WORKSHOP EDUNABIO-ARGENTINA

Presentación del tema: "WORKSHOP EDUNABIO-ARGENTINA"— Transcripción de la presentación:

1 WORKSHOP EDUNABIO-ARGENTINA
UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA FACULTAD DE AGRONOMIA WORKSHOP EDUNABIO-ARGENTINA Evaluación in vitro de hogos nativos antagonistas a Moniliophthora roreri (Cif. & Par., Evans et al), en el cultivo de cacao (Theobroma cacao L.) Autores: Mejía-Betancourt Francisca Alvarado-Rodríguez Rommel Asesores: Vega-Jarquín C Blandón-Díaz Ulises Marzo, 2017

2 OBJETIVO Generar información científica sobre la capacidad antagónica mostrada in vitro por hongos nativos contra Moniliophthora roreri agente causal de la Moniliasis del cacao.

3 En el 2015 las exportaciones alcanzaron 3,839.20 tm
INTRODUCCIÓN IICO 2015 reconoce a Nicaragua como productor de cacao fino En el 2015 las exportaciones alcanzaron 3, tm CETREX (2016) 10,500 productores 11,017 ha sembradas 15.94 qq.ha-1 MEFCCA (2013) Fungicidas sintéticos con alto costo (Ramírez et al., 2011). Perdidas de la mitad de producción por Moniliasis (Ávila et al., 2013). Daños a la salud y ambiente (López et al., 2006).

4 MATERIALES Y MÉTODOS Zonas muestreos Ubicación del estudio
Laboratorio de Microbiología UNA, Facultad de Agronomía. 12°08´51.24” latitud norte 86°09´50.66” longitud oeste 59 msnm.

5 Recolección y manejo de las muestras
Colecta de frutos con moniliasis Muestras de tejido (fruto, hoja y corteza) Colecta de antagonistas Muestras de suelo

6 Aislamiento de Moniliophthora roreri
Metodología 1. Modificada de Suárez y Rangel (2014) Lavado de fruto Cortes parte enferma/sana Explantes 5×5 mm Metodología 2. Modificada de Villamil et al. (2012) PDA

7 Aislamiento de hongos antagonistas
Procesamiento de suelo Modificado de Suárez y Rangel (2014) PDA con 800 µl·l-1 Sulfato de Gentamicina 10-2 10-3 10-4 10-1 100 µL 10-4 10-3 Suelo Procesamiento de tejido vegetal Modificado de Arnold et al. (2000) Cortes de 5×5 mm Hoja

8 Aislamiento de hongos antagonistas
Procesamiento de tejido vegetal Modificado de Arnold et al. (2000) Corteza Cortes de 5×5 mm Cortes de 5×5 mm Fruto

9 Protocolo de desinfección de tejido vegetal
Condiciones: - PDA - pH 5.5 - 800 µl·l-1Sulfato de Gentamicina - 25 °C

10 Identificación de Moniliophthora roreri
Clave taxonómica de Barnett y Hunter (1999), características macroscópicas descritas por Phillips et al. (2006) y microscópicas por Evans et al. (1978). Identificación de hongos antagonistas Claves taxonómicas: Barnett y Hunter (1999) Domsch, Gams y Anderson (1980) Schroers et al., (1999)

11 Pruebas de antagonismo in vitro
Técnica de enfrentamiento dual (Howell, 2003), evaluando 68 tratamientos. Se utilizó un DCA con 6 réplicas. ANDEVA y diferencia de medias Tukey (α=0.05). Distancia 6 cm Distancia 4 cm CULTIVO DUAL Paecilomyces-Moniliophthora CULTIVO DUAL Clonostachys-Moniliophthora CULTIVO DUAL Trichoderma-Moniliophthora Condiciones: PDA, pH 5.5 , 25 °C, 12 horas luz/12 oscuridad

12 Competencia por espacio y nutrientes
Guigón et al. (2010) TCR= (CRF - CRI) / TI Tasa de Crecimiento Variables de crecimiento radial Ritmo de Crecimiento French y Hebert (1982) variables Promedio del crecimiento radial acumulado en mm Media de Crecimiento Tiempo de contacto Antagonista-Patógeno Días Competencia por espacio y nutrientes Porcentaje de Inhibición del Crecimiento Radial Samaniego et al. (1989 PICR= [(R1 - R2)/R1] x 100 Competencia por sustrato Escala de Bell et al., (1982) Micoparasitismo Interacciones hifales antagonista-patógeno

13 RESULTADOS Y DISCUSIÓN Aislamiento e identificación de M. roreri

14 Aislamiento e identificación de M. roreri

15 Aislamiento e identificación de M. roreri
Forma de las esporas de M. roreri Elípticas (E) Subglobosas (S) Globosas (G) Longitud y porcentaje de las esporas de M. roreri Forma Longitud (µm) % Globosas 4.91 68 Subglobosas 7.79 16 Elípticas 10.37

16 Aislamiento e identificación de antagonistas
2 Corteza 11 Aislados Trichoderma 5 4 Hoja 5 Aislados Paecilomyces Fruto 1 Aislado Clonostachys Suelo

17 Localidad y procedencia de aislados de hongos antagonistas

18 Hongos nativos con mayor potencial antagónico
Aislado Código MCR (mm) TCR (mm d-1) PICR (%) Días a contacto A-P TSMS 27.43 16.8 46.77 PaLV 26.63 2.06 67.43 Clonost 24.30 3.72 67.62 2- 3 d 6- 8 d 7 d

19 Trichoderma sp vs M.roreri Paecilomyces sp y Clonostachys sp
Hongos nativos con mayor potencial antagónico Competencia por espacio y nutrientes según escala de Bell et al., (1982) Trichoderma sp vs M.roreri Paecilomyces sp y Clonostachys sp vs M.roreri Enfrentamiento TSMF-MUF (a) Enfrentamiento TERS-MLV (b) Enfrentamiento PaLV-MSM (a) Enfrentamiento Clonost-MUF (b) a b Grado 1 Grado 2 Grado 3

20 Hongos nativos con mayor potencial antagónico
Micoparasitismo Trichoderma sp (T) M. roreri (M) Penetración Enrollamiento Lisis

21 EDUNABIO- MSc. Camilo Beltrán y Dra. Martha Gómez CORPOICA - Colombia
AGRADECIMIENTO EDUNABIO- MSc. Camilo Beltrán y Dra. Martha Gómez CORPOICA - Colombia RITTER SPORT – Nicaragua UNA

22 Gracias por su atención