Las fronteras del promotor pueden ser delimitadas delecionando progresivamente material de un lado. Cuando una deleción permite la transcripción y la siguiente la impide, la frontera del promotor se encuentra entre ambas. Curso arriba Región que se transcribe Promotor Delecionar, reconectar Transcripción Presencia de RNA: la deleción no incluye al promotor Delecionar, reconectar Ausencia de RNA: la deleción afecta al promotor La frontera del promotor se encuentra entre los extremos de las deleciones Tema 10. Transcripción
La mutagénesis de la región curso arriba del promotor de -globina identifica tres regiones cortas (centradas a –30, -75 y –90) que son necesarias para iniciar la transcripción. Corresponden a las cajas TATA, CAAT y GC. Nivel relativo de transcripción (1 = normal) Tema 10. Transcripción
Los promotores contienen diferentes combinaciones de cajas TATA, CAAT, GC y otras. SV40 temprano Timidina quinasa Histona H2B Punto de inicio Tipos de módulos Octámero Tema 10. Transcripción
Un potenciador contiene varios motivos estructurales Un potenciador contiene varios motivos estructurales. El histograma refleja todas las mutaciones que reducen la función del potenciador con respecto al tipo silvestre. Los lugares de unión de proteínas se indican debajo del histograma % de actividad Tema 10. Transcripción
Las funciones de unión a DNA y activación de la transcripción de un factor de transcripción generalmente residen en dominios independientes de la proteína Dominio de activación Dominio conector Dominio de unión a DNA Tema 10. Transcripción
La proteína GAL4 tiene regiones independientes que unen DNA, activan la transcripción (2 regiones), dimerizan, y unen el regulador GAL80 Unión a DNA Activación Activación Dimerización Unión a GAL80 Tema 10. Transcripción
La capacidad de GAL4 para activar la transcripción es independiente de su especificidad de unión a DNA. Cuando el dominio de unión a DNA de GAL4 se reemplaza por el dominio de unión a DNA de LexA, la proteína híbrida puede activar la transcripción cuando un operador LexA se coloca cerca del promotor Promotor Operador LexA Promotor Activador GAL4 Unión y transcripción No unión Unión a DNA de GAL4 Activador GAL4 Unión y transcripción No unión Unión a DNA de LexA Tema 10. Transcripción
Tabla de Latchman con elementos de secuencia promotores y potenciadores Tema 10. Transcripción
Esquema de dominios de unión a ADN de los factores de transcripción Esquema de dominios de unión a ADN de los factores de transcripción.: dedo de cinc etc Tema 10. Transcripción
Las unidades de transcripción para RNA pol I tienen un núcleo promotor y un elemento de control curso arriba. UBF1 y SL1 son necesarios para que la RNA polI se pueda unir. Se desconocen las interacciones entre factores unidos a ambas regiones controladoras El promotor de pol I tiene dos componentes Punto inicio Elemento curso arriba Núcleo del promotor El complejo de iniciación se ensambla en tres pasos UBF1 UBF1 se une a región rica en G-C SL1 se une cooperativamente a UB1 SL1 ? Pol I Tema 10. Transcripción
El análisis de deleciones muestra que el promotor de los genes de RNA 5S es interno. La iniciación de la transcripción comienza a una distancia fija (50pb) curso arriba del promotor Promotor de Pol III curso abajo del punto de inicio Punto de inicio Promotor Curso arriba Región que se transcribe La deleción de secuencias curso arriba del promotor no impide que tenga lugar correctamente la transcripción Tema 10. Transcripción
Los promotores para RNA pol III pueden estar constituidos por secuencias bipartitas curso abajo del punto de inicio (Caja A y caja B o C). O pueden estar constituidos por secuencias separadas curso arriba del punto de inicio (Oct, PSE, TATA) Punto de inicio Tema 10. Transcripción
La iniciación de la transcripción por la RNA pol III en promotores internos implica el ensamblaje de los factores TFIIIA y TFIIIC, del factor de iniciación TFIIIB y de la RNA pol III Promotores internos tipo 1 Promotores internos tipo 2 Punto de inicio Punto de inicio Caja A Caja C Caja A Caja B Tema 10. Transcripción
El complejo de iniciación se ensambla en los promotores para RNA pol II siguiendo una asociación ordenada de factores de transcripción FACTORES COMPLEJOS DE TRANSCRIPCIÓN Punto de inicio Unión al surco menor Tema 10. Transcripción
La actividad quinasa de TFIIH fosforila a la RNA pol II lo que libera al enzima y comienza la transcrioción Fosforilación RNA pol comienza la transcripción Tema 10. Transcripción