Universidad Técnica de Ambato Facultad de Ciencias de la Salud Laboratorio Clínico Química Clínica Integrantes: Joel Banda Josselyn Mayorga Jhordan Montenegro.

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1 Universidad Técnica de Ambato Facultad de Ciencias de la Salud Laboratorio Clínico Química Clínica Integrantes: Joel Banda Josselyn Mayorga Jhordan Montenegro Darwin Pashay Christian Valencia David Yanchatuña Principios de espectrofotometría

2 Espectrofotómetro Realiza Análisis Cuantitativos Empleando Métodos Instrumentales

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4 fenómeno, vista. Espectrofometría Por espectrofotometría visible entendemos a un método específico que es el encargado del análisis óptico Es un método cuantitativo de análisis químico que utiliza la luz para medir las concentraciones de las sustancias químicas. Es la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe o transmite un sistema químico en función de la longitud de onda. spectrumphoto Imagen,Luz metron Medida, instrumento

5 Espectrofómetro Es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Son útiles debido a la relación de la intensidad del color en una muestra y su relación a la cantidad de soluto dentro de la muestra.

6  Espectrofotómetro de absorción atómica.  Espectrofotómetro de absorción molecular (se conoce como espectrofotómetro UV-VIS).  Espectrofotómetro infrarrojo.  Espectrofotómetro UV visible.

7 La espectrofotometría se usa para diversas aplicaciones, como: análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación, estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas, detección de niveles de contaminación en aire y agua, y determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.

8 La espectrofotometría tiene una gran aplicación en las determinaciones cuantitativas en muchas áreas, las cuales, en su mayoría, en la actualidad están autorizadas por NOM (Norma Oficial Mexicana) y se publican Ejemplos de las aplicaciones y determinaciones espectrofotométricas

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10 Los componentes del espectrofotómetro son: Cámara/Compartimiento Pantalla LCD Teclas Desplazadoras Teclas DEC/INC. Sel. Tecla de ajuste MODE Imprimir

11 Los componentes externos del espectrofotómetro son: 1.- Botón encendido y calibración al aire (0%T).} 2.- Celda de compartimiento de la muestra. 3.- Foco del piloto. 4.- Botón “selector de longitud de onda”. 5.- Botón de calibración 6. Compartimiento de la muestra. digital o LCD. MODE o selectora de funciones. DEC.

12 Los componentes internos del espectrofotómetro son: La fuente de luz ilumina la muestra química o biológica, pero para que realice su función debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida.

13 Lámpara de deuterio e hidrógeno. Produce un espectro continuo en la región UV. absorbe fuertemente a longitudes de onda menores que350 nm, las lámparas de deuterio requieren la utilización de cubetas de cuarzo. Lámpara de filamento de tungsteno. Es la fuente más común de radiaciónvisible e infrarrojo cercano, se utiliza en la región de longitud de onda de 350 a 2500 nm.

14 Emite luz producida por un arco eléctrico (también llamado arco voltaico). Esta tipo de fuente se usa en EU como repuestos para los exámenes de ingeniera. El tipo de lámpara se nombra según el gas en este caso xenón. Pero también puede ser: néon, argón, kriptón, sodio, haluro metálico y mercurio. Lámpara de arco de xenón

15 Es la parte más importante del equipo, determinando en gran parte su calidad. Son dispositivos que filtran el espectro producido por la fuente, dejando "pasar" sólo radiaciones en un rango de longitud de onda determinada.

16 Filtros de interferencia Proporciona bandas de radiación bastante más estrechas que el filtro de absorción. Su funcionamiento se basa en la interferencia óptica, esto es, la interferencia destructiva entre la radiación que se quiere eliminar..

17 Son superiores en calidad a los filtros. El monocromador de un espectrofotómetro aísla las radiaciones de longitud de onda deseada, logrando obtener luz monocromática. Un monocromador está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. Existen dos tipos, los de red y los de prisma. Los principios de su funcionamiento están fuera de los alcances de esta guía. Monocromadores

18 El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada longitud de onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz logrando que se redireccione hacia la rendija de salida.

19 Convierte la energía radiante en una señal eléctrica. Detector se encarga de evidenciar una radiación para que posteriormente sea estudiada y saber a qué tipo de respuesta se enfrentarán (fotones o calor). Muestra

20 Detector de que responde a fotones Detector que responde al calor

21 Unacubetaocubetade espectrofotómetro es un pequeño tubo de sección circular o cuadrada, sellado en un extremo, fabricado en plástico, vidrio o cuarzo (transparente a la luz ultravioleta) y diseñado para mantener las muestras durante los experimentos de espectroscopia.1 Las cubetas deben ser tan claras o transparentes como sea posible, sin impurezas que puedan afectar a una lectura

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23 El espectrofotómetro realiza dos funciones principales: 1.Ofrece información de una muestra sobre la naturaleza de la sustancia que contiene. 2.Señalaindirectamentelacantidaddelasustanciaainvestigarquese encuentra presente en la muestra

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25 Intervalo de longitud de onda (nm) Color de la luz de la absorbancia Color complementario transmitido 400-435VioletaAmarillo verdoso 435-480AzulAmarillo 480-490Azul verdosoAnaranjado 490-500Verde azuladoRojo 500-560VerdePúrpura 560-580Amarillo verdosoVioleta 580-595AmarilloAzul 595-650AnaranjadoAzul verdoso 650-750RojoVerde Azulado

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28 La cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la distancia recorrida por la luz. Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pero ahora, pensemos que ambos tiene la misma cantidad de agua y la misma concentración de azúcar De la misma forma que se explicó en la ley de Beer.

29 La cual es solo una combinación de las citadas anteriormente. Al hacer pasar una cantidad de fotones o de radiaciones, por las leyes mencionadas anteriormente, hay una pérdida

30 La refracción es el cambio de dirección que experimenta una onda al pasar de un medio material a otro. Solo se produce si la onda incide oblicuamente sobre la superficie de separación de los dos medios y si estos tienen índices de refracción distintos. El fenómeno se encuentra frecuentemente en ondas electromagnéticas.

31 Teoría ondulatoria de la luz. EnlarefracciónsecumplenlasleyesdeducidasporHuygensquerigen todo el movimiento ondulatorio:

32 La reflexión es el cambio de dirección de una onda, que al estar en contacto con la superficie de separación entre dos medios cambiantes, regresa al punto donde se originó.

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