Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal: Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Histología WT KO - Testículos de menor tamaño en los Sgol2 KOs Histología y estructura de los túbulos seminiferos normal: Células de Leydig, Sertoli y Meiocitos. Menor número de espermatocitos Con el fin de caracterizar el mecanismo que subyace a la esterilidad observada llevamos a cabo el estudio histopatologico de testiculos.

Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Meiosis I-II WT KO Low Maginifcation ACA/DAPI Acúmulo en p-Metafase II con cromátidas sueltas Ausencia de congresión en Metaphase II Bloqueo meiótico: no supera Anafase II SGOl2/ACA/DAPI Metaphase I Metaphase II De forma mas precisa llevamos a cabo el analisis citogenético de la espermatogenesis mediante squash/inmunofluorescencia. La primera observación mas llamativa es acumulación de MII Ausencia de Congresión Bloqueo en Anafase II

Espermatogenesis en ausencia de SGOL2: Estadio? WT KO SYCP3/ACA/DAPI Metaphase I Anaphase I 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 KO WT Interkinetochore distance (μm) Profase I Normal (Lepto-Diacinesis): SYCP3 Aumento de la distancia Intercinetocórica en Metaphase I Alteración molecular responsable de la falta de cohesión en MI: liberación prematura de REC8 entre Metafase I y Anafase I Metaphase I Anaphase I REC8/ACA/DAPI Para diseccionar el estadio en el cual se comienzan a producir las anomalías que dan lugar a este bloqueo en MII..... Estudiamos de forma mas detallada la División I (profase a MI con SYCP3).... Se comprobo que la pérdida de cohesión en las cromatidas se manifiesta tempranamente en un aumento de la distancia interkinetocorica en Anafase I La alteración molecular resposnable del defecto en cohesión es debida a una liberación prematura de REC8 Apesar del defecto de cohesión an Anafase I, la orientación de los bivalente a polos opuestos es normal debido a que en MI no provova una perdida de tensión de los microtubulos... .

Prometaphase I Metaphase I Metaphase I Anaphase I Metaphase II KO Pro-metaphase II Metaphase II Ausencia de SGOL2 provoca Activación del checkpoint de huso mitótico en metafase II WT La ausencia de SGOL2 provoca la activación del checkpoint de huso mitótico en metafase II

Espermatogenesis en ausencia de SGOL2 KO La deficiencia en SGOL2 provoca la formación de espermátidas aberrantes: Esterilidad La ausencia de segregacíón como consecuencia de la deficiencia en SGOL2 provoca la formación de espermatidas aberrantes

Oogenesis en ausencia de SGOL2 WT KO Presentan un defecto en la cohesión centromérica Los ratones mutantes Sgol2 ovulan normalmente