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Direccionamiento a gen con Cre/loxP
Direccionamiento a gen con Cre/loxP. a) Deleción condicional mediante la recombinasa Cre. El gen que codifica para la dna polimerasa β establecido como objetivo es modificado al flanquear el gen con sitios loxP (en aras de la sencillez, sólo se muestra un alelo). Se generan ratones a partir de células es mediante procedimientos estándar. El apareamiento del ratón modificado en cuanto a loxP con un transgénico Cre creará ratones doble transgénico en los cuales el gen que codifica para la dna polimerasa β flanqueado por loxP estará eliminado en el tejido donde se expresa Cre. En este ejemplo, la Cre es expresada en tejido del timo, de modo que la deleción del gen flanqueado por loxP sólo ocurre en el timo del transgénico doble. Otros tejidos y órganos aún expresan el gen flanqueado por loxP. b) Activación de la expresión de gen usando Cre/lox. Una secuencia stop traduccional flanqueada por loxP es insertada entre el promotor y el gen en potencia tóxico, y se generan ratones a partir de células es usando procedimientos estándar. Estos ratones son apareados con una línea transgénica que porta el gen que codifica para Cre impulsado por un promotor específico para tejido. En este ejemplo, la Cre es expresada en el timo, de modo que el apareamiento da lugar a la expresión del gen tóxico (azul) únicamente en el timo. Al usar esta estrategia, es posible determinar los efectos de la expresión del gen en potencia tóxico de una manera específica para tejido. [Adaptado de B. Sauer, 1998, Methods 14 :381, con modificaciones a a) tomadas de De: Sistemas y métodos experimentales, KUBY. Inmunología, 7e Citación: Owen JA, Punt J, Stranford SA, Jones PP. KUBY. Inmunología, 7e; 2016 En: Recuperado: October 24, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved
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