Preparaciones para Examen con el Microscopio de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste de Fases. La obtención de preparaciones adecuadas para el examen.

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1 Preparaciones para Examen con el Microscopio de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste de Fases.
La obtención de preparaciones adecuadas para el examen microscópico puede conseguirse mediante dos técnicas generales, en las que los microorganismos pueden ser examinados en estado viviente y sin teñir ó después de la aplicación de colorantes para que resalten con más claridad: a) Observación Vital: hace posible la observación de los organismos vivos suspendidos en un líquido b)  La Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.

2 Observacion Vital q Preparaciones Húmedas
 a)  Observación Vital: hace posible la observación de los organismos vivos suspendidos en un líquido q       Preparaciones Húmedas q       Preparaciones de Gota pendiente q       Tinciones Vitales -La morfología de las espiroquetas se altera mucho cuando se desecan y tiñen. -Para determinar la movilidad de las baterias. -Para determinar cambios citológicos durante la división celular. -Ofrecen ventajas para la observación con microscopía de Campo Oscuro y Contraste de Fases.

3 Preparación de Gota pendiente
Zona excavada Anillo de Vaselina Asa de Inoculación Gota de Cultivo bacteriano Cubreobjetos Cubreobjetos Gota de Cultivo Vaselina Preparación de Gota pendiente

4 Preparación del Frotis: Películas
a)  Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.Los pasos a seguir son: q       Confección del frotis ó película   q       Secado q     Fijación   q       Coloración - Producto líquido - Cultivo en medio sólido - Sangre Por calor Con alcohol metílico, formol u otros fijadores

5 Forma de Realizar una Extensión de Sangre

6 Coloración q       Coloración: es el proceso de teñir artificialmente los microorganismos con colorantes ó reactivos para facilitar su estudio microscópico. Colorante Grupo Cromóforo-         Grupo Auxócromo      Mordiente-    Soluciones acuosas ó diluídas en alcohol.

7 Tipos de Colorantes Colorantes Naturales. Colorantes Artificiales.
Los Colorantes pueden ser: Colorantes Naturales. Colorantes Artificiales. Según el tipo de grupo auxócromo, los colorantes artificiales se dividen en: A)   Acidos . Grupo auxócromo: COOH, SO3H . B )  Basicos . Grupo auxócromo: NH2 ó N(CH3 )2 C)   Neutros D) Indiferentes

8 Métodos de Coloración Los métodos de Coloración son:
a) Coloraciones Simples: fucsina fenicada diluída, azul de metileno, cristal violeta y safranina. b)  Coloraciones Selectivas ó Estructurales: para cápsulas, gránulos metacromáticos, esporas, flagelos, etc. en bacterias. c) Coloraciones diferenciales : Tinción de Gram, Tinción de Ziehl Neelsen d) Coloraciones Panópticas : Tinción de Giemsa, Tinción de Mae Grenwald-Giemsa Tinción de Wright.

9 CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA
FIJACIÓN CRISTAL VIOLETA TRATAMIENTO CON IODO DECOLORACIÓN CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA

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