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Mediciones elispot de secreción de interferón-γ por células nkt
Mediciones elispot de secreción de interferón-γ por células nkt. Un anticuerpo de captura contra interferón γ se unió a un pozo de una microplaca cubierto con difluoruro de polivinilideno, y se añadieron células nkt a la concentración apropiada. Después de una estimulación de 17 horas con forbol miristoil acetato y ionomicina, las células se eliminaron por lavado, y se añadió un anticuerpo de detección específico para interferón γ, conjugado con biotina, y se permitió que se uniera. Después de eliminar el exceso de anticuerpo de detección, se añadió fosfatasa alcalina conjugada con estreptavidina, seguido (después de eliminar por lavado la enzima excesiva) por el sustrato de bcip/nbt. El bcip/nbt es convertido desde una solución incolora al sustrato de color pardo-negro que se observa en la figura. La fotografía muestra los resultados de la estimulación de las células nkt con pma/ionomicina. Cada mancha de color pardo-negro representa el sitio de una célula que secretó interferón γ. Estas manchas pueden encontrarse bajo un microscopio de disección a bajo poder. [Nicole Cunningham y Jenni Punt, Haverford College.] De: Sistemas y métodos experimentales, KUBY. Inmunología, 7e Citación: Owen JA, Punt J, Stranford SA, Jones PP. KUBY. Inmunología, 7e; 2016 En: Recuperado: October 12, 2017 Copyright © 2017 McGraw-Hill Education. All rights reserved
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