BIOLOGIA MOLECULAR Integrantes: Silvia Ivonne Arzola Rodríguez Alejandrina Vega Vega Luis Felipe Delgado Bustillos David Hernandez Quezada.

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1 BIOLOGIA MOLECULAR Integrantes: Silvia Ivonne Arzola Rodríguez Alejandrina Vega Vega Luis Felipe Delgado Bustillos David Hernandez Quezada

2 Replicación de ácidos nucleicos TEMA 3-3.1.2

3 Tema 3-3.1.2 RESULTADO DE APRENDIZAJE Menciona los diferentes elementos que participan en la replicación del DNA en procariotes. Describe las características estructurales de las moléculas que participan en la replicación del DNA en procariotes. Explica el mecanismo de la replicación del DNA en procariotes

4 ERRORES MAS COMUNES  Confundir elementos que participan en proceso de replicación del DNA en células procariotas  Confundir los tipos de polimerasas que participan en los procesos de replicación del DNA en células procarióticas y eucarióticas  Confundir dirección de avance y de cadena naciente

5 ÍNDICE Concepto Antecedentes del concepto de Replicación Iniciación Elongación Terminación Mecanismo de replicación en Procariotas

6 Replicación Es el proceso por el que se produce una copia idéntica de DNA

7 Es necesario recordar: Procariotas: No tienen Núcleo, cromosoma circular. Bacterias

8 Ribonucleosidos - Ribonucleotidos

9 ANTECEDENTES DEL CONCEPTO DE REPLICACION Watson y Crick (1953) Sugirieron que las nuevas hebras de DNA son sintetizadas utilizando las hebras existentes (parentales) como moldes para la formación de las huevas hebras hijas complementarias a las hebras parentales

10 M. Melselson y W. F. Stahl Demostraron que el ADN se replica mediante un mecanismo semiconservativo, al hacer experimentos con cepas de E. Coli

11 Experimento de Meselson y Stahl

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13 Replicación del DNA Procarionte DNA polimerazas utilizan (ssDNA)  Molde  Desoxinucleósidos trifosfato  Arthur Kornberg 1957 (E. Coli)  Reacción  Ataque nucleofílico del gpo. 3´ OH  Hidrólisis de PP

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15  Selección de nucleótidos  “la cadena de DNA se extiende sólo en dirección 5´ A 3´

16 Horquillas de Replicación Jhon Cairns (Autorradiografia)

17 Proceso Replicación del DNA en Procariotas Iniciación Elongación Terminación

18 Elementos que participan en el proceso de Replicación del DNA en Procariotas

19 Paso 1. Iniciación  Origen de replicación (Ori c u ORC)  Proteínas A (Dna A)  Proteína Dna C  Helicasa (Dna B)  Primasa (Dna G)  Ribonucleótidos  Proteínas de Unión a ssDNA (SSP)

20 Iniciación Origen de replicación: son los puntos fijos que estan a partir de los cuales se lleva cabo la replicación, que avanza de forma secuencial formando estructuras con forma de horquilla. Por otro lado, la replicación se lleva a cabo bidireccionalmente, es decir, a partir de cada origen se sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos. Primer. Secuencias de RNA utilizadas como iniciadores de la replicación Dna A: reconocimiento del sitio de origen. DnaB: esta proteína es presenta una actividad helicasa con polaridad 5’ 3’. Esta provee la actividad helicasa necesaria para desenrollar el DNA. activación de DnaG.| Dna C: actúa conjuntamente con la Dna B. Dna G: primasa, síntesis del cebador. Girasa: libera estrés torcional generada por el desenrollamiento del DNA al introducir superenrollamientos negativos.

21 Origen de Replicación

22 Primers o iniciadores Secuencias de RNA utilizadas como iniciadores de la replicación. Son reconocidos por la polimerasa para poder comenzar la replicación.

23 Proteínas que intervienen Proteína Número dePeso Función SubunidadesKilodalton Proteína Dna A (Proteína A)152 kDaAbrir el duplex en sitios especificos Proteína Dna B (Helicasa)6300 kDaDesenrollar el DNA Proteína Dna C129 kDaRequerida para la fijación de Dna B en el origen Proteína Dna G (Primasa)160 kDaSintetisa cebadores de RNA HU219 kDaProteína tipo Histona, estimula el inicio SSB475.6 kDaSe une a ssDNA RNA polimerasa6454 kDaFaclilita la actividad de Dna A DNA Topoisomerasa II (girasa)4400 KdaLibera la tensión generada por el desenrollamiento

24 Proteínas A

25 Helicasa o Dna B

26 Topoisomerasa II (girasa I)

27 Otras proteinas que participan en la iniciacion: Hu IHF

28 PROTEINA DNAC

29 PROTEINA SSB

30 Paso 2. Elongación o Síntesis de las hebras Retrasada y Adelantada  Desoxirribonucleótidos  DNA polimerasa I y III  Primosoma  Repliosoma  Topoisomerasa I (girasa)

31 Proteína Número dePeso Función SubunidadesKilodalton SSB475.6 kDafijacion a ssDNA Proteína I (Dna I)366 kDaConstituyente del Primosoma Proteína n228 kDaUnión y función del Repliosoma Proteína n´128 kDaUnión y función del Repliosoma Proteína n´´117 kDaConstituyente del Primosoma Proteína Dna C129 kDaConstituyente del Primosoma Proteína Dna B (Helicasa)6300 kDaDesenrollar el DNA, constituyente del primosoma Proteína Dna G (Primasa)160 kDaSintesis de RNA cebador, constituyente del primosoma DNA polimerasa III2 x 10900 kDaElongación procesiva de la cadena DNA polimerasa I1103 kDaRelleno de Huecos, corte de cebadores DNA Ligasa174 kDaLigado DNA Topoisomerasa II (girasa)4400 KdaSuperenrollamiento Rep (Helicasa)165 kDaDesenrollamiento DNA Helicasa II175 kDaDesenrollamiento DNA Topoisomerasa I4100 kDaRelajamiento de superenrollamientos negativos Proteínas que intervienen

32 SSB

33 Proteina Dna B

34 Proteína Dna G Monomero

35 DNA polimerasa III

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37 DNA Ligasa

38 DNA Topoisomerasa II (girasa)

39 DNA Helicasa II

40 DNA Topoisomerasa I

41 Polimerasa I

42 Primosoma Helicasa (Dna B) y una Primasa (Dna G) Otras 5 subunidades Sintetísan El Primer

43 Síntesis de la cadena Adelantada o conductora

44 Síntesis de la cadena Retrasada

45 CADENA RETRASADA

46 Terminación

47

48

49 PROCESO DE REPLICACION DE DNA EN PROCARIOTAS

50 Pinza Beta

51 Cargador de Pinza

52 GRACIAS

53 Video 1

54 BIBLIOGRAFÍA 1.- Harvey Lodish y col; BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR; 5ta edición, Editorial Médica Panamericana; Buenos Aires, Arg 2005. 2.- Bruce Alberts y col; BIOLOGIA MOLECULAR DE LA CELULA; 4ta edición, Ediciones Omega; España 2003 3.- Donald Voet y col; FUNDAMENTOS DE BIOQUIMICA; 2DA EDICIÓN, Editorial Médica Panamericana;Buenos Aires Arg. 2007 http://www.genemol.org/biomolespa/Enzimas/replication.html http://www.bcelular.fmed.edu.uy/Material/Replicacion.pdf http://www2.uah.es/biomodel/biomodel-misc/anim/replic/replic6.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna_de_replicaci%C3%B3n_A