Subsaturación saturación Vmax v Vmax/2 Km1 [S].

Presentación del tema: "Subsaturación saturación Vmax v Vmax/2 Km1 [S]."— Transcripción de la presentación:

1 subsaturación saturación Vmax v Vmax/2 Km1 [S]

2 Condiciones iniciales y linealidad

3 Influencia del pH sobre la actividad enzimática

4 Curva de estabilidad según pH de incubación

5 AH A- + H+ pH = pKa + log [A-]/[AH] Si el pH = pKa  AH = A- Si el pH = pKa + 1  AH = A-/10 Si el pH = pKa + 2  AH = A-/100

6 0.94

7 Influencia de la T sobre la actividad enzimática
70 50 60 40 80 25

8

9 Curva de estabilidad según T de incubación

10 Inhibición de la actividad enzimática

11 Inhibición competitiva
k kp E + S ES  E + P k-1 k+2 E + I EI k-2

12 S X I

13 S X I S I S X I

14 fumarato succinato PABA Sulfanilamida malonato
FAD FADH 2 Succinato deshidrogenasa COOH COOH fumarato succinato PABA PABA Sulfanilamida malonato El oxalato es un inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa, una enzima del ciclo de los ácidos tricarboxílicos Las sulfanilamidas son antibióticos sintéticos. Son inhibidores competitivos de la síntesis de folato en bacterias (inhiben a la dihidrofolato sintetasa), uno de cuyos precursores es el ác. p-aminobenzoico.

15 DHF metotrexato

16 GMP AMP

17

18 Trimetoprima (más liposoluble)
Sulfametoxazol PABA Trimetoprima (más liposoluble)

19 Ác. fólico

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22 Determinación de la ecuación de velocidad
Ks kp E + S ES  E + P + I EI v = kp [ES] Ki [E]t está distribuido en 3 especies: [E], [ES] y [EI].

23 Por lo tanto [E]t = [E] + [ES] + [EI] dividiendo la ecuación anterior por [E]t como

24 Entonces, pasando kp al primer miembro y reemplazando [ES] y [EI] queda:
Al simplificar [E] y reordenar, queda:

25 Vmax = 100 Km = 7 [I] = 0 [I] = 5, Ki = 5 [I] = 5, Ki = 2

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27 Parcialmente competitiva
Ks kp E + S ES  E + P I I EI + S D EIS  E + P Ki´ Ki kp K´s

28 Inhibición no competitiva
k kp E ES  E + P k-1 k-5 k+5 k-3 k+3 k+4 EI  ESI k-4

29 v = kp [ES] considerando que la concentración de los complejos es

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33 Inhibición parcialmente no competitiva
Se da cuando ESI se descompone en EI + P, siendo la velocidad v = k [ES] + k´ [ESI] k kp E ES  E + P k k´p EI ESI  EI + P k-4 k-1 k+3 k-3 k+5 k-5

34 Inhibición mixta Ks kp E + S ES  E + P k-1 Ki K´i K´s EI + S ESI
v = k [ES]

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36 Ki< Ki´ Ki> Ki´

37 Inhibición acompetitiva
k kp E ES  E + P k-1 Ki ESI

38 ([E]t - [ES] - [ESI])*[S] = Ks [ES]
[ES][I] = Ki [ESI] v = k+2 [ES]

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41 Inhibición por sustrato
k kp E + S ES  E + P k S Ki ESS

42 L-malato + NAD+  oxaloacetato + NADH + H+
Otras: invertasa (Glc), piruvato kinasa (ADP)

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44 Ks = 25 Ks = 15 Ks = 7

45 Gráficos de Dixon [I]1 [I]2 [I]3 [I]4

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52 Activadores Vmax v [A]

53 100 % activación A0.5 [A]