Congreso mundial de genética 11SEP Construcción de una molécula de ADN recombinante Conocer los pasos para realizar la construcción de una nueva molécula de ADN para combinar la información genética de 1 o más especies

Situación problemática ¿QUÉ ES EL ADN RECOMBINANTE? ¿QUE ES UN VECTOR? ¿PARA QUÉ SE PRODUCEN MOLÉCULAS DE ADN RECOMBINANTE? ¿QUÉ ES UN PLÁSMIDO? ¿QUÉ SON LAS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN? EXPLICA LOS PASOS EN FORMA DE DIAGRAMA DE FLUJO

MATERIAL: 1 Tijera (representa la enzima de restricción) 4 cajas plásticas con tapa (representan las células a las cuales le vamos a introducir el gene de interés) 4 Limpia pipas (alambres felpados) de 3 colores diferentes: - un fragmento pequeño amarillo de una pulgada (representa el gen de interés) - cuatro fragmentos color rojo de una pulgada cada uno (secuencia reconocida por la enzima de restricción) -1 limpia pipas grande de color azul (representa el plásmido)

MÉTODO 4. Las moléculas recombinantes son introducidas a la célula huésped (un proceso llamado transformación). Esto puede hacerse con un choque de temperatura o utilizando una pistola genética o por microinyección. (Colocamos las cuatro cajas en el piso y tratamos de encestar nuestra molécula de ADN recombinante). 5. Se necesita la identificación de las célula con el ADN recombinante. Muchos de estos plásmidos poseen genes que otorgan resistencia antibióticos. Las bacterias suelen crecerse en medio de cultivo con antibiótico. De esta forma las células transformadas (que poseen el plásmido con el ADN recombinante) son las que sobreviven. Las que no poseen el plásmido modificado genéticamente mueren en presencia del antibiótico. La caja que obtenga el plásmido con el ADN recombinante se le coloca la tapa que representa la protección del antibiótico. 6. La colonia de células que contienen el gen de interés es escogida o separada del resto de las célula. 1. Obtener el gen deseado. Este ADN se conoce como el ADN pasajero. Se representa por el fragmento amarillo pequeño. 2. Se prepara el ADN pasajero: a los dos extremos del fragmento de ADN pasajero se le coloca la secuencia de nucleótidos que reconoce la enzima de restricción. (Con la tijera se corta por la mitad uno de los fragmentos rojos. Cada mitad que se genera se le añade a los extremos del fragmento amarillo) 3. El ADN pasajero es unido al plásmido o vector. Para esto el plásmido que es circular debe tener una secuencia que reconoce la enzima de restricción que estamos usando. Se abre el plásmido con esta enzima y se le añade el ADN pasajero. Por complementaridad de las nucleotidos del ADN los extremos de uno se unirán al otro. El resultado es una molécula de ADN recombinante. (El fragmento azul se une por un extremo al fragmento rojo y se forma un círculo. El plásmido constará de una región roja que reconoce la tijera. La tijera corta en el centro de la región roja. Se unen las regiones rojas del plásmido con el del ADN pasajero. La molécula quedará como un círculo de color azul---rojo—amarillo—rojo--azul)

MATERIAL DE LAB. 150 GR DE CHÍCHARO SECO O CONGELADO ( NO ENLATADO) JABÓN DE TRASTOS LÍQUIDO ABLANDADOR DE CARNE 1 LICUADORA CON VASO 1 COLADERA DE PLÁSTICO POR PERSONA FOTOCOPIA DE LA PRÁCTICA PREREPORTE CONTESTAR CUESTIONARIO