubicación eventual dentro del genoma se denomina “evento”.

10 Diseño de las construcciones genéticas
¿CÓMO SE HACE UN OVM? Diseño de las construcciones genéticas

11 Complejidad de una construcción genética
Gen introducido Fuente del gen Producto Función amy797E Gen sintético derivado de Thermococcales spp. alpha-amylase, enzima termoestable mejora la producción de bioethanol al incrementar la termoestabilidad de la enzima amilasa usada en la degradación del almidón pmi  * Escherichia coli Phosphomannose enzima Isomerase (PMI) Metaboliza la manosa y permite una selección positive para recuperar las plantas transformadas ecry3.1Ab Forma sintética del gen Cry3A y del gen Cry1Ab de Bacillus thuringiensis Delta endotoxina, chimeric (Cry3A-Cry1Ab) confiere resistencia a coleópteros y lepidópteros mcry3A Forma sintética del gen cry3A de Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis modified Cry3A delta-endotoxin Resistencia a coleópteros cry1Fa2 forma sintética del gen cry1F gene derivado de Bacillus thuringiensis var. aizawai modified Cry1F protein Resistencia a lepidópteros cry1Ab Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Cry1Ab delta-endotoxin pat Streptomyces viridochromogenes phosphinothricin N-acetyltransferase (PAT) enzyme Tolerancia a glufosinato mepsps Zea mays modified 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS) enzyme Tolerancia a glifosato

12 Métodos de transformación genética en plantas
Mediada por Agrobacterium Por biolística (“Gene Gun”) Por electroporación Por Microinyección

13 Mediada por Agrobacterium

14 Mediada por biolística (Gene Gun)
Emplea partículas de oro recubiertas de ADN, precipitadas en la superficie interna de un disco de plástico, y aceleradas mediante un flujo de helio presurizado

15 Mediada por electroporación

16 Microinyección

17 MICROINYECCIÓN

18 Detección Detección de OVM
Métodos basados en ADN, para la detección de genes o partes de las construcciones Métodos basados en proteínas, para la detección de los productos de expresión de los genes

19 Detección Métodos basados en proteínas
Métodos cualitativos y cuantitativos: Tiras reactivas Western Blot ELISA

20 Detección Métodos basados en ADN

21 Detección Métodos basados en ADN

22 Detección Métodos basados en ADN
Construcción Génica Promotor (señal de inicio) Terminador (señal de terminación) Gen codificante de una nueva característica 1 2 3 4