Influenza A en Cerdos y Patos de Traspatio en Guatemala Fase 1: Abril a Agosto 2013 Fase 2: Noviembre 2013 a Octubre 2014 Maria L. Müller 1, Lucia Ortiz.

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1 Influenza A en Cerdos y Patos de Traspatio en Guatemala Fase 1: Abril a Agosto 2013 Fase 2: Noviembre 2013 a Octubre 2014 Maria L. Müller 1, Lucia Ortiz 1, Danilo Alvarez 1, Patricia Herrera 1, Ana S. Gonzalez-Reiche 1,2, Ana L. Barrios 1, Miguel A. Descalzo 1, Jorge Jara 1, Eduardo Azziz-Baumgartner 3, S. Cornelia Kaydos-Daniels 3, Celia Cordon-Rosales 1 (manuscrito en preparación) 1 Universidad del Valle de Guatemala, Guatemala, Guatemala 2 University of Maryland, College Park, Maryland, USA 3 Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, Georgia, USA Financiado por CDC US a través del acuerdo cooperativo No. 1U01GH000028 y 5U01GH001003 Reunion SARInet, mayo 2016

2 Estudios Previos de Virus de Influenza A (IAV) Animal en Guatemala Patos silvestres (Gonzalez-Reiche et al. 2012) – Detección de IAV en aves acuáticas migratorias ~500 muestras/año – % positivos por rRT-PCR 10- 30% (2006-2010) – Aislados de baja patogenicidad: H3N8, H5N3, H5N4, H7N9, H8N4 y H11N2 del pato aliazul (Anas discors) – Virus de Guatemala similares genéticamente a los de Norteamérica

3 Estudios Previos de Virus de Anfluenza A (IAV) Animal en Guatemala Cerdos (Gonzalez-Reiche et al. Sometido a EID, 2016; Müller et al. En preparación) – Dos encuestas a nivel nacional (granjas semitecnificadas y traspatio) 2010, 2011 Evidencia de influenza porcina de origen humano en cerdos % positivos rRT-PCR 16% y 12%, respectivamente – Dos encuestas transversales en traspatios de departamentos con vigilancia de IAV en humanos, 2012, 2014 % positivos rRT-PCR 10-19% % positivos ELISA 0-9%

4 Interfaz Humano-Animal La interfaz humano-animal podría favorecer la emergencia de nuevos subtipos antigénicos de IAV que pueden ser una amenaza a los humanos. Objetivo de este estudio: confirmar la circulación local y prevalencia de IAV en cerdos y patos domésticos de traspatios rurales cercanos a humedales

5 Sitio y Población de Estudio Aldeas Candelaria y Monterrico Costa Sur de Guatemala. Ubicadas dentro de humedales tropicales Hotspot de migración de aves acuáticas Aquí se ha detectado IAV previamente en patos migratorios (Gonzalez-Reiche 2012) Hogares presentan traspatios con animales domésticos.

6 B) y D) Animales domésticos en los traspatios A) y C) Humedales tropicales en la costa sur de Guatemala A B C D

7 Colecta de Muestras y Detección de IAV 5 encuestas mensuales Colecta de muestras (patos, cerdos ) Muestras positivas: Subtipos H5/H7 (patos), pN1 (cerdos) y aislamiento viral en U. Maryland Muestras positivas: Inhibición de la hemaglutinación H3N2/pH1N1 (cerdos) Muestras de suero: ELISA de bloqueo (IDEXX/Biochek) Muestras de hisopados: rRT-PCR gen matriz (Spackman et al. 2002; Slomka et al. 2010)

8 Prevalencia Acumulada Serológica y por rRT-PCR de IAV – Colectamos 377 muestras de cerdos y 499 de patos ELISA: Positivas: 1% de muestras de cerdo y 3% de muestras de patos Un cerdo y cinco patos tuvieron >1 suero positivo en meses consecutivos Cerdo positivo a pH1N1 por HI rRT-PCR: Positivas: 3% de muestras de cerdo y 3% de muestras de patos Ninguno de los animales muestreados se seroconvirtió – No se logró el aislamiento de las muestras positivas por rRT-PCR. – Ninguna muestra positiva a H5/H7 Norteamericanos

9 Conclusiones de Fase 1 Encontramos evidencia de la circulación de IAV – Las prevalencias detectadas están dentro de los rangos reportados en otros traspatios o sistema s rústicos de crianza de animales. La respuesta antigénica contra pH1N1 en cerdos puede sugerir transmisión entre humanos y cerdos, como se ha documentado anteriormente.

10 Segunda Fase del Estudio: Noviembre 2013 – Octubre 2014 Encuestas transversales en mismas comunidades Traspatios escogidos aleatoriamente, prevalencia esperada 10% En cada traspatio se muestreó 1 de cada 2 cerdos y 1 de cada 7 patos En cada visita los cerdos y patos fueron seleccionados por conveniencia, pudiendo muestrear un mismo animal en diferentes meses Misma metodología de procesamiento de muestras

11 Resultados Preliminares Aún procesando muestras Mensualmente se muestrearon un promedio de 32 traspatios con cerdos y 46 con patos Colectamos un total de 669 muestras de cerdos y 1090 de patos. Los resultados serológicos están limitados por el potencial re-muestreo del mismo individuo

12 Investigaciones Futuras Es necesario evaluar la transmisión entre especies de IAV y evaluar la implementación de un sistema integrado de vigilancia humano y animal (doméstico/silvestre) Se necesitan estudios adicionales para entender la epidemiología e implicaciones en salud para la implementación de sistemas de vigilancia local y estrategias de prevención de influenza A

13 Agradecimientos CES-UVG Jorge Paniagua Lorenzo Elías Arnoldo Pérez Ramón Medrano Silvia Ramírez Nancy Zamora Carmen Yoc Patricia Hernández Astri Alvarado Angélica Román Elda González Giovanni Pineda Alexander Ramírez Otros colaboradores Ministerio de Agricultura y Ganadería División Influenza, US CDC Universidad de Maryland (Dr. Daniel R. Pérez) Autoridades y Residentes de la comunidades de las Aldeas Monterrico y Candelaria

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15 Referencias bibliográficas 1.Couacy-Hymann E, et. al (2012) Emerg Infect Dis, 18, 1446-1452. 2.Curd, E. et. al (2011), doi:10.1016/j.jviromet.2011.05.033 3.Gonzalez-Reiche A, et. al (2012) PLoS ONE 7(3): e32873. doi:10.1371/journal.pone.0032873 4.Henning J, et. al (2011) Prev Vet Med, 101, 229-240. 5.Horm S, et. al (2012) Influenza Other Respi Viruses, 6, 442-448. 6.Khatun A, et. al (2013) BMC Vet Res, 9, 196. 7.Spackman E, et. al (2002). J. Clin. Microbiol. 40(9): 3256-3260 8.Slomka M, et. al (2010). Influenza and Other Respiratory Viruses, 4: 277–293. doi: 10.1111/j.1750-2659.2010.00149.x 9.Tolf C, et. al (2013) PLoS ONE 8(4): e61201. doi:10.1371/journal.pone.0061201 10.Saavedra-Montanez M, et. al (2013) Influenza Other Respi Viruses, 7, 827-832 11.Tinoco Y, et. al (2015) Influenza Other Respir Viruses, 23, 12329. 12.Wille M, et al (2014). Veterinary Research, 45:53

16 Seguimiento Serológico de Animales Positivos a IAV por ELISA Las muestras positivas se encuentran por encima de las líneas punteadas.