Proteínas III Organización de la clase

Presentación del tema: "Proteínas III Organización de la clase"— Transcripción de la presentación:

1 Proteínas III Organización de la clase
Plegamiento y desplegamiento. Caso de la ribonucleasa Chaperonas, Priones Proteínas autofluorescentes

2 Albúmima de huevo se desnaturaliza y “agrega”
q ¿Plegamiento o folding Qué le pasa a una proteína frente a altas temperaturas o PH extremo? Albúmima de huevo se desnaturaliza y “agrega”

3 y con agentes químicos como urea o guanidinio?

4 ejemplo: Ribonucleasa
Plegamiento o folding ejemplo: Ribonucleasa Christian Anfinsen Premio Nobel 1972

5 Plegamiento o folding Si a la proteína desnaturalizada
por 1) MSH 2) calor o urea se enfría lentamente y/o se elimina la urea, vuelve a adquirir actividad → Dogma de Anfinsen ( s): La estructura 3-D nativa determinada sólo por secuencia de aminoácidos (estructura 1ia) No es válido para todas las proteínas Además: chaperonas

6 CHAPERONAS las chaperonas favorecen el plegamiento
plegado chap llega rápido desplegado ejemplos: Hsp (heat-shock proteins) chap llega tarde las chaperonas favorecen el plegamiento de sus proteínas sustrato → proteínas “nativas”

7 CHAPERONAS ejemplo: GroEL (60 kDa) + GroES (10 kDa)
GroEL: 2 anillos superpuestos de 7 subunidades iguales cada uno formando un “barril” conformación plegada conformación desplegada es “masajeada” dentro del barril las chaperonas favorecen el correcto plegamiento de sus proteínas sustrato → proteínas “nativas”

8 PRIONES (PRoteína-INfecciosos)
Enfermedad de las vacas locas (Encefalopatía bovina espongiforme) Scrapie en ovejas Creutzfeldt–Jakob disease (CJD) en humanos Stanley Prusiner Premio Nobel1997

9 ¿cómo se explica a nivel molecular?
fibras al microscopio agujeros en cerebro que semeja esponja ¿cómo se explica a nivel molecular?

10 la proteína sustrato y el prion tienen la misma secuencia!
soluble insoluble CHAPERONA patógena modelo del multímero lineal. Explica la formación de las fibras observadas la proteína sustrato y el prion tienen la misma secuencia!

11 Pregunta: ¿la existencia de proteínas tipo priones puede generar perpetuación de una rara conformación proteica, en sucesivas divisiones celulares? En otras palabras, ¿puede existir herencia a nivel proteico? Respuesta: para pensar en el colectivo, a discutir en clase

12 POLIPEPTIDOS FLUORESCENTES
1970s: Osamu Shimomura purificó a partir de la medusa bioluminiscente Aequorea victoria una proteína que, iluminada con luz azul, fluorescía verde : GFP (Green Fluorescent Protein) En los 90s, Douglas Prasher secuenció gen GFP , y al quedarse sin financiamiento, se la envió a Martin Chalfie, quien expresó el gen en bacterias. Para su sorpresa, al ser iluminadas con luz azul, las bacterias se veían verdes y dedujo que la “información” para que GFP fluorezca estaba contenida en su propia secuencia

13 en 2008 Shimomura, Chalfie y Tsien premios Nobel en Química.
fragmento aislado responsable de la absorción del color azul de toda la proteína: tripéptido Ser65 - Tyr66 - Gly67. Fluoresce sólo en entorno hidrofóbico Roger Tsien ( ) mutaciones al azar en gen GFP y expresar en bacterias: → azules, celestes o amarillas: Tyr66  His66 azul Tyr66  Trp66 celeste Thr203  Tyr203 amarilla GFP y sus derivadas en la “paleta de colores” extendida por Tsien revolucionaron la investigación en biología celular y molecular porque permitieron “marcar” proteínas en células vivas y observar su localización. en 2008 Shimomura, Chalfie y Tsien premios Nobel en Química. Prasher, que se vio forzado a dejar la ciencia, trabajaba de chofer de colectivos y se enteró por la radio Ser Tyr Gly pregunta para ejercitación: ¿qué pasaría con la fluorescencia frente a SDS o urea?