Cromatografía de líquidos

Presentación del tema: "Cromatografía de líquidos"— Transcripción de la presentación:

1 Cromatografía de líquidos

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3 En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria

4 técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla
técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase móvil. La fase estacionaria es sílica que se ha tratado con RMe2SiCl . La fase móvil actúa de portador de la muestra.

5 A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.

6 APLICACIONES Esta técnica esta indicada para la separación de compuestos orgánicos semivólatiles. Hidrocarburos Poliaromáticos (PAHs), Aminoácidos: OTA, Ácido Fólico, Herbicidas, Vitaminas, Acido tenuazonico, Formaldehído…etc. Rango de trabajo para muestras líquidas: µg L-1 - mg L-1 Rango de trabajo para muestras sólidas: µg Kg-1 - µg g-1

7 EQUIPOS VARIAN 920 LC Bomba de gradiente cuaternaria . Columna termostatizada rango de temperatura : ambiente+10ºC- 65ºC. Automuestreador (200 vialesx2ml) con jeringa de inyección (0-50μl) con posibilidad de realizar incrementos de 1μl. Detector PDA (diodo array) con un rango de longitudes de onda ( nm) con lámpara de deuterio para UV y halógena de cuarzo para visible, con una resolución espectral

8 Bomba de gradiente ternaria VARIAN INERT 9012 Detector Ultravioleta/Visible Jasco UV-975 Detector de Fluorescencia Jasco FP-920

9 TIPO DE MUESTRAS Aguas, suelos, alimentos, extractos…
TIPO DE MUESTRAS Aguas, suelos, alimentos, extractos….etc (para cualquier tipo de matriz contactar con el laboratorio)

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11 Selección de un método de cromatografía líquida
El conocimiento de la estructura molecular de los componentes de la muestra puede ser muy útil en la selección de un método de cromatografía líquida. Una guía muy general para la selección de un método se da a continuación.

12 La cromatografía de absorción opera mejor en la separación por clases de compuestos o para la separación de compuestos isoméricos. La técnica de cromatografía líquido – líquido es mejor para la separación de homólogos. Los grupos funcionales que son capaces de formar enlaces de hidrógeno fuertes se retienen mucho en cromatografía de adsorción, sin embargo la CLL (Líquido – líquido) proporciona una alternativa para la separación de estos compuestos, estas serán las muestras que tienen polaridad media.