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Producción e identificación de una clona de cDNA que codifica para el gen β del receptor de célula T. El diagrama de flujo esboza el procedimiento usado por S.M. Hedrick, M.M. Davis, y colegas, para obtener clonas de cDNA marcadas con 32P que corresponden a mRNA específicos para células T. Se usó hibridación sustractiva de dna para aislar fragmentos de cDNA específicos para célula T que fueron clonados y marcados con 32P. Las clonas de cDNA marcadas se usaron para sondear inmunoelectrotransferencia Southern de dna aislado a partir de hígado embrionario (los genes que codifican para tcr deben estar en la configuración de la línea germinal), a partir de un linfoma de células B (los genes que codifican para tcr también deben estar en la configuración de la línea germinal), y a partir de un panel de clonas de células T. (Los genes que codifican para tcr deben estar dispuestos de manera diferente en cada clona.) Su clona, TM86, codifica para un gen que se reordenó de manera diferente en cada clona de célula T analizada. La comparación de su secuencia con la de la secuencia proteínica del tcr αβ aislado por Kappler y Marrack reveló que TM86 codifica para la cadena β del tcr. El cDNA TM90 identificó el gen que codifica para otra molécula de membrana de célula T que no pasa por reordenamiento. [Basado en S. M. Hedrick et al., 1984, Isolation of cDNA clones encoding T cell-specific membrane-associated proteins, Nature 308:149.] De: Organización y expresión de genes que codifican para receptor de linfocito, KUBY. Inmunología, 7e Citación: Owen JA, Punt J, Stranford SA, Jones PP. KUBY. Inmunología, 7e; 2016 En: Recuperado: October 17, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved
![Producción e identificación de una clona de cDNA que codifica para el gen β del receptor de célula T. El diagrama de flujo esboza el procedimiento usado por S.M. Hedrick, M.M. Davis, y colegas, para obtener clonas de cDNA marcadas con 32P que corresponden a mRNA específicos para células T. Se usó hibridación sustractiva de dna para aislar fragmentos de cDNA específicos para célula T que fueron clonados y marcados con 32P. Las clonas de cDNA marcadas se usaron para sondear inmunoelectrotransferencia Southern de dna aislado a partir de hígado embrionario (los genes que codifican para tcr deben estar en la configuración de la línea germinal), a partir de un linfoma de células B (los genes que codifican para tcr también deben estar en la configuración de la línea germinal), y a partir de un panel de clonas de células T. (Los genes que codifican para tcr deben estar dispuestos de manera diferente en cada clona.) Su clona, TM86, codifica para un gen que se reordenó de manera diferente en cada clona de célula T analizada. La comparación de su secuencia con la de la secuencia proteínica del tcr αβ aislado por Kappler y Marrack reveló que TM86 codifica para la cadena β del tcr. El cDNA TM90 identificó el gen que codifica para otra molécula de membrana de célula T que no pasa por reordenamiento. [Basado en S. M. Hedrick et al., 1984, Isolation of cDNA clones encoding T cell-specific membrane-associated proteins, Nature 308:149.]](http://slideplayer.es/slide/13081252/79/images/1/Producci%C3%B3n+e+identificaci%C3%B3n+de+una+clona+de+cDNA+que+codifica+para+el+gen+%CE%B2+del+receptor+de+c%C3%A9lula+T.+El+diagrama+de+flujo+esboza+el+procedimiento+usado+por+S.M.+Hedrick%2C+M.M.+Davis%2C+y+colegas%2C+para+obtener+clonas+de+cDNA+marcadas+con+32P+que+corresponden+a+mRNA+espec%C3%ADficos+para+c%C3%A9lulas+T.+Se+us%C3%B3+hibridaci%C3%B3n+sustractiva+de+dna+para+aislar+fragmentos+de+cDNA+espec%C3%ADficos+para+c%C3%A9lula+T+que+fueron+clonados+y+marcados+con+32P.+Las+clonas+de+cDNA+marcadas+se+usaron+para+sondear+inmunoelectrotransferencia+Southern+de+dna+aislado+a+partir+de+h%C3%ADgado+embrionario+%28los+genes+que+codifican+para+tcr+deben+estar+en+la+configuraci%C3%B3n+de+la+l%C3%ADnea+germinal%29%2C+a+partir+de+un+linfoma+de+c%C3%A9lulas+B+%28los+genes+que+codifican+para+tcr+tambi%C3%A9n+deben+estar+en+la+configuraci%C3%B3n+de+la+l%C3%ADnea+germinal%29%2C+y+a+partir+de+un+panel+de+clonas+de+c%C3%A9lulas+T.+%28Los+genes+que+codifican+para+tcr+deben+estar+dispuestos+de+manera+diferente+en+cada+clona.%29+Su+clona%2C+TM86%2C+codifica+para+un+gen+que+se+reorden%C3%B3+de+manera+diferente+en+cada+clona+de+c%C3%A9lula+T+analizada.+La+comparaci%C3%B3n+de+su+secuencia+con+la+de+la+secuencia+prote%C3%ADnica+del+tcr+%CE%B1%CE%B2+aislado+por+Kappler+y+Marrack+revel%C3%B3+que+TM86+codifica+para+la+cadena+%CE%B2+del+tcr.+El+cDNA+TM90+identific%C3%B3+el+gen+que+codifica+para+otra+mol%C3%A9cula+de+membrana+de+c%C3%A9lula+T+que+no+pasa+por+reordenamiento.+%5BBasado+en+S.+M.+Hedrick+et+al.%2C+1984%2C+Isolation+of+cDNA+clones+encoding+T+cell-specific+membrane-associated+proteins%2C+Nature+308%3A149.%5D.jpg "De: Organización y expresión de genes que codifican para receptor de linfocito, KUBY. Inmunología, 7e. Citación: Owen JA, Punt J, Stranford SA, Jones PP. KUBY. Inmunología, 7e; 2016 En: image=/data/books/1953/owen_c07_fig png&sec= &BookID=1953&ChapterSecID= &imagename= Recuperado: October 17, Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved.")
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